HEK293-EBNA Cells(赠送Str鉴定报告)|人胚肾细胞

"HEK293-EBNA Cells(赠送Str鉴定报告)|人胚肾细胞

细胞背景资料：详见相关文献介绍

细胞形态：上皮细胞样

解冻细胞出现大量细胞碎片的可能原因及推荐解决方案如下：１)冷冻时细胞密度过低：推荐的解决方案：缩短解冻过程中的时间。将细胞取出后，立即将冻存管浸入在３７℃的水浴中，并震荡至全部融化，然后迅速地转移到预热的培养基中；２)不适当的冷冻过程：推荐的解决方案：解冻不同冷冻室总的试管。确保在冻存过程中采用的适当的技术，并确保使用了适量和适合的冷冻液。出现生长缓慢的可能原因及推荐解决方案如下：１)培养瓶的大小：一般解决方案是一些细胞在培养基中倾向于维持一定的密度。将培养物转移到较小的培养瓶中，使细胞密度上升；如，根据培养基的体积，从T７５培养瓶转移到２或３个T２５培养瓶中；２)细胞密度过低：通常解决方案是提GAO未来冷冻物种细胞的冻存密度，或使用较小的培养容器，或解冻多个试管来进行培养。

细胞生长：贴壁

HLE-SRA-01/04细胞类似产品：：Panc2.03细胞、CEMC7细胞、NTera 2细胞

L- cell细胞类似产品：：UMR 106细胞、32D CL3细胞、SK MEL-28细胞

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HEK293-EBNA Cells(赠送Str鉴定报告)|人胚肾细胞

细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

传代的操作步骤注意事项：1)操作前要洗手，进入超净台后手要用75%酒精或0.2%新洁尔灭擦试。试剂等瓶口也要擦试。2)点燃酒精灯，操作在火焰附近进行，耐热物品要经常在火焰上烧灼，金属器械烧灼时间不能太长，以免退火，并冷却后才能夹取组织，吸取过营养液的用具不能再烧灼，以免烧焦形成碳膜。3)操作动作要准确敏捷，但又不能太快，以防空气流动，增加污染机会。4)不能用手触已消毒器皿的工作部分，工作台面上用品要布局合理。5)瓶子开口后要尽量保持45℃斜位。6)吸溶液的吸管等不能混用。贴壁细胞传代的操作步骤：1)吸除培养瓶内旧培养液。2)向瓶内加入胰蛋白酶和EDTA混合液少许，以能覆满瓶底为限。3)置温箱中2-5分钟，当发现细胞质回缩，细胞间隙增大后，立即终止消化。4)吸除消化液，向瓶内注入Hanks液数毫升，轻轻转动培养瓶，把残余消化液冲掉。注意加Hanks液冲洗细胞时，动作要轻，以免把已松动的细胞冲掉流失，如用胰蛋白酶液单独消化，吸除胰蛋白酶液后，可不用Hanks液冲洗，直接加入培养液。5)用吸管吸取营养液轻轻反复吹打瓶壁细胞，使之从瓶壁脱离形成细胞悬液。6)计数板计数后，把细胞悬液分成等份分装入数个培养瓶中，置温箱中培养。悬浮细胞传代的操作步骤：1)吸出细胞培养液，放入离心管中，离心1000rpm5分钟。2)吸掉上清液，加入适量之新鲜培养基，混和均匀后，依稀释比例转移至新的培养瓶中，以正常培养条件培养。

细胞传代方法：１：４-１：１０传代；每周２次。

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NT2/D1细胞类似产品：：H-2170细胞、KYSE0410细胞、Y79细胞

T47-D细胞类似产品：：L 1210细胞、EFM-19细胞、CAL 33细胞

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IB-RS2细胞类似产品：：SW-1417细胞、MKN-45细胞、OUMS-23细胞

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

HEK293-EBNA Cells(赠送Str鉴定报告)|人胚肾细胞

细胞生长特性：贴壁生长

KLN-205细胞类似产品：：RCS细胞、H1437细胞、Centre Antoine Lacassagne-51细胞

MDA231-LM2-4175细胞类似产品：：CSQT-2细胞、Leukemia L1210细胞、HCT-FET细胞

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Mevo细胞类似产品：：Sci-1细胞、BxPC-3细胞、MDA2B细胞

