TRAIL 诱导剂ONC201，TIC10主打

描述：TIC10 ONC201 是一种有效的 TRAIL 诱导剂，也抑制 Akt 和 ERK 活性

相关类别：

靶点：

TRAIL

Akt

ERK

体外研究：TRAIL诱导化合物10（TIC10），一种有效的，口服活性且稳定的小分子，其以p53非依赖性方式转录诱导肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体（TRAIL）并穿过血脑屏障。 TIC10诱导肿瘤和正常细胞中TRAIL的持续上调，这可能有助于TIC10的可证明的抗肿瘤活性。 TIC10使激酶Akt和细胞外信号调节激酶（ERK）失活，导致Foxo3a易位到细胞核中，在那里它与TRAIL启动子结合，从而上调基因转录。 TIC10是一种有效的抗肿瘤治疗剂，其作用于肿瘤细胞及其微环境，以增强内源性肿瘤抑制因子TRAIL的浓度。 TIC10作为TRAIL诱导化合物。 TIC10引起TRAIL mRNA的剂量依赖性增加，并以p53非依赖性方式诱导几种癌细胞系的细胞表面上的TRAIL蛋白定位。此外，pAkt和pERK均以剂量依赖性方式被TIC10处理下调。 TIC10还导致ERK总表达下调。

体内研究：在DLD-1结肠癌异种移植物中，TIC10在治疗后1周诱导肿瘤停滞，而TRAIL治疗的肿瘤在单次剂量后进展。单剂量的TIC10还诱导SW480异种移植物的持续消退，并且当通过腹膜内或口服途径递送时同样有效，表明TIC10具有有利的口服生物利用度。在HCT116异种移植物模型中滴定单一口服剂量的TIC10显示在25mg / kg下持续的抗肿瘤效力。在免疫活性小鼠中每周25mg / kg暴露于口服TIC10持续4周不会引起所选血清化学标记物的任何变化。相同的口服给药方案适用于Eμ-myc转基因小鼠，其从第9周至第12周自发发展为静息性淋巴瘤，并且TIC10显着（P = 0.00789）延长这些小鼠的存活期4周。

细胞实验：在Coulter-Beckman Elite Epics细胞计数器上分析漂浮和贴壁细胞。对于表面TRAIL实验，通过简单的胰蛋白酶消化收获贴壁细胞，在磷酸盐缓冲盐水（PBS）中的4％多聚甲醛中固定20分钟，与抗TRAIL抗体以1：250孵育过夜，洗涤并与抗兔孵育Alexa Fluor 488持续30分钟，并进行分析。在前向和侧向散射上对细胞进行门控以消除分析中的碎片和死细胞。除非另有说明，表面TRAIL数据表示为相对于对照样品的中值荧光强度。使用来自Imgenex的抗体类似地分析表面DR5。对于亚G1期和细胞周期分析，将所有细胞沉淀并用乙醇固定，然后在RNase存在下用碘化丙锭染色。细胞活力测定在具有CellTiter-Glo的96孔黑壁透明底板中进行。

动物实验：小鼠[1]对于皮下异种移植物，4至6周龄雌性无胸腺nu / nu小鼠接种每个后胁腹中指定细胞系的1×106个细胞（对于T98G为2.5×106）作为200-μL 1：1基质胶（BD）/ PBS的悬浮液。在注射后允许所有皮下肿瘤建立1至4周，直至治疗开始前达到约125mm 3的体积。所有腹膜内和静脉内注射均以200μL的总体积给予。通过口服强饲法施用TIC10的口服制剂，并以含有20％Cremophor EL，10％DMSO和70％PBS的200μL悬浮液形式给予。在指定的时间点用数字卡尺监测肿瘤。允许所有皮下肿瘤在注射后1-4周建立，直到在治疗开始前达到~125mm 3的体积。在肿瘤消失后监测肿瘤负荷的缓解3周，并在安乐死后通过目视检查确认。