背景[1-3]
SF126（人脑瘤细胞）是一种来源于星形胶质细胞瘤的细胞系，具有成纤维细胞样的形态，并且可以贴壁生长。这些细胞表达胶质纤维酸性蛋白(GFAP)阴性，并且可以特异地结合β-内啡肽。SF126细胞系通常用于生物医学研究，特别是在神经生物学、肿瘤生物学和药物筛选等领域。
在细胞培养方面，SF126（人脑瘤细胞）需要特定的培养基和条件来维持其生长和活性。一般来说，这些细胞可以在含有MEM培养基（含有非必需氨基酸）、胎牛血清（FBS）和抗生素的培养基中生长。此外，细胞培养的环境也需要保持适当的温度、湿度和二氧化碳浓度。
SF126（人脑瘤细胞）具有一些独特的生物学特性，使其成为研究脑瘤和其他神经系统疾病的理想模型。例如，这些细胞可以模拟人脑瘤细胞的生长和分化过程，从而帮助科学家们更好地理解脑瘤的发病机制。此外，SF126细胞还可以用于药物筛选实验，以评估不同药物对脑瘤细胞的疗效。
然而，需要注意的是，SF126（人脑瘤细胞）是一种肿瘤细胞系，因此在实验过程中需要遵守相关的生物安全规定和操作规程。同时，对于实验结果的分析和解读，也需要结合具体的研究背景和目的进行综合考虑。
SF126（人脑瘤细胞）
SF126（人脑瘤细胞）培养操作
1)复苏SF126（人脑瘤细胞）：以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主。
将含有1 mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min，弃去上清液，加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10 cm皿中，加入约8 mL培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2)SF126（人脑瘤细胞）传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
a、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，使消化液浸润所有细胞，弃去消化液，将培养瓶置于37℃培养箱中消化1 min，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
c、按6-8 mL/瓶补加培养基，轻轻打匀后装入无菌离心管中，1000 rpm离心4 min，弃去上清液，补加1-2 mL培养液后吹匀。
d、将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中，置于培养箱中培养。
3)SF126（人脑瘤细胞）冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例；
a、收集细胞及细胞培养液，装入无菌离心管中，1000 rpm条件下离心4 min，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，进行细胞计数。
b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度5×106~1×107/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存1mL细胞悬液，注意冻存管做好标识。
c、将冻存管放入-80℃冰箱，24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
应用[4-5]
SF126（人脑瘤细胞）可以用于脑胶质瘤的表观遗传学研究——1.LRRC4在脑胶质瘤中失活的表观修饰的分子机制2.脑胶质瘤DNA甲基化谱的初步构建
[LRRC4基因启动子在胶质瘤中呈高甲基化状态]生物信息学分析LRRC4基因的启动子序列,发现该序列不含有TATA盒和CAAT盒,GC含量高达70%左右,为一典型的CpG岛,该结果提示LRRC4基因启动子甲基化可能参与其转录调控。
采用甲基化特异性PCR(MS-PCR)对2株胶质瘤细胞、30例胶质瘤组织和3例正常脑组织进行检测,结果显示在胶质瘤细胞SF767和SF126（人脑瘤细胞）中LRRC4基因的启动子呈完全的甲基化状态,在30例胶质瘤病人组织中均呈不同程度的部分甲基化状态,而在3例正常人脑组织中则呈完全非甲基化状态。为了明确LRRC4基因的启动子序列中究竟哪些位点发生了甲基化,选取胶质瘤细胞SF767和SF126（人脑瘤细胞）,两例胶质瘤组织及一例正常脑组织进行了亚硫酸氢钠测序,结果表明与正常的脑组织相比,在胶质瘤细胞和组织中LRRC4基因的启动子区存在高密度的甲基化位点。该结果提示LRRC4基因启动子甲基化可能为肿瘤特异性的,它有可能成为区别胶质瘤组织与正常脑组织的一个重要的分子标志物。
[5-Aza-CdR能逆转LRRC4基因在胶质瘤细胞中的表达]为了弄清楚LRRC4基因启动子甲基化和其在胶质瘤中失活之间的功能上联系,采用不同浓度甲基化酶抑制剂5-Aza-CdR处理SF126（人脑瘤细胞）和SF767,观察了LRRC4基因启动子甲基化改变与其表达的关系,结果表明5-Aza-CdR能逆转LRRC4基因启动子甲基化状态,并且能够上调LRRC4基因的表达水平。
该结果从反面证明了启动子甲基化对LRRC4基因表达的抑制作用,另一方面也证明了LRRC4基因启动子甲基化是其在胶质瘤中表达缺失的重要分子机制。在5-Aza-CdR处理胶质瘤细胞逆转LRRC4基因表达的同时,我们还观察了5-Aza-CdR对SF126（人脑瘤细胞）和SF767细胞增殖及细胞周期的影响,发现5-Aza-CdR对SF126（人脑瘤细胞）和SF767细胞增殖具有明显的抑制作用,它能使胶质瘤细胞G0/G1期细胞数量明显增加,S期和G2/M期的细胞数量明显减少,从而出现G0/G1期的细胞阻滞。总之,5-Aza-CdR抑制了SF126（人脑瘤细胞）和SF767生长,并且逆转了LRRC4基因在胶质瘤中甲基化状态,恢复其转录活性,从而能够发挥LRRC4基因的肿瘤抑制作用,这为LRRC4基因作为胶质瘤去甲基化治疗的潜在靶标提供了科学依据。
参考文献
[1]Decreased glutamic acid decarboxylase 67 mRNA expression in multiple brain areas of patients with schizophrenia and mood disorders[J].Mia Thompson;;Cynthia Shannon Weickert;;Eugene Wyatt;;Maree J.Webster.Journal of Psychiatric Research,2009(11)
[2]Purkinje cell loss in autism may involve epigenetic changes in the gene encoding GAD[J].Jacob Peedicayil;;Premkumar Thangavelu.Medical Hypotheses,2008(6)
[3]Copy number alterations of the polycomb gene BMI1 in gliomas[J]..Acta Neuropathologica,2008(1)
[4]Methyl-DNA immunoprecipitation(MeDIP):Hunting down the DNA methylome[J].Filipe V.Jacinto;;Esteban Ballestar;;Manel Esteller.BioTechniques,2008(1)
[5]张祖萍.脑胶质瘤的表观遗传学研究[D].中南大学,2010.