背景[1-3]
小鼠肥大细胞蛋白酶8(MCPT8)ELISA KIT用于测定人血清，血浆及相关液体样本中小鼠肥大细胞蛋白酶8(MCPT8)(MCPT8)的含量。
小鼠肥大细胞蛋白酶8(MCPT8)(MCPT8)ELISA试剂盒采用竞争ELISA法。用MCPT8抗原包被于酶标板上，实验时样品或标准品中的MCPT8与包被的MCPT8竞争生物素标记的抗MCPT8单抗上的结合位点，游离的成分被洗去。
小鼠肥大细胞蛋白酶8(MCPT8)
加入辣根过氧化物酶标记的亲和素，生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB)，TMB在辣根过氧化物酶的催化下现蓝色，加终止液后变为黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值，MCPT8浓度与OD450值之间呈反比，通过绘制标准曲线计算出样品中MCPT8的浓度。
检测流程：
1、用缓冲液将抗体稀释至1-10ug/ml。在反应孔中加0.1ml，4℃过夜。次日，弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗3次。
2、加样：加一定稀释的待检样品0.05ml于上述已包被之反应孔中，置37℃孵育1小时。然后洗涤(同时做空白孔，阴性对照孔及阳性对照孔)。
3、加酶标抗体：于各反应孔中，加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.05ml。37℃孵育0.5～1小时，洗涤。
4、加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃10～30分钟。
5、终止反应：于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml
6、结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果。
应用[4][5]
用于温阳消饮法对胸腔积液模型大鼠肾、空肠组织差异基因表达影响的实验研究
利用基因芯片技术分析温阳消饮法调控胸腔积液模型大鼠基因表达的作用机制。
方法：40只清洁级Wistar成年大鼠适应性饲养7天后,随机分为温阳消饮组（W）、去桂消饮组（Q）、模型对照组（M）、空白对照组（K）,每组10只。除空白对照组外,其余3组以1%λ-角叉菜胶胸腔注射建立胸腔积液（类似悬饮）大鼠模型,造模24h后拍X线片对各组大鼠进行病理评价。于造模后2h各组以相应药物灌胃,每天1次,连续5天。
灌胃结束后大鼠进行安乐死。每组取3只大鼠的肾髓质和空肠组织,采用基因芯片技术进行基因表达谱检测,筛选出差异表达基因,并进行Pathway分析。
结果：肾髓质组织基因表达谱检测温阳消饮组：温阳消饮组与模型对照组比较和模型对照组与空白对照组比较共同表达的通路为：神经活性配体受体相互作用通路、系统性红斑狼疮、肾素血管紧张素系统,共同表达基因为:LOC317471、Olr462、Mcpt8I3、Olr718、Mcpt8I2、Cd80、Ttn。
去桂消饮组：去桂消饮组与模型对照组比较和模型对照组与空白对照组比较共同表达的通路为：神经活性配体受体相互作用通路,共同表达的基因为Cep295nl、Mcpt8I3、Fam64a。
参考文献
[1]Control of CYP11B2/CYP11B1 Expression Ratio and Consequences for the Zonation of the Adrenal Cortex[J].T.Dringenberg,M.Schwitalla,M.Haase,W.Scherbaum,H.Willenberg.Horm Metab Res.2013(02)
[2]Acute and chronic regulation of aldosterone production[J].Namita G.Hattangady,Lawrence O.Olala,Wendy B.Bollag,William E.Rainey.Molecular and Cellular Endocrinology.2011(2)
[3]Transcriptomic analysis of EGb 761-regulated neuroactive receptor pathway in vivo[J].Shan-Yu Su,Ching-Liang Hsieh,Shih-Lu Wu,Wen-Yu Cheng,Chia-Cheng Li,Hsin-Yi Lo,Tin-Yun Ho,Chien-Yun Hsiang.Journal of Ethnopharmacology.2009(1)
[4]Angiotensin II and the development of insulin resistance:Implications for diabetes[J].J.Alberto Olivares-Reyes,Araceli Arellano-Plancarte,J.Ramon Castillo-Hernandez.Molecular and Cellular Endocrinology.2008(2)
[5]徐路.温阳消饮法对胸腔积液模型大鼠肾、空肠组织差异基因表达影响的实验研究[D].成都中医药大学,2016.