背景[1-3]
IGFBP3抗体是指针对胰岛素样生长因子结合蛋白3（Insulin-like Growth Factor Binding Protein 3）的抗体。IGFBP3是一种在体内主要由肝脏产生的蛋白质，它与胰岛素样生长因子（IGFs）结合，参与调节生长、发育和代谢等多种生理过程。
IGFBP3是一种大分子蛋白，由多种细胞合成和分泌，是血液中IGF1的主要载体。IGFBP3与IGF1以结合物的形式存在，能够减少游离IGF1的浓度，增强和发挥IGF1受体的活性，延长IGF1的半衰期，提高血清中的水平。此外，IGFBP3还参与调节胰岛素代谢和血糖平衡，与生长发育、肿瘤发生、代谢性疾病、心血管疾病等多种生理和病理过程密切相关。
IGFBP3抗体
IGFBP3（胰岛素样生长因子结合蛋白3）抗体的使用步骤会根据实验类型（如Western Blot、免疫组织化学、ELISA等）而有所不同。以下是一些常见实验类型的IGFBP3抗体使用步骤的概述：
Western Blot步骤：
1.样品准备：
提取目标蛋白。
通过SDS-PAGE电泳分离蛋白质。
将蛋白质转移到合适的膜上，如PVDF或硝酸纤维素膜。
2.封闭：
用含有5%脱脂奶粉或BSA的TBST缓冲液封闭膜，以减少非特异性结合。
3.抗体孵育：
用TBST缓冲液稀释IGFBP3抗体（例如1:1000稀释比例）。
将膜与稀释后的抗体在室温下孵育1-2小时，或在4°C下过夜。
4.洗涤：
使用TBST缓冲液洗涤膜，每次5-10分钟，重复3-5次。
5.检测：
使用相应的二抗（如辣根过氧化物酶或碱性磷酸酶标记的抗兔或抗山羊IgG）进行孵育。
再次洗涤膜。
使用化学发光或显色底物进行信号检测。
应用[4][5]
IGFBP3抗体可以用于外周血中IGF-1和IGFBP-3与湿性年龄相关性黄斑变性的相关性研究
探讨IGF-1和IGFBP-3在wAMD患者治疗过程中的变化意义和治疗效果分析。
方法选取2021年10月至2022年10月在江苏省南通大学附属医院眼科确诊的40例wAMD患者作为研究对象,对照组为同期纳入的40例年龄相关性白内障(agerelated cataract,ARC)患者。记录所有入组患者的一般临床资料,包括:年龄、性别、体重指数(body mass index,BMI)、饮酒史、吸烟史、糖尿病和高血压病史等。wAMD患者治疗方案为玻璃体腔雷珠单抗注射,每月一次,连续三个月,于术前行光学相干断层扫描(optical coherence tomography,OCT)检查、眼压(intraocular pressure,IOP)检查和最佳矫正视力(best corrected visual acuity,BCVA)检查,每次术后四周复查OCT、IOP和BCVA。根据IGFBP3抗体双抗体夹心酶联免疫吸附法(enzymelinked immunosorbent assay,ELISA),分别在wAMD组三次注射术前和ARC组行白内障手术前,抽取肘静脉血4ml以检测血清中IGF-1和IGFBP-3的浓度。运用SPSS26.0软件和Graph Pad Prism9.0软件进行统计分析。两组间比较使用两独立样本t检验和卡方检验。多次测量结果比较使用重复测量方差分析和非参数Friedman检验,其中重复测量方差分析若不满足球形度,则使用Greenhouse-Geisser方法进行校正。事后检验两两比较使用LSD法。两个计量资料之间的相关性使用Pearson相关分析。
IGFBP3抗体结果1.首先排除wAMD组和ARC组年龄、性别等影响。wAMD组在第一次玻璃体腔注射雷珠单抗前,血清IGF-1平均浓度(192.58±40.24ng/ml)显著高于ARC组(157.41±43.60ng/ml),血清IGFBP-3平均浓度(3680.82±587.99ng/ml)显著高于ARC组(2979.10±489.07ng/ml),差异均具有统计学意义(P<0.001)。2.wAMD组在三次注射前血清IGF-1平均浓度分别为192.58±40.24ng/ml、179.07±44.91ng/ml、170.02±45.23ng/ml,差异具有统计学意义(P<0.001),并且第一次注射前浓度>第二次注射前浓度>第三次注射前浓度。wAMD组在三次注射前血清IGFBP-3平均浓度分别为3680.82±587.99ng/ml、3456.61±757.64ng/ml、3209.63±840.97ng/ml,差异具有统计学意义(P<0.001),并且第一次注射前浓度>第二次注射前浓度>第三次注射前浓度。
参考文献
[1]Pemafibrate prevents choroidal neovascularization in a mouse model of neovascular age-related macular degeneration.[J].Lee Deokho;Nakai Ayaka;Miwa Yukihiro;Negishi Kazuno;Tomita Yohei;Kurihara Toshihide.PeerJ,2023
[2]Insulin-like Growth Factor Binding Protein 3 Increases Mouse Preimplantation Embryo Cleavage Rate by Activation of IGF1R and EGFR Independent of IGF1 Signalling[J].Green Charmaine J.;Span Miriam;Rayhanna Monique H.;Perera Marisa;Day Margot L..Cells,2022
[3]Recent Advances in Age-Related Macular Degeneration Therapies[J].Fabre Marie;Mateo Lou;Lamaa Diana;Baillif Stéphanie;Pagès Gilles;Demange Luc;Ronco Cyril;Benhida Rachid.Molecules,2022
[4]Mesenchymal stem cell-derived extracellular vesicles protect retina in a mouse model of retinitis pigmentosa by anti-inflammation through miR-146a-Nr4a3 axis[J].Zhang Jia;Li Pengdong;Zhao Guifang;He Siqi;Xu Di;Jiang Weijie;Peng Qian;Li Zhaohui;Xie Zhongjian;Zhang Han;Xu Ying;Qi Ling.Stem Cell Research&Therapy,2022
[5]刘焱焱.外周血中IGF-1和IGFBP-3与湿性年龄相关性黄斑变性的相关性研究[D].大连医科大学,2023.