背景[1-3]
C-RAF抗体是一种特异性识别和结合C-RAF蛋白的抗体。C-RAF是一种丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路中的激酶，参与调控细胞生长、分化和凋亡等过程。
C-RAF抗体是针对磷酸化原癌基因c-Raf（也称为RAF1、v-raf-1 murine leukemia viral oncogene homolog 1等）的特异性抗体。它能够识别并结合c-Raf蛋白，特别是磷酸化在Ser339位点的c-Raf蛋白。
C-RAF抗体
C-RAF抗体来源与特性：
抗体来源可能包括兔子等动物，具体取决于抗体的制备方法和用途。
抗体类型可能是多克隆抗体或单克隆抗体，具有高度的特异性和亲和力。
抗体可以用于多种实验技术，如Western Blot（WB）、ELISA、免疫组织化学（IHC）和免疫荧光（IF）等。
C-RAF抗体产品应用与稀释：
在Western Blot中，推荐的稀释比例通常为1:100-500。
在ELISA中，推荐的稀释比例通常为1:500-1000。
在免疫组织化学和免疫荧光中，推荐的稀释比例也通常为1:100-500。
实际稀释浓度可根据具体实验条件和用途进行调整。
C-RAF抗体在生物医学研究中具有广泛的应用，如：
免疫组化：通过免疫组化技术，可以检测组织或细胞中C-RAF的表达和分布，从而了解其在生理和病理过程中的作用。
免疫印迹：C-RAF抗体可用于免疫印迹实验，检测C-RAF在蛋白质水平上的表达。
细胞培养：C-RAF抗体可用于细胞培养实验，如流式细胞术、ELISA等，以研究C-RAF对细胞功能的影响。
药物筛选：C-RAF抗体可用于药物筛选实验，评估药物对C-RAF活性的影响，从而为治疗相关疾病提供依据。
临床诊断：C-RAF抗体在肿瘤诊断中具有潜在应用价值，如乳腺癌、结直肠癌等。通过检测C-RAF的表达水平，可以帮助医生判断病情和制定治疗方案。
C-RAF抗体在生物医学研究中具有重要的应用价值，有助于深入了解C-RAF在生理和病理过程中的作用，以及开发针对C-RAF的药物。
应用[4][5]
C-RAF抗体可以用于c-raf在精原干细胞中的表达及作用的研究
完善大鼠精原干细胞的分离和体外培养技术;研究c-raf对精原干细胞体外培养的存活作用及机制。
方法:非连续密度梯度离心及差速贴壁法分离精原干细胞;c-kit细胞C-RAF抗体免疫组织化学鉴定精原干细胞;基因测序和SeqMan、检验精原干细胞扩增DNA和c-raf的同源性;MTT比色法检测体外培养精原干细胞的存活及增殖情况,观察c-raf AON对精原干细胞体外培养存活的量效关系及c-raf AON对精原干细胞体外培养存活的时效关系;RT-PCR检测c-raf mRNA和caspase-3 mRNA的表达情况;TUNEL检测c-raf AON对精原干细胞凋亡的影响。
C-RAF抗体结果:非连续密度梯度离心及差速贴壁法分离的精原干细胞,经台盼蓝染色计数其存活率分别为92.3%和91.5%;分离后的精原干细胞经c-kit鉴定其纯度为90.1%;精原干细胞在含10%NBS的DMEM中培养120h时增殖达高峰,在无10%NBS的DMEM中培养其存活率持续下降;精原干细胞扩增DNA和c-raf的同源性为98%;15μmol/L c-raf AON作用12h后精原干细胞存活率下降(P<0.05),于18h后存活率持续下降(P<0.05);与对照组相比c-raf AON组的c-raf mRNA水平明显下调(P<0.05),而caspase-3 mRNA表达水平明显上调(P<0.05);c-raf AON组凋亡指数(40.5%)明显大于对照组(30.2%)和错义组(29.4%)的凋亡指数(P<0.05)。结论:非连续密度梯度离心结合差速贴壁法是分离精原干细胞的有效方法;c-kit可作为鉴定精原干细胞的分子标志物;精原干细胞在含10%NBS的DMEM培养基中短期增殖;c-raf在九天的雄性SD大鼠的精原干细胞上表达;c-raf可能通过抑制凋亡而促进精原干细胞存活;c-raf可能通过下调capspase-3的表达而抑制精原干细胞凋亡。
参考文献
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[3]Oocyte Generation in Adult Mammalian Ovaries by Putative Germ Cells in Bone Marrow and Peripheral Blood[J].Joshua Johnson;;Jessamyn Bagley;;Malgorzata Skaznik-Wikiel;;Ho-Joon Lee;;Gregor B.Adams;;Yuichi Niikura;;Katherine S.Tschudy;;Jacqueline Canning Tilly;;Maria L.Cortes;;Randolf Forkert;;Thomas Spitzer;;John Iacomini;;David T.Scadden;;Jonathan L.Tilly.Cell,2005(2)
[4]Differentiation of embryonic stem cells after transplantation into peritoneal cavity of irradiated mice and expression of specific germ cell genes in pluripotent cells[J].O.Gordeeva;;R.Zinovieva;;Y.Smirnova;;O.Payushina;;T.Nikonova;;N.Khrushchov.Transplantation Proceedings,2005(1)
[5]闫登科.c-raf在精原干细胞中的表达及作用的研究[D].南昌大学,2008.