HEK293-H Cells(赠送Str鉴定报告)|人胚肾细胞

"HEK293-H Cells(赠送Str鉴定报告)|人胚肾细胞

细胞背景资料：详见相关文献介绍

细胞形态：上皮细胞样

解冻细胞常见实验问题分析及推荐解决方法：在解冻冻存细胞时，发现会出现存活率低、大量细胞碎片及生长缓慢等问题，究竟是什么原因导致，我们该怎么进行解决？以下是国内外细胞培养专家针对解冻细胞实验问题，总结的一些解决方案！出现低存活率的可能原因及推荐解决方案如下：１)解冻过程中细胞裂解，推荐的解决方案：可预期到一定量的细胞死亡，因此细胞的浓度应足够GAO，考虑到这一损失。起始浓度为１*１０(６)至１*１０(７)细胞/毫升；２)解冻过程中的问题，推荐的解决方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷冻的培养物，保存时间为１-５天，但这不是保存的方法。在３７℃充分解冻后应立即开始培养；３)对冷冻液过敏，推荐的解决方案：A.完全或部分更换培养基，减少培养基中冷冻液的量。在２４小时后更换培养液体可全部去除冷冻液。B.留出更多时间供培养物恢复。有时细胞需要几周时间才能形成单层或密集的悬浮物，取决于冷冻时细胞的年龄或传代次数或在生长阶段中的位置。冷冻的Zui佳条件在对数期；４)被冷冻的原种细胞的年龄或冷冻时培养物的年龄，推荐的解决方案：解冻Zui近冷冻的细胞。细胞处于冷冻状态的时间越长，存活率越低。检查冷冻细胞的时间和方法。在冷冻时细胞应处于对数期。

细胞生长：贴壁

IEC-6细胞类似产品：：AdHek细胞、OCI-LY-7细胞、Hs 839.T细胞

SW 403细胞类似产品：：NBL_S细胞、4T1-LUC细胞、A375细胞

MUTZ1细胞类似产品：：P3-X63Ag8细胞、Human Epithelioma-2细胞、HITT15细胞

Tu-177细胞类似产品：：MUG-Chor1细胞、NIH:OVCAR-10细胞、WM2664细胞

MLA 144细胞类似产品：：ATDC-5细胞、CAL 51细胞、NCI-H1650细胞

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细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

悬浮细胞不容易转染：悬浮细胞是指细胞生长不依赖支持物表面，在培养液中呈悬浮状态生长，如淋巴细胞。在实验室经常会遇到悬浮细胞的转染，其和贴壁细胞转染还是有很大不同的。目前大多数实验室用的是脂质体类的转染试剂，脂质体转染是基于电荷吸引原理，先形成脂质体-DNA复合物，散布在细胞周围，然后通过细胞的内吞作用，将目的基因导入细胞内，而脂质体复合物与贴壁细胞的接触机会比悬浮细胞GAO出很多倍，所以，脂质体转染时悬浮细胞的转染效率要明显低于贴壁细胞。其次，脂质体试剂的毒性较大，这就使得悬浮细胞的转染更为困难了。另外，悬浮细胞不易培养，易死亡，也给细胞转染造成了一定的困难。为了提GAO悬浮细胞的转染效率，可以使用非脂质体的转染试剂，如纳米材料的。也可以使用电转染方法，针对悬浮细胞等难转染细胞还是挺不错的，电击对细胞有一定的损伤，ZuiHAO选用具有细胞膜修复功能的电转染试剂，可以将电击对细胞的伤害降到Zui低，悬浮细胞不易转染，选对试剂及良HAO的细胞培养环境才是关键。

细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。

GC-1spg细胞类似产品：：SK.MEL.2细胞、NCI-H1299细胞、YES 2细胞

22Rv-1细胞类似产品：：SGC7901细胞、HCC-70细胞、Monomac-1细胞

OUMS-23细胞类似产品：：210RCY3-Ag1.2.3细胞、SF 763细胞、COLO206F细胞

BT-483细胞类似产品：：C8161细胞、JROECL33细胞、U-87-MG细胞

149 PT细胞类似产品：：Hs 578T细胞、H-9细胞、SNU878细胞

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

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细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分

MCF-7/AdrR细胞类似产品：：RPMI no 8226细胞、NCIH28细胞、HBE135-E6E7细胞

TR-146细胞类似产品：：MDA-231细胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3细胞、CHO细胞

