背景及概述[1][2]
香豆素具有较大的摩尔消光系数和量子产率，是很重要的绿色荧光染料，经过修饰后用于发光材料、化学传感器以及标记生物分子。近几年利用荧光增强效应检测活体细胞中半胱氨酸的研究得到不断发展。3-乙酰基羟基香豆素又称为3-乙酰香豆素；8-乙酰-6,7-二甲氧基香豆素，常温下为白色固体具有特殊香味，常用为医药和化学合成中间体，与此同时，3-乙酰基羟基香豆素作为香豆素衍生物中重要的代表，被广泛应用于荧光探针检测中，具有价格低廉，灵敏度高等优点。
3-乙酰基羟基香豆素
应用[3]
1.高选择性高灵敏识别汞离
制备方法：将300mg(1.47mmol)3-乙酰基羟基香豆素溶于15mL二氯甲烷中，再加入508mg(3mmol)硫代氯甲酸苯酯常温搅拌4h，然后利用旋蒸仪进行旋蒸过柱，得到粗产品。如果要得到较纯的产品，可以将其过柱然后在二氯甲烷和石油醚的混合体系(例如v/v，1:10)中进行重结晶得到纯品。得到白色纯净产品210mg，产率为42％。
伴随着探针溶液中Hg2+浓度的增加，荧光强度逐渐增强，且在(0-2μM)Hg2+浓度范围内，Hg2+的浓度与荧光强度成很好的线性关系。说明探针对汞离子有很好的响应，该探针能实现对汞离子的灵敏识别。我国饮用水标准中汞离子的标准限值为0.001mg/L因此，本探针能较精确地确定待测样本中汞离子的含量。
2.半胱氨酸荧光探针
由2，4-二羟基苯甲醛与乙酰乙酸乙酯反应得到3-乙酰基羟基香豆素，然后与丙烯酰氯反应得到2-(3-乙酰基)香豆素基丙烯酸酯。生成的2-(3-乙酰基)香豆素基丙烯酸酯可以与半胱氨酸发生迈克加成环化反应，释放出有荧光的3-乙酰基-7-羟基香豆素，从而实现检测。
将2，4-二羟基苯甲醛（1，20mmol），乙酰乙酸乙酯（24mmol）和1mL哌啶加入到30mL无水乙醇中，加热至回流，反应3小时后冷至室温，有绿色固体析出，抽滤，乙醇洗三次，粗产品用乙醇重结晶得到淡绿色固体2，熔点：237℃，产率91%。
红外测定(KBr，cm-1):3482(O-H)，3050(Ar-H)2928(=CH)，1678(C=O)，1620(C=C)，1211(C-O-C)。
在37℃条件下，将1μM的2-(3-乙酰基)香豆素基丙烯酸酯分别加入到不同浓度的牛血清溶液（0,0.01,0.05,0.2,0.5,1）中培养20分钟。荧光酶标仪检测荧光强度，结果显示2-(3-乙酰基)香豆素基丙烯酸酯可成功的应用于生物液体中，且血清浓度越大，荧光越强。
主要参考资料
[1] 邓正江, & 林红梅. (2005). 3-乙酰基-5-羟甲基-7-羟基香豆素治疗病毒性肝炎高胆红素血症37例. 蚌埠医学院学报, 30(6), 553-553..
[2] 蒋德炉, 朱广军, 邓汝温, & 吴集贵. (1995). 3—乙酰乙酰基—4—羟基香豆素希土配合物的合成和性质. 无机化学学报, 11(1), 15-18.
[3] 张珍英, 邓慧敏, & 邓芹英. (2008). 香豆素类新基质用于基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱对聚乙二醇的测定. 分析测试学报, 27(11), 1225-1228.