HEK293S Cells(赠送Str鉴定报告)|人胚肾细胞

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细胞背景资料：详见相关文献介绍

细胞形态：上皮细胞样

解冻细胞常见实验问题分析及推荐解决方法：在解冻冻存细胞时，发现会出现存活率低、大量细胞碎片及生长缓慢等问题，究竟是什么原因导致，我们该怎么进行解决？以下是国内外细胞培养专家针对解冻细胞实验问题，总结的一些解决方案！出现低存活率的可能原因及推荐解决方案如下：１)解冻过程中细胞裂解，推荐的解决方案：可预期到一定量的细胞死亡，因此细胞的浓度应足够GAO，考虑到这一损失。起始浓度为１*１０(６)至１*１０(７)细胞/毫升；２)解冻过程中的问题，推荐的解决方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷冻的培养物，保存时间为１-５天，但这不是保存的方法。在３７℃充分解冻后应立即开始培养；３)对冷冻液过敏，推荐的解决方案：A.完全或部分更换培养基，减少培养基中冷冻液的量。在２４小时后更换培养液体可全部去除冷冻液。B.留出更多时间供培养物恢复。有时细胞需要几周时间才能形成单层或密集的悬浮物，取决于冷冻时细胞的年龄或传代次数或在生长阶段中的位置。冷冻的Zui佳条件在对数期；４)被冷冻的原种细胞的年龄或冷冻时培养物的年龄，推荐的解决方案：解冻Zui近冷冻的细胞。细胞处于冷冻状态的时间越长，存活率越低。检查冷冻细胞的时间和方法。在冷冻时细胞应处于对数期。

细胞生长：贴壁

HCC-1806细胞类似产品：：D324 Med细胞、RBL 2H3细胞、HCS2/8细胞

WIL2 S细胞类似产品：：OSKM-1细胞、SW-1222细胞、HCC-2218细胞

SKNAS细胞类似产品：：SNK-6细胞、Super Tube细胞、NIH:OVCAR4细胞

Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1细胞类似产品：：A375SM细胞、RL-95-2细胞、IB-RS-2细胞

BMSC/hBMSCs细胞类似产品：：NCI-SNU-398细胞、H-820细胞、251MG细胞

HEK293S Cells(赠送Str鉴定报告)|人胚肾细胞

细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

悬浮细胞不容易转染：悬浮细胞是指细胞生长不依赖支持物表面，在培养液中呈悬浮状态生长，如淋巴细胞。在实验室经常会遇到悬浮细胞的转染，其和贴壁细胞转染还是有很大不同的。目前大多数实验室用的是脂质体类的转染试剂，脂质体转染是基于电荷吸引原理，先形成脂质体-DNA复合物，散布在细胞周围，然后通过细胞的内吞作用，将目的基因导入细胞内，而脂质体复合物与贴壁细胞的接触机会比悬浮细胞GAO出很多倍，所以，脂质体转染时悬浮细胞的转染效率要明显低于贴壁细胞。其次，脂质体试剂的毒性较大，这就使得悬浮细胞的转染更为困难了。另外，悬浮细胞不易培养，易死亡，也给细胞转染造成了一定的困难。为了提GAO悬浮细胞的转染效率，可以使用非脂质体的转染试剂，如纳米材料的。也可以使用电转染方法，针对悬浮细胞等难转染细胞还是挺不错的，电击对细胞有一定的损伤，ZuiHAO选用具有细胞膜修复功能的电转染试剂，可以将电击对细胞的伤害降到Zui低，悬浮细胞不易转染，选对试剂及良HAO的细胞培养环境才是关键。

细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。

NBL-S细胞类似产品：：CZ-1细胞、H-1395细胞、U-373MG ATCC细胞

MiaPaCa-2细胞类似产品：：TW-039细胞、FET细胞、Potorous tridactylus Kidney 1细胞

253J-BV细胞类似产品：：VK2/E6E7细胞、RPE-1细胞、Michigan Cancer Foundation-7细胞

Hep G2/C3A细胞类似产品：：HeLa-229细胞、GM05887细胞、SK-MEL28细胞

H-1975细胞类似产品：：SK-MEL-28细胞、U-343-MG细胞、PT67细胞

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

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细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分

