背景[1-3]
人雪旺细胞提取于人脊神经组织，原代冻存。此细胞通过对S-100,GFAP和CD90免疫荧光染色验证，经测试不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
人雪旺细胞
雪旺细胞是神经嵴的衍生物，形成了周围神经髓磷脂轴突的髓鞘。它环绕在末梢神经轴突的轴上，沿着轴突节形成一层髓磷脂髓鞘。雪旺细胞对末梢神经的发育、功能和再生起着重要作用。当轴突快死亡时，雪旺细胞环绕其周围帮助消化轴突。连续的雪旺细胞形成一个空的管道，在其尾端形成新的轴突。
末梢神经中的雪旺细胞的数量是受到严格调控的。体外增殖受到诸如PDGF,FGF，神经元和其它多肽类生长因子的刺激。雪旺细胞为研究一系列发育问题提供了相对简单、明确、易懂的哺乳动物模型。在研究神经病和神经再生，以及中枢神经系统修复方面，雪旺细胞也具有特殊的临床重要性。
培养步骤：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，补加4-6mL完全培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入6cm皿中），培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2min，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的完全培养基终止消化。
3.轻轻吹打细胞，完全脱落后吸出，在1000RPM条件下离心8-10分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4.按5-6ml/瓶补加培养液，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。
应用[4][5]
用于人雪旺细胞促进人脐带间充质干细胞向神经方向分化的研究
观察人雪旺细胞（human Schwann cells,hSCs）对人脐带间充质干细胞（human umbilical cord-mesenchymal stem cells,hUC-MSCs）在脊髓损伤（spinal cord injury,SCI）大鼠体内存活、分化的影响
方法：无菌条件下取出健康、因外伤行截肢治疗患者的坐骨神经,应用双酶消化组织块结合机械分离法分离培养hSCs、采用低浓度胰蛋白酶消化和差速贴壁法对细胞进行纯化,传至第4代（P4）的hSCs用S-100抗体对其进行鉴定,本实验植入的hSCs为P5；实验所用的hUC-MSCs由天津协和干细胞基因工程有限公司提供,细胞经过流式细胞仪鉴定符合干细胞标准,植入的hUC-MSCs亦为P5。取8周龄雌性Wistar大鼠80只,以Impactor Model-Ⅱ型打击器制作脊髓胸10（T10）损伤模型
。实验随机均分为4组：DMEM对照组（A）,hSCs移植组（B）,hUC-MSCs移植组（C）,hUC-MSCs与hSCs联合移植组（D）。移植后2w,4w,各组实验动物随机取出2只经心脏灌注后取材固定（脊髓长度包括损伤中心头尾端长约1.5cm）,制成石蜡切片后行GFAP,MBP与NF-H免疫荧光染色,植入的细胞行MAB1281免疫荧光染色进行体内示踪。
各组分别于移植后1W,2w,3w,4w以同样方法取材,分别行Western-Blot,Real-Time PCR检测。上述数据用SPSS16.0软件方差分析进行统计分析。
参考文献
[1]Long-term Results of Spinal Cord Injury Therapy Using Mesenchymal Stem Cells Derived From Bone Marrow in Humans[J].Jin Hoon Park,Dae Yul Kim,Inn Young Sung,Gyong Hyo Choi,Min Ho Jeon,Kwang Kuk Kim,Sang Ryong Jeon.Neurosurgery.2012(5)
[2]Combination of activated Schwann cells with bone mesenchymal stem cells:the best cell strategy for repair after spinal cord injury in rats[J].De-Xiang Ban,Guang-Zhi Ning,Shi-Qing Feng,Ying Wang,Xian-Hu Zhou,Yang Liu,Jia-Tong Chen.Regen.Med..2011(6)
[3]Cograft of neural stem cells and schwann cells overexpressing TrkC and neurotrophin-3 respectively after rat spinal cord transection[J].Jun-Mei Wang,Yuan-Shan Zeng,Jin-Lang Wu,Yan Li,Yang D.Teng.Biomaterials.2011(30)
[4]NT-3-secreting human umbilical cord mesenchymal stromal cell transplantation for the treatment of acute spinal cord injury in rats[J].Ai-Jia Shang,Sun-Quan Hong,Qiang-Xu,Hang-Yan Wang,Ying Yang,Zhong-Feng Wang,Bai-Nan Xu,Xiao-Dan Jiang,Ru-Xiang Xu.Brain Research.2011
[5]陈有.人雪旺细胞促进人脐带间充质干细胞向神经方向分化的研究[D].天津医科大学,2012.