背景[1-3]
MKK3抗体也被称为丝裂原活化蛋白激酶MKK3抗体,是一种针对MKK3蛋白的特异性抗体。MKK3蛋白是一种双特异性蛋白激酶,属于MAP激酶激酶家族,它在细胞信号转导过程中起着重要作用。MKK3抗体是一种重要的科研工具,在生物学和医学研究中具有广泛的应用前景。
MKK3抗体
MKK3抗体在科研和医学领域有广泛的应用。以下是一些主要的应用领域:
1.实验研究:MKK3抗体可以用于各种实验研究中,如Western Blotting(蛋白质印迹)、Immunoprecipitation(免疫沉淀)、Immunofluorescence(免疫荧光)和ELISA(酶联免疫吸附测定)等,以检测MKK3蛋白的表达、定位和与其他分子的相互作用。
2.疾病研究:MKK3在多种生物学过程中都扮演着重要角色,如细胞增殖、分化、凋亡和应激反应等。因此,MKK3抗体可以用于研究各种疾病中MKK3的功能和调控机制,如肿瘤、心血管疾病、神经退行性疾病等。
3.药物研发:MKK3抗体还可以用于药物研发过程中,帮助研究人员筛选和鉴定针对MKK3的潜在药物靶点,从而开发出新的治疗方法。
此外,MKK3抗体还具有一些特定的特性。例如,它可以识别MKK3蛋白的磷酸化形式(如MKK3(phospho Ser189)),这对于研究MKK3的激活状态和信号转导途径具有重要意义。同时,MKK3抗体也可以用于多物种研究,如人类、小鼠、大鼠等。
应用[4][5]
MKK3抗体可以用于TNF-α相关基因单核苷酸多态性与类风湿关节炎的相关性及分子机制研究
研究分析了类风湿关节炎(Rheumatoid Arthritis,RA)患者和正常人群TNF-α、TNFR1、TNFR2、BAFF、BAFF-R、HLA等基因单核苷酸多态性,并寻找基因多态性与RA的相关临床指标和评分,如:RF、CRP、ESR、PLT、抗CCP抗体、HAQ、DAS28、VAS评分等的相关性;同时探讨TNF-α在RA患者血清中的表达水平及其参与RA发病的具体机制。
方法2014年7月-2017年3月从安徽医科大学第一附属医院在知情同意的情况下,募集汉族初诊RA患者140例,同期在该院体检中心募集汉族健康体检者149例。从RA患者及健康体检者外周血中提取DNA,采用PCR-连接酶检测反应(ligase detection reaction,LDR)法检测TNF-α、TNFR1、TNFR2、BAFF、BAFF-R和HLA基因的7个SNP位点基因型,并应用SHEsis在线软件进行分析。同时收集患者RF、CRP、ESR、PLT、抗CCP抗体、HAQ、DAS28、VAS评分等实验室和临床指标,分析SNPs与它们的相关性。采集40例RA患者和40例健康对照外周血,分离血清,用ELISA法检测TNF-α的含量。分离PBMCs后用流式细胞术直接检测RA患者和正常人群CD19+B细胞、CD19+CD27+B细胞、CD19+CD20+CD27+B细胞的百分比;进一步将洗涤后PBMCs加入TNFR2单克隆抗体、FITC标记的山羊抗小鼠二抗、抗人CD19-APC抗体进行标记染色测定CD19+TNFR2+B细胞百分比;体外TNF-α刺激PBMCs实验中,用终浓度为100ng/ml的TNF-α刺激正常人PBMCs培养48小时,流式细胞仪检测TNF-α刺激前后PBMCs的B细胞亚群百分比。免疫磁珠分选获得B细胞,运用MKK3抗体Western blot检测RA患者和正常人群的MKK3-P38MAPK/NF-κB信号通路相关蛋白MKK3、Phospho-p38MAPK和Phospho-NF-κB p65的表达水平;同时检测经TNF-α刺激前后正常人B细胞MKK3、Phospho-p38MAPK和Phospho-NF-κB p65的表达水平。所有数据采用SPSS13.0软件进行数据录入和统计学分析。实验结果用均数±标准差(mean±SD)表示,组间差异采用单因素方差分析或非参数检验方法(Mann-Whitney U法);SNP基因型应用SHEsis在线软件(http://analysis.bio-x.cn/my Analysis.php)进行分析,对照人群需符合Hardy-Weinberg平衡定律,P<0.05表示差异有统计学意义。部分数据分组比较运用Bonferroni检验校正检验水准。
MKK3抗体结果:Western blot检测显示:RA患者B细胞中MKK3、Phospho-p38MAPK和Phospho-NF-κB p65的表达水平明显高于健康人群;正常人B细胞经TNF-α刺激后,MKK3、Phospho-p38MAPK和Phospho-NF-κB p65的表达水平也显著上调。
参考文献
[1]Body mass index and clinical response to intravenous or subcutaneous abatacept in patients with rheumatoid arthritis[J].Maria-Antonietta D’Agostino;;Rieke Alten;;Eduardo Mysler;;Manuela Le Bars;;June Ye;;Bindu Murthy;;Julia Heitzmann;;Radu Vadanici;;Gianfranco Ferraccioli.Clinical Rheumatology,2017(12)
[2]Pathogenetic insights from the treatment of rheumatoid arthritis[J].Iain B McInnes;;Georg Schett.The Lancet,2017(1008)
[3]EULAR recommendations for the management of rheumatoid arthritis with synthetic and biological disease-modifying antirheumatic drugs:2016 update[J].Josef S Smolen;;Robert Landewe?;;Johannes Bijlsma;;Gerd Burmester;;Katerina Chatzidionysiou;;Maxime Dougados;;Jackie Nam;;Sofia Ramiro;;Marieke Voshaar;;Ronald van Vollenhoven;;Daniel Aletaha;;Martin Aringer;;Maarten Boers;;Chris D Buckley;;Frank Buttgereit;;Vivian Bykerk;;Mario Cardiel;;Bernard Combe;;Maurizio Cutolo;;Yvonne van Eijk-Hustings;;Paul Emery;;Axel Finckh;;Cem Gabay;;Juan Gomez-Reino;;Laure Gossec;;Jacques-Eric Gottenberg;;Johanna M W Hazes;;Tom Huizinga;;Meghna Jani;;Dmitry Karateev;;Marios Ko.Annals of the Rheumatic Diseases,2017(6)
[4]Brief Report:Association of Rheumatoid Factor and Anti–Citrullinated Protein Antibody Positivity With Better Effectiveness of Abatacept:Results From the Pan‐European Registry Analysis[J].J.E.Gottenberg;;D.S.Courvoisier;;M.V.Hernandez;;F.Iannone;;E.Lie;;H.Canh?o;;K.Pavelka;;M.L.Hetland;;C.Turesson;;X.Mariette;;A.Finckh.Arthritis&Rheumatology,2016(6)
[5]肖会.TNF-α相关基因单核苷酸多态性与类风湿关节炎的相关性及分子机制研究[D].安徽医科大学,2018.