引言
转铁蛋白（Transferrin）是血浆中负责铁离子运输的糖蛋白，其受体（TfR）在肿瘤细胞表面高度表达。通过FITC标记转铁蛋白（FITC-Transferrin），可构建靶向探针，用于研究受体介导的内吞机制及癌症靶向治疗。
1. 标记方法与活性验证
FITC通过转铁蛋白的赖氨酸氨基（ε-NH₂）与其共价结合，反应在pH 8.5的碳酸盐缓冲液中进行。圆二色谱（CD）和表面等离子体共振（SPR）证实，标记后蛋白二级结构未改变，且保留对TfR的亲和力（Kd < 10 nM）。
2. 研究应用
- 靶向递送系统：将FITC-转铁蛋白修饰于纳米粒表面，通过荧光成像观察其在肿瘤微环境中的主动靶向效率，结合化疗药物实现协同治疗。
- 内吞动力学研究：利用全内反射荧光显微镜（TIRFM）实时追踪FITC-转铁蛋白在细胞膜的簇集、内陷及囊泡转运过程。
- 血脑屏障穿透：通过活体成像技术评估标记蛋白经鼻腔给药后的脑部分布，为神经退行性疾病治疗提供新策略。
3. 创新点与局限
创新在于将天然靶向蛋白与荧光标记结合，局限在于转铁蛋白的等电点较高（pI≈6.8），标记反应需精确控制pH以避免蛋白聚集。
结论
FITC-转铁蛋白为肿瘤靶向治疗提供了“锁钥”模型，未来可开发多模态探针（如结合MRI造影剂）实现诊疗一体化。
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