QA-Bio-唾液酸醛缩酶(N-乙酰神经氨酸丙酮酸裂解酶,EC 4.1.3.3)催化唾液酸(N-乙酰神经氨酸)与N-乙酰甘露糖胺和丙酮酸的可逆反应。
这种酶存在于几种细菌菌株中,这些细菌利用逆反应来降解N-乙酰神经氨酸(唾液酸)。正反应特别适用于通过定量转化为N-乙酰甘露糖胺和丙酮酸来确定唾液酸浓度。
由于唾液酸既带负电荷又是非还原糖,它的直接分析比传统糖类更为困难。然而,N-乙酰甘露糖胺可以通过各种技术如荧光染料或放射性标记作为传统还原糖进行检测。
或者,反应中产生的丙酮酸可以使用酶如乳酸脱氢酶,结合NADH氧化,来还原丙酮酸。NADH氧化可以通过分光光度法定量。另一种方法使用丙酮酸氧化酶产生过氧化氢,通过比色法测量。
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艾美捷QA-Bio-唾液酸醛缩酶(E-ALD01):
来源: 重组大肠杆菌K1克隆
EC: 4.1.3.3
内容:60微升的酶制剂(6单位)在20 mM Tris-HCl,pH 7.5中
比活性 :15单位/毫克
活性: 100单位/毫升
分子量: ~32,000道尔顿
除了游离的神经氨酸外,N-乙酰神经氨酸醛缩酶还可以用来确定以下物质中神经氨酸的总量:
糖蛋白
细胞表面
多唾液酸
荚膜多糖(仅由多唾液酸组成)
首先用QA-Bio唾液酸酶Au(E-S001)消化整个细胞、糖蛋白或多糖,然后确定总的N-乙酰神经氨酸。
QA-Bio-唾液酸醛缩酶文献参考:
Kolisis, F.N. An immobilized bienzyme system for assay of sialic acid. Biotechnol Appl Biochem 8:).
Simpson, H., G. D. Ghusney, M. A. Crook and J. C. Pickup. Serum sialic acid enzymatic assay based on microtitre plates: application for measuring capillary serum sialic acid concentrations. Br J Biomed Sci 50:164-167 (1993).
Sugahara K, K. Sugimoto, O. Nomura and T. Usui. Enzymatic assay of serum sialic acid. Clin Chim Acta 108:).
Lilley, G.G., M. von Itzstein and N. Ivancic. High-Level Production and Purification of Escherichia coli N-Acetylneuraminic Acid Aldolase (EC 4.1.3.3) Protein Expression and Purification 3:434-440 (1992).
Ohta,Y., K. Watanabe and A. Kimura. Complete Sequence of E. coli N-acetylneuraminate lyase. Nucleic Acids Res.13:8843-8852(1985).
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