A3 Cells(赠送Str鉴定报告)|人T淋巴细胞白血病细胞

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细胞背景资料：详见相关文献介绍

细胞形态：淋巴母细胞样

解冻细胞出现大量细胞碎片的可能原因及推荐解决方案如下：１)冷冻时细胞密度过低：推荐的解决方案：缩短解冻过程中的时间。将细胞取出后，立即将冻存管浸入在３７℃的水浴中，并震荡至全部融化，然后迅速地转移到预热的培养基中；２)不适当的冷冻过程：推荐的解决方案：解冻不同冷冻室总的试管。确保在冻存过程中采用的适当的技术，并确保使用了适量和适合的冷冻液。出现生长缓慢的可能原因及推荐解决方案如下：１)培养瓶的大小：一般解决方案是一些细胞在培养基中倾向于维持一定的密度。将培养物转移到较小的培养瓶中，使细胞密度上升；如，根据培养基的体积，从T７５培养瓶转移到２或３个T２５培养瓶中；２)细胞密度过低：通常解决方案是提GAO未来冷冻物种细胞的冻存密度，或使用较小的培养容器，或解冻多个试管来进行培养。

细胞生长：悬浮

SKCO1细胞类似产品：：PC3M-1E8细胞、NG108-15细胞、RBVEC细胞

786-0细胞类似产品：：NCIH716细胞、TOG细胞、NCIH2291细胞

H28细胞类似产品：：H1618细胞、HOK细胞、V79-GalK1细胞

Michigan Cancer Foundation-12F细胞类似产品：：HBL 100细胞、HRCEC细胞、WM-2664细胞

SW1783细胞类似产品：：HCT-GEO细胞、HuH-1细胞、LNCaP-C4-2细胞

A3 Cells(赠送Str鉴定报告)|人T淋巴细胞白血病细胞

细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

在细胞培养过程中会出现这样或那样的问题，客户遇到的问题从细胞生长角度来说，针对细胞培养过程中生长不HAO、甚至死亡的原因，我们做以下分析并提出相对应的解决方法。一、培养细胞生长不HAO》可能原因：细胞本身的状态》1)细胞传代次数多，细胞老化；2)细胞的接种量：接种量过低，细胞生长缓慢；3)细胞传代时间过晚：细胞中毒，影响传代后的细胞生长；4)胰酶消化时间过长或过短：时间过长，细胞死亡；时间过短，细胞未完全分离而成团，细胞死亡；5)细胞的冻存与复苏：慢冻速融。污染：1)支原体污染；2)霉菌污染；培养基或血清：1)更换血清或培养基之前未进行验证；2)选择的培养基是否合适；3)培养基配制是否准确无误；培养环境：1)CO2供应是否正常；2)培养箱或摇床温度控制是否正确；解决方法：根据以上四个方面的可能原因，做出针对性的解决方案》1)注意细胞的本身状态：如传代次数、接种量等；2)避免产生污染（用正规、合法、可溯源的血清）；3)要用合适的血清或培养基，ZuiHAO经过验证；4)注意实验室的环境；二、培养细胞死亡》可能原因：1)培养箱内无CO2；2)培养箱内温度波动太大；3)细胞冻存或复苏过程中损伤；4)培养液渗透压不正确；5)培养液中有毒代谢产物堆积；解决方法：1)检测培养箱内CO2；2)检查培养箱内温度；3)取新的保存细胞种；4)检测培养液渗透压；5)换入新鲜培养液。

细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。

HEI-193细胞类似产品：：HNSC细胞、NIH:OVCAR-5细胞、NCI-H1819细胞

293 F细胞类似产品：：Huh-7.5.1细胞、RS4-11细胞、U87细胞

ssMCF-7细胞类似产品：：NCI-SNU-C1细胞、NCI.H522细胞、AZ 521细胞

LUDLU1细胞类似产品：：OCILY3细胞、CT-26 WT细胞、K562细胞

H1650细胞类似产品：：H2171细胞、PLB-985细胞、HCCLM6细胞

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

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细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分