SUM 149PT细胞类似产品：：3-LL细胞、SHEE细胞、PE CA PJ34细胞

造成实验室细胞污染常见情况总结：细胞培养中Zui常见污染的是细菌、真菌和支原体污染。细胞一旦污染，大多数较难处理。那么，哪些情况我们不注意的话就会造成细胞污染呢？我们根据常见细胞培养实验分析总结下。【违规操作】１)为节省时间，有人已经用超净台四个多小时，不开紫外灭菌３０min,酒精擦拭后直接开始试验；２)器材或者溶液很久没用，未检测是否污染而直接使用；离心管多次使用，枪头为了方便交叉使用；３)超净台不点酒精灯；点了酒精灯放在右上角，而你在左下角做试验；４)不带手套，徒手操作；５)细胞培养间配备枪式移液器、手术器械、离心机、冰箱等专用仪器设备以及专用的实验服和拖鞋，未定期消毒。专用物品被带出传代细胞使用。培养细胞过程中使用的所有实验用具，如移液管、一次性枪头、一次性塑料离心管、冻存管等未按要求灭菌使用(通常需１２１°CGAO压灭菌２０分钟后３７％烤干备用)。超净台和桌面，东西太多太乱：超净台不是储物箱，什么培养皿、各种规格的板子、枪头就不要堆在超净台！这样就会有许多紫外线顾不到的卫生死角。传代细胞其他的桌面，切忌东西堆积如山，不要将酒精棉球、标签纸、牛皮纸买来后全部堆在传代细胞！一不小心“飘”进你的细胞培养板里，细胞就会养的不HAO，啥时候死了都不知道！【培养箱太久没清洁】细胞污染了，并非直接扔了培养皿就不管了，首先你还得看看这个恒温培养箱里其他培养皿或孔板里的细胞是否污染，如果有而且HAO几个板子都有类似的污染块，那很可能是培养箱中的水或者空气污染了，得给培养箱做个大扫除，重新酒精消毒，照紫外；孵箱里的水，水没了要记得加，还得记得十天半个月的就用酒精擦擦托盘。【传代细胞人多口杂，难管理】在传代细胞这种卫生要求GAO，人多了，不确定因素多了，难以保证试验在无菌条件下操作。出入试验室，实验服当风衣穿，不扣纽扣，不戴，就容易造成细胞污染；超净台做实验时，喜欢说话聊着做试验，要是还不带口罩，里面就有很多细菌等着去攻击你的细胞呢！

贴壁细胞消化传代时通常采用两种方法：一、加入胰酶等细胞脱落后，再加培养基中止胰酶作用，离心传代；二、加入胰酶后，镜下观察待细胞始脱落时，弃胰酶，加培养液分瓶。但前者太麻烦，而后者有可能对细胞施加胰酶选择，因为总是贴壁不牢的细胞先脱落，对肿瘤细胞来说，这部分细胞有可能是恶性程度较GAO的细胞亚群。一种简单的消化传代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，弃之，再加入适量胰酶作用１０s-４０s(根据细胞消化的难易程度)，弃之，这样依赖残余的胰酶就可将细胞消化单细胞。对于较难消化的细胞，可以用２%利多卡因消化５-８分钟，然后再弃去，加培养基吹打也可以，对细胞的影响不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把旧培养液吸的干净一点，直接加酶消化应该不会有什么问题。弃培养液后，用０.０４%的EDTA冲洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室温孵育５min，弃取大部分EDTA，加入与剩余EDTA等量的胰酶(预热)总体积１/１０v。消化到有细胞脱落。不过有人说EDTA对细胞不HAO，有证据吗？培养的BASMC：倒掉旧培养液加入少量胰酶冲一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶约６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入适量新培养基中和，并分瓶这种方法简单、省事；效果很HAO并且不损失细胞！

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C32 mel细胞类似产品：：MESSA-DX5细胞、C1R细胞、NGEC细胞

253JBV细胞类似产品：：BT549细胞、Hs 578.T细胞、BJ [Human fibroblast]细胞

HeLa.S3细胞类似产品：：ND7/23细胞、Ocular Choroidal Melanoma-1细胞、BT474细胞

Wien133细胞类似产品：：CHL-CL-11细胞、BALL1细胞、LTEP-a2细胞

PNT1/A细胞类似产品：：HCC-1599细胞、Hs729T细胞、NRK-49F细胞

HTR-8/SV neo细胞类似产品：：BDCM细胞、RMa-bm细胞、NCI-H747细胞

C 6细胞类似产品：：3T3-L1细胞、NT2D1细胞、Factor Dependent Continuous-Paterson 1细胞

SU4细胞类似产品：：NW38细胞、MCA-38细胞、CAL-39细胞

293 EBNA细胞类似产品：：Calu 3细胞、SUM159细胞、B 95-8细胞

HL 60细胞类似产品：：SW 948细胞、B-104细胞、RERFLCMS细胞

Panc_08_13细胞类似产品：：CCD-112CoN细胞、Jurkat 77细胞、PCI-4M细胞

V 79-4细胞类似产品：：FHs 74 Int细胞、K 562细胞、AU-565细胞

HepG2/C3A细胞类似产品：：SUM-102PT细胞、Hs839T细胞、Rin-M-5F细胞

Case 3细胞类似产品：：NCIH2106细胞、SKN-SH细胞、OVCAR 5细胞

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