介绍
2,4,5,6‑四氨基嘧啶硫酸盐(以下简称四氨基嘧啶硫酸盐)是合成甲氨蝶呤的中间体，同时也是抗肿瘤药物氨喋噙的中间体。
图一 2,4,5,6-四氨基嘧啶硫酸盐
检测方法
2,4,5,6-四氨基嘧啶硫酸盐的分析方法报道较少，其中，现有技术报道了采用液质方法检测染发剂中四氨基嘧啶硫酸盐的方法，但该方法需要连接质谱检测器，并非常见的连接紫外检测器的普通高效液相色谱法。
孙圆丽[1]等人通过采用连接紫外检测器的普通高效液相色谱法，提供了一种2,4,5,6‑四氨基嘧啶硫酸盐的检测方法，该方法简单，可操作性强。分为以下几个步骤
1）溶液配制：称取本品约10mg，置20ml量瓶中，加缓冲盐溶解并稀释至刻度，作为样品溶液。
2）移取样品溶液10ul，注入液相色谱仪，记录色谱图，色谱图见图1，供试品主成分保留时间为5.330min，纯度为99.46％，主成分与杂质、杂质与杂质的最小分离度为4.2，专属性良好。
3）线性贮备液：称取本品约50mg，置50ml量瓶中，加缓冲盐溶解并稀释至刻度。
线性1溶液：量取线性贮备液7.5ml，置10ml量瓶中，加缓冲盐溶解并稀释至刻度。
线性2溶液：量取线性贮备液5ml，置10ml量瓶中，加缓冲盐溶解并稀释至刻度。
线性3溶液：量取线性贮备液2.5ml，置10ml量瓶中，加缓冲盐溶解并稀释至刻度。
线性4溶液：量取线性贮备液1ml，置200ml量瓶中，加缓冲盐溶解并稀释至刻度。
线性5溶液：量取线性4溶液1ml，置20ml量瓶中，加缓冲盐溶解并稀释至刻度。
4）分别移取上述各线性溶液10ul，注入液相色谱仪，记录色谱图，以浓度为横坐标，以峰面积为纵坐标，进行线性回归，具体见图2，拟合出线性方程为y＝40908708 .2581x‑12223.7936，相关系数r2为0.9997，线性关系良好。
5）称取本品约10mg，置20ml量瓶中，加缓冲盐溶解并稀释至刻度，平行配制6份。分别移取上述溶液各10ul，注入液相色谱仪，记录色谱图，重复性结果见下表：
图二 2,4,5,6-四氨基嘧啶硫酸盐检测的重复性
图三 2,4,5,6-四氨基嘧啶硫酸盐检测的色谱图
参考文献
[1]孙圆丽,李爱琴,苏小楠,等. 一种2,4,5,6-四氨基嘧啶硫酸盐的检测方法[P]. 北京市：CN202110602298.3,2021-10-15.