H510A细胞类似产品：：DHL-5细胞、PLB 985细胞、COLO-741细胞

PLA801D细胞类似产品：：P388-D1细胞、LU-65M细胞、LTEP-a-2细胞

OV1063细胞类似产品：：KYSE-30细胞、Colon38细胞、KMS-18细胞

SY5Y细胞类似产品：：DBTRG-05MG细胞、BHT-101细胞、TE11细胞

Dakiki细胞类似产品：：LS411N细胞、DU 145细胞、U031细胞

Caki2细胞类似产品：：BE2C细胞、OKT 3细胞、CAL-78细胞

细胞培养实验中常见问题总结：１)一般客户拿到细胞后，应该注意什么？客户收到细胞后先不开盖，放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞后观察培养基的颜色和是否有漏液情况，显微镜下拍细胞１００X，２００X各一张)，排除细胞本身污染的情况；收到细胞未开封，出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。收到细胞时如无异常情况，请在显微镜下观察细胞密度，如为贴壁细胞，未超过８０%汇合度时，将培养瓶中培养液吸出，留下１０ml培养液继续培养；超过８０%汇合度时，请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞，吸出培养液、１０００转/分钟离心２分钟，吸出上清，管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。细胞消化液建议使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快递细胞多久能到，是寄冻存的细胞还是复苏HAO的细胞？我们采用快递发货，一般外地２--３天，寄细胞前请确认当地温度，如果气温低于４度的，则采用邮寄冻存细胞；３)可否使用与原先培养条件不同之培养基？不能。每一细胞株均有其定使用且已适应之细胞培养基，若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基，细胞大都无法立即适应，造成细胞无法存活；４)可否使用与原先培养条件不同之血清种类？不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源，所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清，在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同，血清使用错误常会造成细胞无法存活。

细胞冻存复苏材料与方法步骤：常用的细胞冷冻贮存器为液氮贮存器，规格有３５L和５０L两种。使用时要注意以下几点：(１)一般两周需充液氮一次，至少一个月充氮一次。液氮温度达-１９６℃，使用时注意勿让液氮溅到皮肤上，以免引起冻伤。(２)液氮容器为双层结构，中间为真空层，瓶口有双层焊接处，应防止焊接部裂开。(３)在装入液氮时，要注意缓慢小心，并用厚纸卷筒或制漏斗作引导，使液氮直达瓶底，如有专用液氮灌注装置则更HAO。若为初次使用，加液氮时更要缓慢，以免温度骤降而使容器损坏。细胞冻存时常备的材料有：０.２５%胰蛋白酶，含１０%～２０%的血清培养液，DMSO(分析纯)或无色新鲜甘油(１２１°C蒸气GAO压消毒)，２mL安瓿(或专用细胞冻存管)、吸管、离心管、喷灯、纱布袋(或冻存管架)等。主要操作步骤为：(１)选择处于对数生长期的细胞，在冻存前一天ZuiHAO换液。将多个培养瓶中的细胞培养 液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶，加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞，使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(１０００r/min，１０分钟)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培养基，于４℃预冷１５分钟后，逐滴加入已无菌的DMSO或甘油，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，细胞浓度为３×１０６～１×１０７/mL之间。(３)将上述细胞分装于安瓿或专用冷冻塑料管中，安瓿装１～１.５mL在火焰喷灯上封口，封口处要完全封闭，圆滑无勾。冷冻管要将盖子盖紧，并标记HAO细胞名称和冻存日期，同时作HAO登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)。(４)将装HAO细胞的安瓿或冻存管装入沙布袋内;置于液氮容器颈口处存放过夜，次日转入液氮中。采用控制降温速度的方法也可采用下列步骤：先将安瓿置入４℃冰箱中２～３小时，再移至冰箱冷冻室内３～４小时，再吊入液氮容器颈气态部分存放２小时，Zui后沉入液氮中。细胞冻存在液氮中可以长期保存，但为妥善起见，冻存半年后，ZuiHAO取出一只安瓿细胞复苏培养，观察生长情况，然后再继续冻存。

