背景[1-3]
兔抗人IGG(FC)-HRP是以人类人IGG(FC)为抗原以兔为宿主制得的免疫抗体，可以特异性结合人IGG(FC)。主要用于检测人IGG(FC)的Western Blot、IHC-P、IF、ELISA、Co-IP等多种免疫学实验。
哺乳类动物抗体（又称免疫球蛋白，immunoglobulin，简称Ig）的种型之一。抵抗病原入侵的抗体相关免疫力，主要由该种型下的四种类型所提供，也是唯一一种可以穿过胎盘为胎儿提供被动免疫力的种型。
不同的Ig亚类通过细胞表面Fc受体的复杂家族与不同类型的细胞作用，这些Fc受体与Ig的亲和力、细胞分布、结构、生物学作用也各不相同。FcR一旦与IgFc段结合，就会传递特殊的细胞内信号，诱发各种细胞反应。这些反应取决于FcR类、细胞型、细胞的激活状态、协同刺激应答、参与的受体数目、受体的交联及影响抗体Fc段的其他外在因素。白细胞和实质细胞表达的抑制性受体（FcγRⅡ）和活化的（FcγRⅠ和FcγRⅢ）FcRs的相对平衡是抗体沉积造成的炎症反应的主要调节因素，也是疾病易感性的主要决定因素。
鼠和人的IgG受体、FCγRs都是Ig超家族的成员。它分为三型，包括高亲和力的FcγRⅠ(CD64)，可结合单体IgG；低亲和力的FcγRⅡ(CD32)和FcγRⅢ(CD16)，它们只与IgG复合物相互作用。多种基因、等位基因的变化及mR-NA的选择性拼接，致使产生多种不同的FcγR型，它们的跨膜区和胞浆区有明显差异，导致功能的异质性。这种异质性还体现为个体FClrR型与IgG亚类（尤其是人IgGl和IgG2）相结合的能力各不相同。FcγRs的表达随细胞活化的状态而变化，受细胞因子的调节。
应用[4][5]
用于干扰素α和人免疫球蛋白Fc片段融合蛋白的构建与表达研究
基因重组干扰素如IFN-α(IFN-α包括IFNα-2a,IFNα-2b,IFNα-1b等)及其修饰体(如多价干扰素)已经作为抗病毒和免疫调节类药物,被广泛用于临床,治疗多种病毒性疾病和抗肿瘤等。所谓天然的干扰素α(IFN-α)是指细胞经过诱导而表达产生的细胞因子,通过信号传导继而发挥抗病毒、抗细胞增殖和调节免疫应答作用,然而,作为一个小分子蛋白,IFN-α在血浆中清除的速度比较快,其半衰期仅为数十分钟,导致在临床治疗中需要重复多次用药才能达到治疗效果。
构建了编码人源IFNα-2b和免疫球蛋白Fc片段的基因重组融合蛋白。同时,对Fc片段中可诱导细胞杀伤活性(包括ADCC和CDC活性)的个别位点进行了改造,以降低免疫球蛋白Fc片段可能导致的副作用。构建的融合蛋白既能保持干扰素的活性并带有天然的N端,又具有抗体的优越性,其Fc片段的CH2,CH3区域可以用于ProteinA的亲和层析,为蛋白纯化提供了方便;而且保留的抗体铰链link部分使两个有效分子之间的功能互不影响。为了进一步延长融合蛋白在血浆中的半衰期,我们通过定点突变的方式对IgG的Fc片段进行改造,使Fc与FcRn结合能力更强。另外,本研究中还采用了新型的甲醇诱导型酵母表达系统,达到高效和低成本的效果。
参考文献
[1]Transforming Growth Factor-β1 and-β2 in Gastric Precancer and Cancer and Roles in Tumor-Cell Interactions with Peripheral Blood Mononuclear Cells In Vitro.Ma Gui-Fen,Miao Qing,Zeng Xiao-Qing,Luo Tian-Cheng,Ma Li-Li,Liu Yi-Mei,Lian Jing-Jing,Gao Hong,Chen Shi-Yao.PloS one.2013
[2]Role of p53 in systemic autoimmune diseases.Takatori H,Kawashima H,Suzuki K,et al.Critical Reviews in Immunology.2014
[3]Cancer:Mutant p53 rescued by aggregation inhibitor.Flemming,A.Nature Reviews Drug Discovery.2016
[4]Proliferating trichilemmal cyst:The value of ki67 immunostaining[J].Lucia Rangel-Gamboa,Magdalena Reyes-Castro,Judith Dominguez-Cherit,Elisa Vega-Memije.International Journal of Trichology.2013(3)
[5]李金晶.干扰素α和人免疫球蛋白Fc片段融合蛋白的构建与表达[D].中国科学技术大学,2011.