猪肾细胞系
猪肾细胞系 性质
细胞贴壁略偏强,消化时易出现消化时间偏长现象,注意一定要消化到细胞可以轻轻吹下,再加终止液终止消化。
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次;
加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化;
按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀;
收到细胞后首次传代推荐将细胞悬液按1:2的比例分到新的含6ml培养基的新皿中或者瓶中,建议冻存一支备用,后续传代根据实际情况按1:2到1:4的比例进行。