背景[1-3]
DYRK2抗体是一种针对双特异性酪氨酸磷酸化调节激酶2（DYRK2）的特异性免疫学工具，广泛应用于细胞生物学和疾病研究中。作为一种多克隆抗体，DYRK2抗体通过其高度特异性的结合能力，在免疫印迹（WB）、细胞染色（ICC/IF）以及酶联免疫吸附测定（ELISA）等多种实验技术中，帮助科学家们检测和分析DYRK2蛋白的表达水平及其在细胞内的分布。
DYRK2抗体通常来源于免疫接种后的兔子，其同种型为IgG，展现出对DYRK2蛋白的高度特异性，通常不会与其他DYRK家族成员发生交叉反应。这种抗体的最佳稀释倍数和浓度取决于具体的实验应用，但一般而言，在WB实验中常用1-2μg/mL的稀释比例，而在ICC/IF实验中则可能需要更高的浓度，如10μg/mL。
DYRK2抗体
为了保持DYRK2抗体的稳定性和活性，建议将其保存在-20°C或更低的温度下，避免反复冻融。在短期存储时，可以将其置于+4°C的环境中。
DYRK2作为蛋白激酶家族的一员，在细胞生长和发育过程中发挥着重要作用。近年来的研究表明，DYRK2在多种肿瘤组织中的表达水平异常，如在胆管癌、食管癌、头颈鳞状细胞癌等肿瘤中表达水平高于正常组织，而在结肠腺癌、直肠腺癌等肿瘤中表达水平则低于正常组织。这一发现使得DYRK2成为潜在的泛癌治疗新靶点，其甲基化状态在某些癌症中甚至表现出双重作用。
应用[4][5]
DYRK2抗体可以用于DYRK2在胶质瘤细胞迁移中的作用
1. 从组织水平研究双特异性酪氨酸磷酸化调节激酶2(Dual Specificity Tyrosine Phosphorylation Regulated Kinase 2,DYRK2)在胶质瘤患者中的表达情况,同时分析胶质瘤组织中DYRK2的表达与临床病理特征的相关性,探讨DYRK2对胶质瘤发生和发展的影响。2.从细胞水平验证DYRK2对胶质瘤细胞迁移中的影响,并探讨DYRK2参与胶质瘤细胞迁移调控的机制。
方法1.在组织水平,使用DYRK2抗体免疫印迹(Western blot,WB)方法检测DYRK2在正常脑组织及胶质瘤组织中的蛋白表达情况。使用免疫组化方法检测在84例胶质瘤病例的石蜡切片中DYRK2与E-钙粘蛋白(E-cadherin)的表达情况,并结合胶质瘤临床病理资料分析DYRK2与胶质瘤患者的年龄、性别、肿瘤的位置、手术方式和WHO分级等因素之间的关系,使用Kaplan–Meier生存曲线分析DYRK2的表达高低对胶质瘤患者预后产生的影响。
2. 在细胞水平,用DYRK2抗体WB检测DYRK2在多个胶质瘤细胞株中的蛋白表达情况,分别筛选出表达较低和表达较高的胶质瘤细胞系。在DYRK2表达相对较低的U87细胞中,过表达DYRK2后用WB分别检测E-cadherin、Vimentin和Snail的表达变化;在DYRK2表达相对较高的H4细胞中,干扰DYRK2后用WB分别检测E-cadherin、Vimentin和Snail的表达变化。3.采用划痕试验、transwell实验检测U87细胞中对照组与过表达组、H4细胞中对照组与干扰组的胶质瘤细胞迁移能力,并用WB检测相关信号通路的蛋白的表达,进一步研究DYRK2影响胶质瘤细胞迁移能力的可能机制。
结果1.DYRK2抗体Western blot结果表明,DYRK2在胶质瘤组织中的表达明显低于正常脑组织,并且随着胶质瘤级别的增加,其表达水平逐渐下降。
2.DYRK2抗体免疫组化分析结果显示,DYRK2的在胶质瘤组织中的表达随着级别的增加逐渐减少,且其表达趋势与E-cadherin相一致。相关统计学分析显示,DYRK2的表达只与胶质瘤组织的WHO分级存在统计相关性(P<0.05),而与胶质瘤患者的年龄、性别、肿瘤部位、切除范围、肿瘤大小、有无坏死均没有相关性。
3.DYRK2抗体WB结果显示,在胶质瘤细胞中,E-cadherin的表达趋势与DYRK2一致,Vimentin以及Snail的表达趋势则与DYRK2相反。
参考文献
[1]The microRNA-200 family:still much to discover[J].Daniel Senfter;;Sibylle Madlener;;Georg Krupitza;;Robert M.Mader.Biomolecular Concepts,2016(5-6)
[2]Gastrokine-2 suppresses epithelial mesenchymal transition through PI3K/AKT/GSK3βsignaling in gastric cancer.[J].Dai Jin;;Qian Chenchen;;Su Mingli;;Chen Minhu;;Chen Jie.Tumour biology:the journal of the International Society for Oncodevelopmental Biology and Medicine,2016
[3]Downregulated DYRK2 expression is associated with Poor Prognosis and Oxaliplatin Resistance in Hepatocellular Carcinoma[J].Xiubing Zhang;;Pan Xu;;Wenkai Ni;;Hui Fan;;Jian Xu;;Yongmei Chen;;Wei Huang;;Shumin Lu;;Li Liang;;Jinxia Liu;;Buyou Chen;;Weidong Shi.Pathology-Research and Practice,2016
[4]Immune Checkpoint Modulators:An Emerging Antiglioma Armamentarium[J].Eileen S.Kim;;Jennifer E.Kim;;Mira A.Patel;;Antonella Mangraviti;;Jacob Ruzevick;;Michael Lim;;Daniel Olive.Journal of Immunology Research,2016
[5]沈忆芬.DYRK2在胶质瘤细胞迁移中的作用[D].南通大学,2018.