背景及概述[1]
2',7'-二氯荧光素二乙酸酯是一种荧光探针,作为一种非极性化合物,能够迅速扩散到细胞内,细胞内的酯酶将其水解为非荧光的二氯荧光素(DCFH),从而使探针被装载到细胞内。
应用举例[1]
CN201610307068.3报道了卷烟烟气的体外毒理学研究,具体是一种卷烟烟气有害成分诱导细胞氧化应激ROS的测定方法。卷烟烟气是一种复杂的气溶胶,烟气中的化学成分多达8000余种,同时包含有 1014-1016个自由基,具有氧化性。卷烟烟气中氧化性物质会诱导细胞内活性氧(ROS)的增加,诱导机体产生的ROS会对细胞内蛋白质、脂质和遗传物质(DNA)等造成损伤。测定方法特征在于:是利用荧光探针2',7'-二氯荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)检测细胞氧化损伤后胞内活性氧ROS水平,包括以下具体步骤:1)配置实验试剂;2)细胞接种培养;3)、DCFH-DA探针装载;4)、卷烟烟气有害成分染毒;5)、ROS检测。机理是DCFH-DA作为一种非极性化合物,能够迅速扩散到细胞内,细胞 内的酯酶将其水解为非荧光的二氯荧光素(DCFH),从而使探针被装载到细胞内,在ROS存在的条件下,DCFH被氧化生成荧光物质DCF,发出绿色荧光,荧光强度与细胞内活性氧水平成正比。本发明的特点是可快速、灵敏地检测卷烟烟气有害成分诱导的细胞氧化损伤程度,对研究卷烟烟气有害成分对于诱导细胞内活性氧ROS的影响有非常重要的意义。
参考文献
[1] [中国发明] CN201610307068.3 卷烟烟气有害成分诱导细胞氧化应激ROS的测定方法