半纤维素（hemicellulose）含量试剂盒说明书
分光光度法50管/48样
注 意 ：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
半纤维素（hemicellulose）含量试剂盒测定意义：
半纤维素是植物细胞壁中与纤维素紧密结合的多糖混合物，是构成细胞初生壁的主要成分，广泛存在于植物中，是一种新型可利用能源。
测定原理：
半纤维素经酸处理后转化成还原糖，与DNS生成红棕色物质，在540nm有特征吸收峰，吸光值大反映了半纤维素含量。
需自备的仪器和用品：
天平、40目筛，离心机，恒温水浴锅、烘箱、可见分光光度计、1mL玻璃比色皿。
试剂组成和配制：
试剂一：液体60mL×1瓶，4℃保存。
试剂二：液体12mL×1瓶，4℃保存。
试剂三：液体12mL×1瓶，4℃保存。
试剂四：液体10mL×1瓶，4℃避光保存。
样品处理：
样品80℃烘干至恒重，粉碎，过40目筛。
半纤维素（hemicellulose）含量试剂盒测定操作表：
| 空白管 | 测定管 |
样本（g） |
| 0.02 |
试剂一（μL） |
| 1000 |
90℃水浴10min，25℃，8000g离心10min，弃上清 |
蒸馏水（μL） |
| 1000 |
充分混匀，25℃，8000g离心10min，此步骤重复3次，取沉淀105℃，烘干至恒重 |
试剂二（μL） | 200 | 200 |
90℃水浴1h，自然冷却 |
试剂三（μL） | 200 | 200 |
混匀，25℃，8000g离心10min |
上清（μL） | 200 | 200 |
试剂四（μL） | 150 | 150 |
蒸馏水（μL） | 650 | 650 |
充分混匀，90℃水浴5min，自然冷却，25℃，8000g离心10min |
于1mL玻璃比色皿中，测定540nm处吸光值A。分别记为A空白管和A测定管，ΔA=A测定管-A空白管。空白管只要做一管。 |
计算公式：
1、标准条件下测定的回归方程为y = 0.3968x+0.0306，R2=0.9961；x为标准品浓度（mg/mL），y为吸光值。
2、半纤维素含量（mg/g 干重）=（△A-0.0306）÷ 0.3968÷（W÷V样总）
= 1.01×（△A-0.0306）÷W
W：样品质量，g；V样总：加入提取液体，0.4mL。
检测限为1mg/g。
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