背景[1-3]
小鼠肺癌细胞系是一种常用的实验细胞系，用于研究肺癌的生物学特性和治疗机制。这种细胞系由小鼠肺部来源的肺癌细胞建立而来，具有维持肺癌细胞生长和分化的能力。
小鼠肺癌细胞系在肺癌研究中具有广泛的应用价值。通过利用这种细胞系，研究人员可以深入研究肺癌的生物学特性，了解肺癌的发生、发展、转移和耐药机制，以及探索肺癌治疗的新药和新方法。例如，研究人员可以使用小鼠肺癌细胞系建立动物模型，模拟人类肺癌的发生和发展过程，从而更好地理解肺癌的发病机制和治疗方法。
此外，小鼠肺癌细胞系还可以用于评估和筛选对肺癌具有治疗作用的药物或化合物，以及测试和开发新的肺癌治疗方法。这种细胞系具有生长稳定、易于培养和操作简便等特点，为相关研究提供了可靠的实验模型。
小鼠肺癌细胞系
小鼠肺癌细胞系培养操作
1)复苏小鼠肺癌细胞系：以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主。
将含有1 mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min，弃去上清液，加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10 cm皿中，加入约8 mL培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2)小鼠肺癌细胞系传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
a、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，使消化液浸润所有细胞，弃去消化液，将培养瓶置于37℃培养箱中消化1 min，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
c、按6-8 mL/瓶补加培养基，轻轻打匀后装入无菌离心管中，1000 rpm离心4 min，弃去上清液，补加1-2 mL培养液后吹匀。
d、将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中，置于培养箱中培养。
3)小鼠肺癌细胞系冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例；
a、收集细胞及细胞培养液，装入无菌离心管中，1000 rpm条件下离心4 min，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，进行细胞计数。
b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度5×106~1×107/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存1mL细胞悬液，注意冻存管做好标识。
c、将冻存管放入-80℃冰箱，24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
应用[4-5]
小鼠肺癌细胞系可以用于固本抑瘤Ⅱ号对人A549肺癌细胞、小鼠小鼠肺癌细胞系肺癌作用的实验研究
为探讨该方药抑瘤的有效成分及作用机制,本实验选用人肺腺癌细胞株A549,通过全方及拆方研究,观察该方及方中不同组分中药对A549细胞生长的影响,寻找固本抑瘤Ⅱ号方中抑瘤及化疗增效作用的主要成分。选用小鼠肺癌细胞系模型,观察该方及与化疗药物CTX合用对移植瘤、转移瘤的作用,以及固本抑瘤Ⅱ号方对小鼠免疫功能、荷瘤生存时间及细胞凋亡的影响,探讨该方的作用机制,指导临床合理用药。
1. 固本抑瘤II号及其拆方对A549抑瘤作用及与化疗联合用药的实验研究固本抑瘤II号全方和根据功效拆分的益气组、行气活血组、培补肝肾组、散结消癥组药物,分别制备水提物。采用MTT法检测各组药物对A549细胞生长的影响及与DDP联合作用的效果,FCM检测细胞周期和凋亡。
结果显示:单独应用全方和行气活血组水提物对A549细胞生长表现为抑制作用,IC50分别为33.21mg生药/ml和9.55mg生药/ml;与DDP合用表现为增效作用,增效倍数分别为1.23和1.77,合并指数为1.05和0.83,表现出协同和相加作用;全方和行气活血组水提物能够使A549细胞生长阻滞在G0/G1期,百分比为84.16%和86.21%,减少进入S期的细胞数量。
2.固本抑瘤II号方对小鼠肺癌细胞系肺癌抑制作用及与化疗药联合应用的实验研究60只体重19±1g雄性C57BL/6小鼠随机分对照组(Control)、CTX化疗组(CTX)(30mg/Kg CTX腹腔注射)、固本抑瘤II号小剂量组(M)(35g/Kg·d灌胃)、大剂量组(H)(70g/Kg·d灌胃)、小剂量加CTX组(M+CTX)、大剂量加CTX组(H+CTX),每组10只。观察固本抑瘤II号对小鼠肺癌细胞系肺癌移植瘤与转移瘤的作用,及与CTX合用的效果。
结果显示:固本抑瘤II号M组、H组的抑瘤率(IR)分别为23.35%、36.82%,瘤重分别为2.82±1.56g、2.32±1.06g,与对照组3.68±1.10g相比明显缩小,分别p<0.05;M+CTX、H+CTX组抑瘤率分别为71.49%、67.13%,与CTX组的63.35%抑瘤率相比未表现出明显差异;但联合用药效应为0.85<q<1.15,表现为相加作用。M+CTX、H+CTX组肺转移阳性率分别为80%、。
参考文献
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[3]Tumor irradiation followed by intratumoral cytokine gene therapy for murine renal adenocarcinoma.Hillman,Gilda G;Slos,Philippe;Wang,Yu et al.Cancer Gene Therapy.2004
[4]Cytokine-based treatment of radiation injury:potential benefits after low-level radiation exposure.MacVittie,-T-J;Farese-A-M.Mil-Med.2002
[5]张甘霖.固本抑瘤Ⅱ号对人A549肺癌细胞、小鼠Lewis肺癌作用的实验研究[D].北京中医药大学,2006.