TKB-1 人肺癌细胞系

"TKB-1 人肺癌细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍 
细胞形态：上皮细胞样 
细胞培养实验基本操作：①进无菌室前要彻底洗手，按规定穿隔离衣。开始操作前要用７５%酒精棉球擦手、擦瓶口和烧灼瓶口。②操作者动作要轻，安装吸管帽、打开或封闭瓶口等操作应在火焰近处并经过烧灼进行。但要注意，金属器械不能在火焰中长时间烧灼，以防退火；烧过的器械要冷却后才能使用；已吸过培养液的吸管不能再用火焰烧灼，因残留在吸管内的培养液成分如蛋白质等烧焦后会产生有害物质，吸管再用时会将其带到培养液中；胶塞、橡皮乳头及塑料的细胞培养用品过火焰是也不能时间太长，以免烧焦产生有毒气体，危害培养细胞，同时塑料细胞培养用品也会产生变形影响使用。③使用培养液前不宜过早开瓶，开瓶后的培养液应保持斜位，避免直立，以防止下落细菌的污染。不再使用的培养液应立即封闭瓶口，培养的细胞在处理之前勿过早暴露在空气中。④操作时尽量不要谈话，咳嗽以防止来自唾沫和呼出的气流所造成的污染。⑤吸取培养液、细胞悬液时，应专管专用，一旦发现吸管口接触了手和其他污染物品应弃去，以防止污染扩大或造成培养物之间的交叉污染。⑥操作完毕后应整理好工作台面，用消毒水浸泡的纱布擦拭台面；防止细胞交叉污染：所有从别处转来的或是自己所建的细胞系都要早期留有的充足的冻存储备，一旦怀疑发生交叉污染，可做细胞遗传学方面的鉴定，如发现原有的细胞遗传物发生改变，可以复苏早期冻存的细胞使用。重要细胞系的传代工作应由两人独立进行；无菌室的彻底消毒①新洁尔灭全面彻底擦洗无菌室。使用前应稀释即配即用。新洁尔灭和酒精相比，的优点是便宜，而且可以稀释５０倍用，而同样量的酒精价格可能是新洁尔灭的几十倍。②甲醛熏蒸法：甲醛是一种广谱灭菌剂菌，其水溶液和气体对各种细菌、芽孢及真菌等微生物均有杀灭作用。甲醛价廉，熏蒸消毒时不损坏衣服、家具、皮革、橡胶等。市售的甲醛水溶液中一般含３７－４０%的甲醛。 
细胞生长：贴壁 
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源 
TKB-1 人肺癌细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支) 
冻存和复苏的原则：慢冻快融》当细胞冷到零度以下，可以产生以下变化：细胞器脱水，细胞中可溶性物质浓度升高，并在细胞内形成冰晶。如果缓慢冷冻，可使细胞逐步脱水，细胞内不致产生大的冰晶；相反，结晶就大，大结晶会造成细胞膜、纲胞器的损伤和破裂。复苏过程应快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重结晶。慢冻程序》1.标准程序：采用细胞冻存器》当温度在-25℃以上时，1~2℃/min；当温度达-25℃以下时，5~10℃/min；当温度达-100℃时，可迅速放入液氮中。2.简易程序：将冷冻管（管口要朝上）放入纱布袋内，纱布袋系以线绳，通过线绳将纱布袋固定于液氮罐罐口，按每分钟温度下降1~2℃的速度，在40min内降至液氮表面过夜，次晨投人液氮中。3.传统程序：冷冻管置于4℃10分钟→-20℃30分钟→-80℃16~18小时（或隔夜）→液氮槽长期储存。细胞冻存方法：1.预先配制冻存液》（1）8%DMSO+细胞生长液（92%血清）2.取对数生长期细胞，经胰酶消化后，加入适量冻存液，用吸管吹打制成细胞悬液（1×10(6)~5×10(6)细胞/ml）。3.加入1ml细胞于冻存管中，密封后标记冷冻细胞名称和冷冻日期。液氮长期保存。保存细胞的复苏方法：1.快速解冻》冻存细胞从液氮中取出后，立即放入37℃水浴中，轻轻摇动冷冻管，使其在1分钟内全部融化（不要超过3分钟）。2.解冻后的细胞可直接接种到含完全生长培养液的细胞培养瓶中直接进行培养，24小时后再用新鲜完全培养液替换旧培养液，以去除DMSO。3.如果细胞对冷冻保护剂特别敏感解冻后的细胞应先通过离心去除冷冻保护剂，然后再接种到含完全生长培养液的培养瓶中。 
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。 
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 
