小鼠卵巢上皮细胞试剂盒的应用

2020/10/18 17:56:53

背景[1-6]

小鼠卵巢上皮细胞试剂盒适用于小鼠卵巢上皮细胞的体外培养。试剂盒包含:(1)小鼠卵巢上皮细胞组织解离液(2)小鼠卵巢上皮细胞组织处理缓冲液(3)小鼠卵巢上皮细胞成纤维抑制剂(4)小鼠卵巢上皮组织洗液(5)小鼠卵巢上皮细胞生长因子及血清(6)小鼠卵巢上皮细胞基础培养基(7)小鼠卵巢上皮组织预备液。

卵巢左右各一,灰红色,质较韧硬,呈扁平的椭圆形,表面凸隆,幼女者表面平滑,性成熟后,由于卵泡的膨大和排卵后结瘢,致使其表面往往凹凸不平。卵巢的大小和形状,也因年龄不同而异。在同一人,左右卵巢并不一致,一般左侧大于右侧。成人卵巢长度左侧平均为2.93cm,右侧平均为2.88cm;宽度左侧平均为1.48cm;右侧平均为1.38cm;厚度左侧平均为0.82cm,右侧平均为0.83cm,卵巢重为3—4g。35—45岁卵巢开始逐渐缩小,到绝经期以后,卵巢可逐渐缩小到原体积的1/2。通常成人卵巢的大小,相当于本人拇指指头大小。由于卵巢屡次排卵,卵泡破裂萎缩,由结缔组织代替,故其实质渐次变硬。

卵巢分为内、外侧两面,上、下两端,前、后两缘。卵巢内侧面朝向盆腔,多与回肠紧邻,又名肠面,外侧面与盆腔侧壁相接触。卵巢上端钝圆,名输卵管端,与输卵管伞端相接,下端略尖,朝向子宫,称为子宫端。

小鼠卵巢上皮细胞主要功能:①上皮细胞能分泌激素,刺激卵细胞分化成熟;②细胞能分泌炎症介质,参与炎症反应。卵巢是雌性动物的生殖器官。卵巢的功能是产生卵以及类固醇激素。卵巢的位置与睾丸相同,仅左侧发育(右侧已退化),呈葡萄状,均为处于不同发育时期的卵泡,卵泡呈黄色,卵巢表面密布血管。卵巢的大小与年龄和产卵期有关。

应用[7][8]

小鼠卵巢上皮细胞试剂盒可用于小鼠卵巢表面上皮细胞在自发恶性转化过程中间质性及干细胞样特征改变研究:

MOSEC自发性恶性转化模型的建立:分离未生育过的雌性BALB/C小鼠的卵巢表面上皮细胞,以上皮细胞标志物Pan-keratin鉴定MOSEC的纯度。在MOSEC体外连续传代培养过程中,使用生长曲线、平板克隆形成及软琼脂克隆形成等实验检测细胞增殖能力,结合恶性转化灶出现的细胞形态和染色体数目的变化,分析MOSEC的体外恶性转化能力,通过裸鼠体内成瘤实验证实MOSEC发生自发恶性转化。

MOSEC自发恶性转化过程中EMT的作用:使用RT2Profiler PCR Array Mouse EMT试剂盒检测EMT相关基因在不同阶段MOSEC表达水平的变化,以E-cadherin和Pan-keratin为上皮细胞标志物,Vimentin、Snail、Slug及β-catenin为间质细胞标志物,采用免疫荧光方法定性定位,以及Western Blotting定量分析MOSEC恶性转化不同时期EMT相关蛋白表达水平的变化。

MOSEC自发恶性转化过程中肿瘤干细胞样特性的变化:以CD44、CD117、CD133、Nanog及Oct-4为干细胞/肿瘤干细胞标志物,采用免疫荧光方法定性定位分析恶性转化不同时期上述标志物的变化,流式细胞仪定量检测CD44+/CD117+细胞在恶性转化不同时期的变化;通过悬浮球细胞形成实验及限制稀释实验检测各阶段MOSEC的自我更新能力;使用无mEGF和mbFGF生长因子,但是含10%FBS的DMEM/F12培养基培养悬浮球细胞,观察其分化能力;最后观察悬浮球细胞在裸鼠体内的致瘤能力。

参考文献

[1]Biomechanical profile of cancer stem-like/tumor-initiating cells derived from a progressive ovarian cancer model[J].Hesam Babahosseini,Alperen N.Ketene,Eva M.Schmelz,Paul C.Roberts,Masoud Agah.Nanomedicine:Nanotechnology,Biology,and Medicine.2013

[2]Targeting CD133 in an in vivo ovarian cancer model reduces ovarian cancer progression[J].Amy P.N.Skubitz,Elizabeth P.Taras,Kristin L.M.Boylan,Nate N.Waldron,Seunguk Oh,Angela Panoskaltsis-Mortari,Daniel A.Vallera.Gynecologic Oncology.2013

[3]Cells,Stem Cells,and Cancer Stem Cells[J].Cristóbal Aguilar-Gallardo,Carlos Simón.Semin Reprod Med.2013(01)

[4]CD44+/CD24?ovarian cancer cells demonstrate cancer stem cell properties and correlate to survival[J].Erhong Meng,Beverely Long,Paula Sullivan,Steve McClellan,Michael A.Finan,Eddie Reed,Lalita Shevde,Rodney P.Rocconi.Clinical&Experimental Metastasis.2012(8)

[5]Cancer stem cells and epithelial–mesenchymal transition:Concepts and molecular links[J].Christina Scheel,Robert A.Weinberg.Seminars in Cancer Biology.2012(5-6)

[6]Ovarian cancer stem cells:Working towards the root of stemness[J].Rosemary Foster,Ronald J.Buckanovich,Bo R.Rueda.Cancer Letters.2012

[7]Isolation and characterization of stem-like cells from a human ovarian cancer cell line[J].Lijuan Wang,Roman Mezencev,Nathan J.Bowen,Lilya V.Matyunina,John F.McDonald.Molecular and Cellular Biochemistry.2012(1-2)

[8]张鹤美.小鼠卵巢表面上皮细胞在自发恶性转化过程中间质性及干细胞样特征改变[D].苏州大学,2014.

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