姜Zingiberis Rhizoma是姜科(Zingiberaceae)姜属Zingbier Boehm. 多年生草本植物姜Zingiber officinale Rosc. 的根茎,是常用的中药材,是药食两用植物。药用部分为新鲜根状茎,具有解表散寒、温中止呕、化痰止咳、解鱼蟹毒的功效。姜的化学成分可归为3类:精油、姜辣素和二苯基庚烷类。姜精油是指从根茎中用水蒸气蒸馏的方法提取出来的挥发性成分,几乎不包含高沸点成分,具有浓郁的芳香气味,外观显示为透明、浅黄到桔黄的液体,是一种复杂的混合物。姜的香气部分风味取决于其精油成分,香气成分主要有姜烯酚、姜醛、姜醇、姜酮、樟烯等十几种芳香物质,精油量是衡量生姜加工特性的重要指标。随着分析技术的发展,对姜精油的组成取得了一系列进展。为有效鉴定其成分,分析前多采用液相色谱(LC)法将姜精油分为碳氢化合物和含氧化合物,甚至将含氧化合物进一步分成若干组分。姜精油成分主要为萜类物质,如单萜类α-蒎烯、β-水芹烯,倍半萜类的α-姜烯、β-红没药烯等。这2类物质的含氧衍生物大多有较强的香气和生物活性。
姜酚的分析测定
姜酚类结构中都有C3-羰基和C5-羟基,使得姜酚的化学性质极不稳定,在酸性条件下,C-4的活泼氢极易与C-5的羟基一起脱水形成姜烯酚;在加热或碱性条件下,C-4和C-5间的碳碳键断裂形成姜酮和相应的醛(图 3)。姜酚在姜中的量较少,稳定性差,对于提取分离工作加大了难度。
王丽等利用HPLC测定母姜与子姜中6-姜酚、8-姜酚和10-姜酚的量,采用InertsilODS-SP色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm)分析,二元线性梯度洗脱,紫外检测器在280 nm波长下检测,结果显示母姜与子姜中6-姜酚量分别为3.061 4、1.775 2 mg/g,8-姜酚量分别为0.966 0 、0.782 1 mg/g,10-姜酚量分别为0.751 4、0.478 0 mg/g。陈燕等以辣椒碱作外标,用C18色谱柱,水-乙腈作流动相梯度洗脱,使用光电二极管阵列检测器(PDAD),采用程序加温方式,用HPLC测定了姜油树脂中以姜酚和姜烯酚为代表的姜辣素,此法无须纯品标样,但所测结果是姜酚总量。张雪红等采用HPLC法,使用6-姜酚对照品,用Bondpak C18色谱柱,以甲醇-水-冰乙酸(35∶64∶1)溶液为流动相,在体积流量1.0 mL/min下,用标准曲线法不经分离直接测定了姜中的6-姜酚。曲翔等以6-姜酚肟为内标测定姜及其制品中6-姜酚的量,色谱柱为Diamonsil C18柱,流动相为乙腈-水系统梯度洗脱,体积流量1 mL/min,检测波长280 nm,结果表明,6-姜酚在10.55~2 700 μg/mL,6-姜酚肟在10.43~2 670 μg/mL时峰面积与质量浓度呈良好线性关系,相关系数分别为0.998 3和0.999 8。6-姜酚的检测限为2.12 μg/mL,6-姜酚肟的检测限为2.09 μg/mL。6-姜酚对6-姜酚肟的相对校正因子为1.285,相对保留时间为1.782,RSD<2.4%,用内标法和外标法测定的结果无显著差异,测得生姜、干姜和姜酒中6-姜酚量分别为1.86、3.04、0.115 mg/g。王维皓等以自制6-姜酚为对照品,用Alltech C18色谱柱,以乙腈-甲醇-水(43∶5∶52)作流动相,在280 nm波长处,采用程序加温方式,用HPLC标准曲线法测得生姜中6-姜酚的量在1.35~2.87 mg/g。
采用HPLC可在常温下测定,能限度地减少误差,然而,姜酚色谱峰以及内标都需要姜酚对照品,是其限制性因素。另外,对姜酚的测定方法还有气相色谱与质谱(GC-MS)联用法、HPLC-MS联用法和HPLC与紫外光谱(HPLC-UV)联用法。
