背景[1-3]
Anti-JAK1抗体是一类可以特异性结合Anti-JAK1的多克隆抗体,主要用于检测Anti-JAK1的Western Blot、IHC-P、IF、ELISA、Co-IP等多种免疫学实验。
检测原理:双抗体夹心法测定标本中Anti-JAK1水平。用纯化的Anti-JAK1抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入Anti-JAK1,再与HRP标记的Anti-JAK1抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的Anti-JAK1呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中Anti-JAK1浓度。
JAK1是人类酪氨酸激酶蛋白,对于某些I型和II型细胞因子的信号传导是必需的。它与I型细胞因子受体的共同γ链(γc)相互作用,从IL-2受体家族(如IL-2R,IL-7R,IL-9R和IL-15R),IL-4受体中引发信号。家族(如IL-4R和IL-13R),gp130受体家族(如IL-6R,IL-11R,LIF-R,OSM-R,心肌营养素-1受体(CT-1R),睫状神经营养因子受体(CNTF)-R),神经营养蛋白-1受体(NNT-1R)和瘦蛋白-R)。
对于I型(IFN-α/β)和II型(IFN-γ)干扰素以及IL-10家族成员通过II型细胞因子受体转导信号也很重要。Jak1在启动对多种主要细胞因子受体家族的反应中起着关键作用。Jak1的丢失在新生小鼠中是致命的,可能是由于哺乳困难。在癌细胞中JAK1的表达使得个体细胞收缩,可能使它们逃离肿瘤并转移到身体的其他部位。
应用[4][5]
用于FAK、JAK1-STAT3在宫颈病变中的表达及其与HPV感染的相关性探讨研究
研究FAK、JAK1、STAT3在宫颈上皮内瘤变和宫颈癌组织中表达的情况及其与HPV感染关系,探讨四者在宫颈病变发生、发展过程中的相关性。
方法:收集143例宫颈组织标本,其中因子宫肌瘤行子宫全切术正常宫颈组织30例,手术切除的病变宫颈组织113例(28例CINⅠ,34例CINⅡ-Ⅲ和51例宫颈癌组织)。
PCR-反向点杂交法检测143位患者术前HPV-DNA的感染情况;免疫组化S-P法检测FAK、JAK1、STAT3在143例宫颈组织中表达情况。比较FAK、JAK1、STAT3在不同的宫颈病变组织和宫颈癌不同临床病理类型组织中表达的差异;并将HPV-DNA感染的情况分别与宫颈组织中FAK、JAK1、STAT3的表达进行相关性分析。
结果:1.FAK、JAK1、STAT3在对照组、CINⅠ、CINⅡ-Ⅲ及宫颈癌组织中的表达依次增高,每两组间相比较差异有显著意义(P<0.05)。
2. FAK、JAK1、STAT3的表达在患者不同年龄(年龄<60岁、年龄≥60岁)组中比较无明显差异(P>0.05)。
3. FAK、JAK1、STAT3在宫颈癌不同病理分级(高分化组,中-低分化组),不同临床分期(按FIGO2009临床分期标准Ⅰ-Ⅱ期;Ⅲ-Ⅳ期)组织中表达,有无淋巴结转移(有淋巴结转移、无淋巴结转移),各组间比较差异具有统计学意义(均P<0.05),分化程度越低,临床分期越高,有淋巴结转移,FAK、JAK1、STAT3的阳性表达率越高。
4. HPV-DNA在对照组、CINⅠ、CINⅡ-Ⅲ及宫颈癌组的检出率依次增高,除CINⅠ和CINⅡ-Ⅲ组无明显差异(P>0.05)外,其他每两组间相比较差异有显著意义(P<0.05)。
5.FAK、JAK1和STAT3在宫颈组织中的表达与HPV的感染均呈正相关(均P<0.01)。
参考文献
[1]Differential radiation sensitization of human cervical cancer cell lines by the proteasome inhibitor velcade(bortezomib,PS-341)[J].Serra Kamer,Qing Ren,Adam P.Dicker.Archives of Gynecology and Obstetrics.2009(1)
[2]Concordant overexpression of p-FAK and p-ERK1/2 in extramammary Paget’s disease[J].Si-Yuan Chen,Yoichi Moroi,Kazunori Urabe,Satoshi Takeuchi,Makiko Kido,Sayaka Hayashida,Hiroshi Uchi,Takeshi Uenotsuchi,Ya-Ting Tu,Masutaka Furue.Archives of Dermatological Research.2008(4)
[3]Integrin-regulated FAK–Src signaling in normal and cancer cells[J].Satyajit K Mitra,David D Schlaepfer.Current Opinion in Cell Biology.2006(5)
[4]Overexpression of focal adhesion kinase,a protein tyrosine kinase,in ovarian carcinoma[J].Patricia L.Judson,XiapingHe,William G.Cance,LindaVan Le.Cancer.2000(8)
[5]宋林琳.FAK、JAK1-STAT3在宫颈病变中的表达及其与HPV感染的相关性探讨[D].河南科技大学,2015.