背景及概述[1][2]
独一味为唇形科独一味Lamiophlomis rotata(Benth.)Kudo 的干燥地上部分,其根及全草入药,是我国藏、蒙、纳西等民族民间常用药之一,具有消炎止痛、活血化淤之功效,可用于治疗多种外科手术后的刀口疼痛、出血和外伤骨折等。胡麻属苷是其中的活性成分,现代药理学研究表明,胡麻属苷具有明显降糖、抗氧作用。
结构
应用[2-3]
抗氧化作用:经动物试验结果表明,胡麻属苷能明显降低小鼠肝脏中的丙二醛(MDA),升高小鼠肝脏中的超氧化物歧 化酶(SOD)、过氧化物酶(CAT)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px),表明该胡麻属苷抗氧化制剂具有较好的抗氧化、消除自由基的保健功效,且无毒副作用。
降糖作用:胡麻属苷具有降糖作用,胡麻属苷给药干预后血糖显著下降,能够有效的增加胰岛素敏感性,改善糖尿病;能够有效改善糖尿病小鼠的糖耐量减退。能同时具有治疗肥胖和高血糖疾病的功效,大大 减轻了患者的治病成本,治疗效果好。
含量测定[1]
方法1:超高效液相串联质谱法快速测定大鼠体内胡麻属苷的浓度。
用乙腈沉淀蛋白方法处理血浆,色谱柱为ACQUITY UPLC BEH C18 柱(50 mm×2.1 mm,1.7 μm),流动相为乙腈-0.1% 甲酸水,梯度洗脱,流速为0.4 mL/min;用正离子多离子反应监测(MRM)扫描,内标为芦丁。结果显示血浆中胡麻属苷的线性范围为1~250 ng/mL(r=0.998 6),最低定量限为0.2 ng/mL;胡麻属苷的日内、日间RSD 均<10%。大鼠单次灌胃胡麻属苷后,胡麻属苷在大鼠体内的t1/2 为(1.35±0.26)h,CL 为(8.62±1.25)L/h/kg,AUC0-t 为(349.57±48.5)ng/h/mL;大鼠舌下静注胡麻属苷后,胡麻属苷在大鼠体内的t1/2 为(1.45±0.28)h,CL 为(2.38±0.57)L/h/kg,AUC0-t 为(128.79±30.52)ng/h/mL,得胡麻属苷的绝对生物利用度为26.6%。因此该方法经方法学验证,适于大鼠血浆中胡麻属苷浓度的测定及其药代动力学研究。
方法2:一种口服独一味后大鼠血浆中胡麻属苷含量的测定方法,包括以下步骤:
(1)血浆的处理:取0.1mL大鼠血浆置于1.5mL EP管中,加入0.3mL甲醇溶液(含0.1%甲酸(v/v)和200ng/mL替硝唑内标),涡旋混匀3min,再以13000rpm离心10min,取上清液0.2mL,于37℃氮气流吹干,再以0.4mL初始流动相(酸性乙腈和酸性水,8:92,v/v)复溶,取10μL作为血浆测试样品;
(2)精密吸取步骤(1)得到的血浆测试样品注入高效液相色谱-质谱联用仪,内标法定量,测得血浆中胡麻属苷的含量;其中,液相条件为:Agilent 1200HPLC液相色谱仪,反相色谱柱,柱温为35℃,流动相为:酸性乙腈和酸性水,流速为0.4mL/min,进样体积为10μL,梯度洗脱,检测时间为5min;后运行时间为5min;所述的酸性乙腈和酸性水中,加入的酸均为甲酸,浓度为0.1%(v/v);
所述的反相色谱柱为Agilent Zorbax SB-C18色谱柱,具体规格为2.1mm×100mm,填料为3.5μm。所述的梯度洗脱过程为:8-40%有机相酸性乙腈A(0-1min),40-95%有机相酸性乙腈A(1-4min),95%有机相酸性乙腈A(4-5min)。质谱条件为:Agilent 6410 QQQ质谱系统,离子化方式为电喷雾条件,采用负离子条件下MRM模式,内标为替硝唑,干燥气流速为10L/min,干燥气温度为350℃,雾化气压力为40psi,毛细管电压为4000V。所述的质谱检测为多反应监测模式,反应离子对分别为:胡麻属苷465.2→257.2,替硝唑246.0→125.9。
主要参考资料
[1] 超高效液相串联质谱法测定大鼠血浆中胡麻属苷浓度
[2] CN201710955340.3 一种抗氧化制剂
[3] CN201710955345.6 一种降糖药物或药物制剂
[4] CN201610363435.1 口服独一味后大鼠血浆中胡麻属苷含量的测定方法