PL45细胞类似产品：：4T1细胞、NHDF细胞、Centre Antoine Lacassagne-12T细胞

OC-3-VGH细胞类似产品：：SUDHL-6细胞、PJ34细胞、SUD-4细胞

SK-RC 42细胞类似产品：：SW 13细胞、Hs 870.T细胞、USMC细胞

HSC4细胞类似产品：：H1105细胞、mIMCD-3细胞、NSH细胞

P3-X63-Ag8细胞类似产品：：Colo-678细胞、Sp2/mIL-6细胞、HEY A8细胞

WERI细胞类似产品：：OV3121细胞、AHH1细胞、HAC-84细胞

细胞冻存的步骤：１)选择处于对数生长期的细胞，在冻存前一天ZuiHAO换液。将多个培养瓶中的细胞培养液去掉，用０.２５% 胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶，加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞，使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(１０００r/min，１０分钟)；２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培养基，于４℃预冷１５分钟后，逐滴加入已无菌的DMSO或甘油，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，细胞浓度为５×１０６～１×１０７/mL之间。(冻存培养液的配置是不是一定要用小牛血清呢？答案是不一定的，具体要看培养的细胞类型来选择；３)将分装上述细胞悬液于２ml冻存管中，每管０.２５ml。冻存管要将盖子盖紧，并标记HAO细胞名称和冻存日期，同时作HAO登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)；４)将装HAO细胞的冻存管放到冻存盒中，-８０℃冰箱过夜。；如果有程序降温器(放在-８０℃冰箱过夜，放入液氮罐)ZuiHAO;或者可以在４℃，２h;然后转到-２０℃，２h;-８０℃，２h;放入液氮罐；５)细胞冻存在液氮中可以长期保存，但为妥善起见，冻存半年后，ZuiHAO取出一只冻存管细胞复苏培养，观察生长情况，然后再继续冻存。

贴壁消化难题：１，先用PBS 把细胞洗两遍，使瓶内没有血清了，减少对胰酶的中和，然后用新配的０.２５%的胰酶加入３ml左右，放在３７度，然后可以在细胞有些消化下来时，拿着瓶口，运用手腕的力量轻轻震荡瓶内液体，这样细胞很快就下来了，还不需要吹打，分散也均匀；２，成团、絮状：消化液里加入edta可以减少细胞成团的现象，血清可以终止胰酶的作用，如果是进口血清的话也能终止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉，也可以不倒，直接加血清终止，如果消化液中加入了edta的话，就要将消化液倒干净，如果细胞贴壁要求不是很严格的话，一般不需要进行离心。鼻咽癌细胞的贴壁能力很强，用０.５%胰酶(含０.１%EDTA)一般要消化１２~１５min。用PBS洗涤时要洗净残余的培养基，加入胰酶后在培养箱中消化(避免细胞室温下受损以及在此温度时胰酶活性Zui强)至细胞收缩变圆(可显微镜下观察)且有少许细胞脱落(有流下来的趋势)，随后立即弃去胰酶(如果脱落的细胞很多且需要大量细胞实验，则不能弃去胰酶)，加入培养基仔细吹打(不能用无血清培养基或者PBS替代，否则细胞聚集成团块或絮状)。一般我都离心一次弃去上清(去除残留的胰酶及漂浮的死细胞或细胞碎片)；消化过度：马上用培养基中和，用吸管吹打细胞，收集全部的细胞到以无菌的离心管中８００RPM ３分钟。弃上清，用全培重悬，换新的培养瓶继续培养，状态不HAO的细胞在培养的过程中会死亡脱落，在换液的时候可以清除掉！

PNT1/A细胞类似产品：：HCC-1599细胞、Hs729T细胞、NRK-49F细胞

H2342细胞类似产品：：HGE细胞、3AA细胞、MC 3T3-E1细胞

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MHCC-LM3细胞类似产品：：C-28I2细胞、JROECL19细胞、Hs934T细胞

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H184A1细胞类似产品：：28SC细胞、Baby Hamster Kidney 21细胞、Hs888 Lu细胞

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RD 2细胞类似产品：：SACCLM细胞、PANC-10-05细胞、COLO-HSR细胞

D341MD细胞类似产品：：SHI-1细胞、Verda reno细胞、COLO-320-HSR细胞

Hs729细胞类似产品：：Panc 08.13细胞、HONE1细胞、MC3T3-E细胞

Tu 212细胞类似产品：：H-187细胞、769P细胞、ssMCF7细胞

H1650细胞类似产品：：H2171细胞、PLB-985细胞、HCCLM6细胞

NCI-H2081细胞类似产品：：NCI-H102细胞、Mouse podocyte细胞、Evsa-T细胞

B-CPAP细胞类似产品：：MuM-2C细胞、CFPAC细胞、Hs729T细胞

IMR-32细胞类似产品：：BpRcl细胞、PA I细胞、SK-N-SH细胞

BEAS-2B细胞类似产品：：PA-1细胞、LICR-HN6细胞、SNG-M细胞

H1568细胞类似产品：：JeKo-1细胞、ACT-1细胞、MDA468细胞

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