人晶状体上皮细胞的相关研究

2020/2/12 8:19:56

背景及概述[1-2]

上皮细胞覆盖于身体表面并衬贴于体内空腔器官腔面的细胞。其排列有明显极性,一面朝向身体表面或腔面,称游离面;一面向着深部的结缔组织,称基底面。上皮细胞具有强大的角生和更新能力。上皮组织具有保护、吸收、分泌和排泄等作用。当上皮细胞受损时,则影响机体的防御功能。人晶状体上皮细胞分离自晶状体组织;人晶状体上皮细胞分布于晶状体的前面,为一单层立方上皮细胞,铺于晶状体囊的内面。此层上皮细胞体非常清晰,核位于中间,折光性很强。人晶状体上皮细胞主要负责调节晶状体的生理平衡,包括电解质和液体的输送。在正常的发育过程中,人晶状体上皮细胞分化和成熟,然后迁移到晶状体内部,产生晶体蛋白,自身也拉长而变成晶状体纤维细胞,并最终失去细胞核和其它的细胞器。研究表明,人晶状体上皮细胞的分化和极化受到了眼部液体中的生长因子的调控,包括表皮生长因子和胰岛素等。细胞贴壁后为扁平不规则多角形,呈单层生长、连成膜状。人晶状体上皮细胞是紧密贴附于晶状体前囊内表面的单层上皮细胞,其异常增殖和分化与白内障和后囊混浊的发生密切相关,体外培养是研究其生长规律的主要手段。

相关研究[3-6]

有实验研究碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在体外对人晶状体上皮细胞增殖的影响及机制。取人晶状体前囊膜培养,加入不同浓度bFGF(1μg·L-1、10μg·L-1、100μg·L-1),48h后免疫组化测增殖核细胞抗原阳性面积率。取人晶状体前囊膜免疫组化测bFGF受体。结果 一定浓度(1~100ug·L-1)的bFGF在体外有促人晶状体上皮细胞增殖的作用,且呈剂量相关性。人晶状体上皮细胞bFGF受体表达阳性。

此外,还有实验研究表皮生长因子对人晶状体上皮细胞迁移的影响。方法:DMEM+100g/LFBS将人晶状体上皮细胞培养在T-25培养瓶内,划痕法检测EGF的促细胞迁移作用,蛋白质免疫印迹(Westernblot)方法检测β-catenin蛋白表达。结果:人晶状体上皮细胞在20μg/LEGF作用下,其迁移距离随着作用时间的延长而增加,在48h达到高峰;人晶状体上皮细胞在不同浓度EGF作用48h后,其迁移距离随着EGF浓度的增加而增加,在20μg/L时达到高峰;人晶状体上皮细胞在10μg/LEGF作用下,β-catenin蛋白表达水平随着作用时间的延长而升高,在2h达到高峰;人晶状体上皮细胞在不同浓度EGF作用2h,β-catenin蛋白表达水平随着EGF浓度的增加而升高,在10μg/LEGF作用下达到值。结论:EGF对人晶状体上皮细胞具有促进其迁移的作用,β-catenin在晶状体上皮细胞中的表达趋势说明其在晶状体上皮细胞迁移过程中起重要的作用。

另外,还有实验研究紫外线照射体外培养人晶状体上皮细胞(HLEC)对凋亡的诱导、凋亡调控基因(Bax,Bd-2)表达的变化,探讨紫外线诱导HLEC凋亡的机制。方法:以实验室培养的HLEC细胞株为研究模型,采用同一紫外线光源对HLEC进行照射。按紫外线照射时间将HLEC分为0,5,10,15及30min组。采用AnnexinV+PI双染流式细胞计数对HLEC凋亡进行检测,用原位杂交的方法检测各组Bax,Bcl-2mRNA的表达。结果:随紫外线照射时间的延长HLEC凋亡率增加,Bcl-2阳性细胞率逐渐降低;而Bax阳性细胞率逐渐增加。HLEC凋亡率与Bd-2和Bax的比率呈负相关忙-0.874,P〈0.05)。结论:紫外线照射可诱导HLEC凋亡,Bax和Bd-2可能参与了紫外线诱导的HLEC凋亡的基因调控过程。

还有研究探讨了晶状体上皮细胞凋亡与年龄相关性白内障发生的关系。方法:用透射电镜观察2例年龄相关性白内障患者和1例正常人晶状体上皮细胞的超微结构。用脱氧核苷酸末端转移酶缺口标记原位细胞检测法(theterminaldeoxynucleotidyltransferasa(TdT)medinteddUTPnickendlabeling,TUNEL)检测晶状体上皮的凋亡细胞。采用链霉菌亲生物素蛋白过氧化物酶标免疫组织化学法(streptavidinperoxidase,SP)染色,镜下检测46例年龄相关性白内障患者和13例健康成年人、7例胚胎的晶状体上皮细胞的bax基因与bcl2基因的表达情况。结果:在年龄相关性白内障患者的晶状体上皮细胞的超微结构中可见凋亡之细胞,健康成年人晶状体上皮细胞正常。年龄相关性白内障患者的晶状体上皮细胞凋亡百分率为21.20%,健康成年人的晶状体上皮细胞凋亡百分率为0.25%。年龄相关性白内障患者晶状体上皮细胞的bax基因表达为100%,bcl2基因表达为0%,健康成年组和胚胎晶状体上皮细胞的bax基因表达为0%,bcl2基因表达为100%。结论:晶状体上皮细胞的凋亡在年龄相关性白内障的发生中起重要作用。

主要参考资料

[1] 儿科学辞典

[2] 运动解剖学、运动医学大辞典

[3] bFGF对人晶状体上皮细胞增殖的影响

[4] EGF体外对人晶状体上皮细胞迁移的影响

[5] 紫外线对人晶状体上皮细胞凋亡的诱导及Bcl-2,Bax基因的影响

[6] 人晶状体上皮细胞凋亡及bcl-2、bax表达与年龄相关性白内障形成的关系

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