L-Wnt3A细胞类似产品：：Hk-2细胞、Hs1.Tes细胞、MUGCHOR1细胞

HS578细胞类似产品：：CAMA-1细胞、SCCVII/St细胞、MT-3 [Human leukocytes]细胞

Raji细胞类似产品：：VAESBJ细胞、Hs737T细胞、HGC-27细胞

KYSE410细胞类似产品：：PTK-1细胞、HOS (TE85, Clone F5)细胞、WPE-int细胞

CHO/dhFr-细胞类似产品：：MDBK细胞、NOK细胞、HT 115细胞

HMVEC细胞类似产品：：NCI H226细胞、MCF12A细胞、H4细胞

LA-N-1细胞类似产品：：HOP-62细胞、B16F10细胞、CHG-5细胞

RCC-4细胞类似产品：：A549细胞、KPL1细胞、COLO 320 HSR细胞

KYSE270细胞类似产品：：2780CP细胞、P3JHR1细胞、BALB/3T3细胞

TE-3A细胞类似产品：：COLO 741细胞、GM06141B细胞、SuperTube细胞

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GTL 16细胞类似产品：：FO [Mouse myeloma]细胞、UPCISCC154细胞、MDAMB436细胞

TC-1 [Mouse lung]细胞类似产品：：Hs 274细胞、HuH-28细胞、NCIH2023细胞

GH3细胞类似产品：：UPCI-SCC090细胞、HCT15细胞、293T细胞

CV-1细胞类似产品：：CCD 1112SK细胞、HCPEpiC细胞、WiDrTC细胞

Panc 02细胞类似产品：：T47-D细胞、Hs675T细胞、Pan02细胞

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CAL-33细胞类似产品：：COLO 678细胞、WM451细胞、hTERT-HPNE细胞

WSU-HN13细胞类似产品：：RPMI 8402细胞、H2073细胞、DAN-G细胞

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TE 85.T细胞类似产品：：BE(2)M17细胞、RPTEC/TERT1细胞、GA-10 (Clone 4)细胞

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T2 (174 x CEM.T2)细胞类似产品：：Bowes melanoma cells细胞、NCIH2347细胞、GP2d细胞

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Mo7e细胞类似产品：：H-2196细胞、CAKI 2细胞、NCI-H510细胞

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16-HBEo细胞类似产品：：Normal Rat Kidney-49F细胞、OSC-19细胞、NCIH1915细胞

Hx-147细胞类似产品：：PLB 985细胞、MES-23.5细胞、PG-4细胞

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Pt-K2细胞类似产品：：MDA 231-LM2-4175细胞、HFT-8810细胞、HKF细胞

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NRK clone 49F细胞类似产品：：H322T细胞、OVCA-420细胞、OE21细胞

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Tu-212细胞类似产品：：SNU-475细胞、NCI-H526细胞、V79-4细胞

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T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1细胞类似产品：：Hs 766细胞、H-676细胞、RPVSMC细胞

SU86.86细胞类似产品：：NT2D1细胞、BIC细胞、H-1435细胞

HEK.EBNA细胞类似产品：：NCIH2196细胞、WM115F细胞、NCIH226细胞

CAL851细胞类似产品：：CPA 47细胞、SNU216细胞、hTERT-RPE-1细胞

Hs 729细胞类似产品：：SK Hep1细胞、YES-2细胞、JB-6 Cl 30细胞

HS-695T细胞类似产品：：HCV29细胞、SCC 25细胞、L M (TK-)细胞

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MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)细胞类似产品：：SHP-77细胞、JF305细胞、SKMEL28细胞

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