莲子肽的制备

2020/1/19 11:54:13

概述[1]

莲子营养丰富,富含多种人体所需的营养物质,具有养心安神、健脑益智、消除疲劳等药用价值。莲子所含营养物质中,除淀粉外以蛋白质含量最为丰富,每100克莲子含蛋白质17.2g,是一种优质的植物蛋白。目前科学研究已发现,将莲子蛋白用蛋白酶进行酶解转化为莲子肽,使莲子肽呈现出了莲子蛋白所不具备的多种特殊性,如吸收快、易消化、低抗原性、良好的理化和加工特性等。但目前的酶解方法得到的莲子肽分子量仍较大,这是因为蛋白质过度水解后易产生苦味,目前有报道使用端肽酶可去除苦味,但易产生大量的游离氨基酸,从而使小分子肽的提取率大为降低。

制备[2]

方法一:

选取干莲子1000g,通过粉碎机粉碎至100目以下,加入7000ml纯化水搅拌均匀,在90℃条件下,蒸煮20min;然后降温至55℃,分别加入10g淀粉酶和5g糖化酶,温度保持在55℃,搅拌酶解2.0h;酶解完后用卧螺离心机离心脱糖,液相进一步处理得到莲子低聚糖,留取固相脱糖莲子粉;将脱糖莲子粉加入3000ml纯化水,升温至50℃,再分别加入10g胰蛋白酶和5g的木瓜蛋白酶,搅拌酶解3.0h,然后升温至90℃,保持10min灭酶;灭酶后用三相离心机18000rpm下离心15min,弃去沉淀和油相取离心液,检测其中肽含量约为135.5g,游离氨基酸含量约12.3g。由于前处理步骤中会有部分蛋白质损失,肽提取率(肽质量/总蛋白质量)约为78.5%,但是被分解的蛋白质的产物中,肽含量(肽质量/肽和氨基酸总质量)为91.7%。将上述离心液先用纳滤膜为0.5nm的纳滤机过滤,再用纳滤膜为0.2nm的纳滤机脱盐并浓缩;滤液用双效浓缩器进一步浓缩,浓缩液喷雾干燥后,得到产品112.1g,其中分子量为180-500道尔顿的高活性小分子莲子肽含量为98.9%,即离心液中135.5g肽中,81.8%均为180-500道尔顿的小分子肽。

(3)将所述酶解液加热升温进行酶灭活,分离纯化,得小分子莲子肽。

方法二:

1)取新鲜、无杂质、无脂肪氧化和无霉变的莲子70kg,清洗干净后在水温为20℃条件下浸泡8小时;

2)将浸泡好的莲子冲洗干净后加入420kg纯净水在胶体磨中研磨2遍,细度需达200目,得莲子浆液;

3)选30kg新鲜、无杂质、无霉变的大豆在水温为15℃的条件下浸泡5小时;

4)将浸泡好的大豆加入纯净水180kg磨浆,浆渣分离提取蛋白,然后在135℃、7个大气压力和细度为200目条件下研磨处理30分钟,进行完全脱腥去害处理,从而达到彻底钝化大豆所固有的胰蛋白酶抑制剂、脂肪氧化酶、血球凝集素、致异味因子和易产生嘌呤的核酸等的活性,理想而完全的克服掉大豆的抗营养性、致甲状腺肿大、肠胃不适恶心、胀气和豆腥苦涩味易痛风等五大副作用;

5)将上述莲子蛋白浆液与大豆蛋白浆液混合后通过压力为600kg的高压均质机均质处理3遍;

6)再将均质的物料通过2700转/分钟的乳化罐中搅拌10分钟,使莲子蛋白和大豆蛋白在剪切破碎中充分融合;

7)将上述物料在温度为120℃的条件下,加热钝化20分钟,这样可将莲子的高含量淀粉α化和杀灭掉大豆中的芽孢杆菌,同时可实现对莲子蛋白和大豆蛋白进一步的变性处理;

8)将钝化变性处理后的物料通过管式换热器经15秒的冷却处理至35℃后加入重量比为0.02%的脂肪酶、0.02%的淀粉酶和0.08%的菠萝蛋白酶,然后再将温度调整至45℃,经过2700转/分钟搅拌处理,保持恒温生化12个小时;

9)将生化后的物料经过管式换热器将物料升温至100℃,灭酶时间20秒;

10)将灭酶后的物料在温度为65℃的条件下经过已预涂好食品级硅藻土助滤剂的板框过滤析出系统处理,得500kg含肽量为1.2~2.0%的莲子肽原液,硅藻土的预涂量为0.5kg/平方米板框滤网面积,板框滤网为800~1200目;

11)将上述析出的全莲子肽液经过多级浓缩处理,可得含肽4%以上的全莲子肽营养液200kg,再经过多级过滤通过无菌分装可得全莲子肽口服液和全莲子高肽快速增能活性运动饮;另外通过真空喷雾干燥系统,可得20kg全莲子肽粉,亦可通过无菌胶囊制作系统和无菌片剂制作系统制成全莲子肽胶囊、全莲子肽片剂。

主要参考资料

[1] 马忠杰,王惠琴. . 莲子的抗衰老实验研究. 中草药(2期), 81-82.

[2] 唐崇钦, 左宝玉, 李国清, 张泉, 姜桂珍, & 冯丽洁, et al. (1999). 莲子在光下萌发过程中叶绿体色素蛋白质复合体及光化活性的变化. 植物学报(英文版), 41(6), 608-612.

[3] 夏琨. (2012). 莲子分离蛋白对小鼠抗衰老作用的研究. (Doctoral dissertation, 南京师范大学).

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