JeKo-1
JeKo-1 性质
JeKo-1细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
a)、对于JeKo-1细胞,传代可参考以下方法:
1.弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗JeKo-1细胞1-2次。
2.加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2min,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的完全培养基终止消化。
3.轻轻吹打JeKo-1细胞,完全脱落后吸出,在1000RPM条件下离心8-10分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 按5-6ml/瓶补加培养液,将JeKo-1细胞悬液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。
1、JeKo-1细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时,弃25cm2培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次;
2、添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待JeKo-1细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化,轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1000rpm离心5min;
3、用适量的冻存液重悬JeKo-1细胞,并放置于冻存管中;
4、先将JeKo-1细胞冻存管放置于-20℃1.5h,然后将其移入-80℃。