姜酚的药理作用
20世纪80年代至今,国内外学者对姜酚及其同系物的分子结构、药理作用进行了大量研究,证实了姜酚具有强心、保肝利胆、调血脂、抗血小板聚集、抗氧化、抗肿瘤、抗炎、止痛的药理作用。
1. 强心作用
生姜醇提取物对麻醉猫血管运动中枢有兴奋作用,对心脏也有兴奋作用,并且可扩张血管,促进血液循环,研究表明其有效成分是姜酚类物质。姜辣素中的6-姜酚、8-姜酚和10-姜酚可通过激活骨骼肌浆内质网某种相关酶,增加心肌细胞肌浆内质网摄取而加强心肌收缩力,姜酚的强心作用随侧链碳原子数的增加而降低。
8-姜酚(1×10-6~3×10-5 mol)对豚鼠的离体左心房有增加收缩能力的作用,对豚鼠右心房既有增加收缩能力的作用,又有变时性(chronotropic)作用。8-姜酚(3×10-6 mol)可以增加离体心房细胞的纵向收缩的程度和速率。虽然8-姜酚能增加心房收缩压,但1×10-6~3×10-5 mol的8-姜酚几乎不影响豚鼠左心房的功能。用钙电极测定胞间的钙离子浓度表明:8-姜酚(3×10-6~3×10-5 mol)加速心肌网的钙离子吸收。姜酚(1×10-6~3×10-5 mol)激活心肌网Ca2+-ATP酶活性。
2.保肝利胆
以Wistar 雄性大鼠为实验动物,通过胆管给予姜酚,0.5~1 h后,大鼠胆汁的分泌显著增加(作用类似于脱氢胆酸钠)。6-姜酚的利胆作用在给药4 h后仍很明显,10-姜酚的利胆作用弱于6-姜酚。
3.抗凝血
体外实验证实,姜酚可以抑制凝血酶原激酶诱导的血小板聚集。姜提取物可抑制血小板环氧合酶产生,抑制凝血酶原激酶产生、血小板聚集,且存在剂量-效应关系。干姜水提物能强烈抑制血小板聚集,并存在剂量依赖关系。Karen等认为姜酚是一类新型、有潜力、可望替代阿司匹林的血小板活性抑制剂,姜酚抑制花生四烯酸诱导的血小板聚集效果与阿司匹林类似(EC50=0.75 μmol/L)。
4.抗氧化
何丽娅等在家兔急性完全性脑缺血再灌注模型上观察生姜的脑复苏效应时,发现生姜提取液(0.7 g/kg)能抑制脑组织脂质过氧化产物丙二醛(MDA)的生成,提高脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性和Na+,K+-ATP酶活性,清除体内自由基所造成的神经细胞膜的脂质过氧化性损伤,减轻脑细胞膜的通透性;能有效保护缺血再灌注大脑的过氧化氢酶活性,同时改善缺血组织代谢和缺氧状况,减少乳酸生成,从而减轻组织代谢性酸中毒;一定程度上保护细胞膜的完整性。生姜提取液中的主要成分为姜酚,推测生姜提取液的上述抗氧化活性是由姜酚产生的。
5.抗肿瘤
Park等利用ICR小鼠皮肤肿瘤模型,证实6-姜酚具有抗肿瘤刺激因子活性的作用。局部使用6-姜酚可明显抑制7,12-双苯蒽引起的雌性ICR小鼠的表皮乳头状瘤生成。Park等研究了6-姜酚诱导HL-60细胞凋亡作用,发现30~50 mol/L姜酚可明显抑制HL-60细胞的DNA合成和活性,研究结果表明6-姜酚具有细胞毒活性和诱导细胞凋亡作用。
生姜乙醇提取物中的6-姜酚可明显抑制Dat lon’s淋巴腹水瘤细胞和人淋巴细胞生长,显著抑制中国大田鼠卵巢细胞和Vero细胞生长,并明显抑制DNA对胸腺嘧啶核苷酸的摄取。
6.其他
干姜醇提物及其所含姜酚和姜脑有显著灭螺和抗血吸虫作用,5 mg/L姜酚可完全消除曼氏血吸虫毛蚴对蜗牛以及尾蚴对小鼠的感染。Manjree等报道了6-姜酚可抑制昆虫生长,使昆虫厌食、体积收缩直至死亡。
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