MDA-MB-231-luc细胞类似产品：：211H细胞、Co320细胞、HFF1细胞

H-1522细胞类似产品：：KNS-42细胞、CAL-78细胞、Hs 766.T细胞

SKNO1细胞类似产品：：MDA-MB-175VII细胞、HCC-1937细胞、CT26细胞

H-847细胞类似产品：：Li-7细胞、ATDC-5细胞、CMECs细胞

细胞培养实验中常见问题总结：１)一般客户拿到细胞后，应该注意什么？客户收到细胞后先不开盖，放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞后观察培养基的颜色和是否有漏液情况，显微镜下拍细胞１００X，２００X各一张)，排除细胞本身污染的情况；收到细胞未开封，出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。收到细胞时如无异常情况，请在显微镜下观察细胞密度，如为贴壁细胞，未超过８０%汇合度时，将培养瓶中培养液吸出，留下１０ml培养液继续培养；超过８０%汇合度时，请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞，吸出培养液、１０００转/分钟离心２分钟，吸出上清，管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。细胞消化液建议使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快递细胞多久能到，是寄冻存的细胞还是复苏HAO的细胞？我们采用快递发货，一般外地２--３天，寄细胞前请确认当地温度，如果气温低于４度的，则采用邮寄冻存细胞；３)可否使用与原先培养条件不同之培养基？不能。每一细胞株均有其定使用且已适应之细胞培养基，若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基，细胞大都无法立即适应，造成细胞无法存活；４)可否使用与原先培养条件不同之血清种类？不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源，所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清，在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同，血清使用错误常会造成细胞无法存活。

细胞传代培养实验：体外培养的原代细胞或细胞株要在体外持续地培养就必须传代，以便获得稳定的细胞株或得到大量的同种细胞，并维持细胞种的延续。培养的细胞形成单层汇合以后，由于密度过大生存空间不足而引起营养枯竭，将培养的细胞分散，从容器中取出，以１:２或１:３以上的比率转移到另外的容器中进行培养，即为传代培养；细胞“一代”指从细胞接种到分离再培养的一段期间，与细胞世代或倍增不同。在一代中，细胞培增３～６次。细胞传代后，一般经过三个阶段：游离期、指数增生期和停止期。常用细胞分裂指数表示细胞增殖的旺盛程度，即细胞群的分裂相数/１００个细胞。一般细胞分裂指数介于０.２％～０.５％，肿瘤细胞可达３～５％；细胞接种２～３天分裂增殖旺盛，是活力ZuiHAO时期，称指数增生期(对数生长期)，适宜进行各种试验。实验步骤：１.将长成的培养细胞从二氧化碳培养箱中取出，在超净工作台中倒掉瓶内的培养液，加入少许消化液。(以液面盖住细胞为宜)，静置５～１０分钟。２.在倒置镜下观察被消化的细胞，如果细胞变圆，相互之间不再连接成片，这时应立即在超净台中将消化液倒掉，加入３～５ml新鲜培养液，吹打，制成细胞悬液。３.将细胞悬液吸出２ml左右，加到另一个培养瓶中并向每个瓶中分别加３ml左右培养液，盖HAO瓶塞，送回二氧化碳培养箱中，继续进行培养。一般情况，传代后的细胞在２小时左右就能附着在培养瓶壁上，２～４天就可在瓶内形成单层，需要再次进行传代。

NCI-SNU-620细胞类似产品：：NCI-441细胞、MKN 28细胞、MHCC97-L细胞

Clone 166细胞类似产品：：CCD-33Co细胞、COLO 320F细胞、SV40 MES 13细胞

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H82sclc细胞类似产品：：Y 1细胞、SCC-4细胞、Pro-5WgaRI3C细胞

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TEC细胞类似产品：：BNL.CL2细胞、SK Mel 2细胞、LM3细胞

MeSoTheliOma-211H细胞类似产品：：BIU-87细胞、Instituto Biologico-Rim Suino-2细胞、SU-DHL-1细胞

SKNO-1细胞类似产品：：HEC-151细胞、IEC-18细胞、C32 [Human melanoma]细胞

KE 37细胞类似产品：：SU-DHL-4细胞、NCI-H747细胞、KP-N-RT细胞

Lewis lung carcinoma line 1细胞类似产品：：MDA157细胞、IPEC-1细胞、SNU119细胞

EOC20细胞类似产品：：COV-434细胞、AgC11x3A细胞、Madin-Darby Canine Kidney细胞

PaTu8988s细胞类似产品：：Hs863T细胞、HCEC-B4G12细胞、HPBALL细胞

B104 [Rat neuroblastoma]细胞类似产品：：C57/B6-L细胞、HHL5细胞、C166细胞

SN12PM6细胞类似产品：：COLO679细胞、HeLa细胞、KYSE180细胞

A2780/Taxol细胞类似产品：：RT112细胞、OVMANA细胞、HSC/mHSC细胞

SNU484细胞类似产品：：Hs819T细胞、MAD109细胞、CCD-841-CoN细胞

HCC2279细胞类似产品：：HuCC-T1细胞、EOC-20细胞、MUTZ-1细胞

RK 13细胞类似产品：：NCIH2405细胞、T-ALL 1细胞、143B细胞

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