细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分 
TKB-1 人肺癌细胞系
因为细胞生长的时候肯定是要相互联系，大部分的细胞都是要成片生长的，尤其是对于贴壁细胞，单个细胞贴壁之后长着长着就长到一片去了。但是如果是成片的细胞抱团的话，传代后细胞是不能贴壁的，这样抱团的细胞就会死亡。所以，消化传代的时候一定要将细胞消化成单个单个的独立状态，这个啊是非常考究你的功夫的！细胞一旦脱落入悬液里你很难再将他吹打成单个，因为他没有受力点了。很难找到受力点让你对他吹打的力分散开细胞。所以必须要在细胞未脱落之前将其吹打开，受力点就是细胞贴壁的地方。这样你就必须要严格控制好消化的程度啊，这和大师做饭掌握好火候是一样的道理啊。既要消化到容易吹打下来，又不能太过，一吹就整片脱落，要单个单个地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是为了保证不同生长状态贴壁程度的细胞能够都维持在好的受力点分散开。这个是很重要的一点。尤其是对于某些细胞这一点就是他活去死的致命点。像Caco-２细胞就是如此。另外关于传代很重要一点就是一定不能等到细胞长满的时候才去消化传代。要在细胞长到７０%左右的时候就要传代了，一旦发现细胞生长中已经有叠层生长的时候就要立即进行消化传代。不能再拖了。关于换液传代时候洗瓶的问题。对于用DMEM培养基培养的细胞，你在洗的时候如果是用无血清１６４０去洗细胞在随即后的几次中会比用DMEM洗的长的要好。同样，用１６４０培养的也有这个现象。如果不嫌麻烦的话，可以用PBS来洗，洗的效果和用无血清培养基洗的效果基本上是一样的，对于有些细胞会更胜一筹。洗的目的主要是洗去培养瓶里残留的血清，防止它对胰酶的影响。这样能够保证胰酶的消化能力优先，是很关键的一点。先补充这么多，还会后续更新。再补充一点：传代时PBS洗是很重要的一步，最近发现，用PBS就可以把细胞消化开来。加入PBS放置１０-１５分钟，有些需要更长的时间，等到细胞一个个分离开来的时候，就可以直接吹打下来，但是和胰酶消化一样，要控制好时间，不能时间太过了，要不然损伤细胞，细胞不容易成活，状态容易不好。这个方法对于某些细胞是很管用的。有些细胞用胰酶消化不容易消化成单个的时候，或者临时没有胰酶了，可以选用此方法。不过一定要试试，看是否适合你的细胞。 
细胞形态特性：详见细胞说明书 
SKNBE(2c)细胞系相关产品：Melan-a细胞、HCA 7细胞、NCI-H522细胞 
GM03320D细胞系相关产品：TK.10细胞、HLEB3细胞、RH35细胞 
L细胞系相关产品：PMVEC细胞、DU-4475细胞、NCI-SNU-668细胞 
H3396细胞系相关产品：NCI-H1693细胞、KYSE 410细胞、WSU-DLCL(2)细胞 
SCC4细胞系相关产品：COLO 201细胞、SMA 560细胞、Pt K2细胞 
C2C12细胞系相关产品：OC 316细胞、COLO-HSR细胞、RPE D407细胞 
HREC细胞系相关产品：H-1672细胞、J.E6-1细胞、PLC-PRF-5细胞 
EB-3细胞系相关产品：SW 1783细胞、SK-NM-C细胞、Y3-Ag 1.2.3细胞 
AR4-2J细胞系相关产品：Epithelioma Papulosum Cyprini细胞、HNEpC细胞、HS0578T细胞 
P36细胞系相关产品：MGSMC细胞、NCIH2227细胞、NHDF细胞 
NCI-H1373细胞系相关产品：HLMVEC细胞、Colon 38细胞、RIN Cl-5F细胞 
Vero C1008细胞系相关产品：COLO 206F细胞、SU 86.86细胞、TW01细胞 
253J-BV细胞系相关产品：VK2/E6E7细胞、RPE-1细胞、Michigan Cancer Foundation-7细胞 
P3X63-Ag8.653细胞系相关产品：8226/S细胞、PC14细胞、OV3121细胞 
174xCEM.T2细胞系相关产品：NCI-H446细胞、GA10细胞、H-460细胞 
PNT1-a细胞系相关产品：DHL4细胞、GC-1细胞、MSTO-211细胞 
7404细胞系相关产品：4-1st细胞、Hs 706.T细胞、Hs 821.T细胞 
SK-NSH细胞系相关产品：COV-362细胞、HCC 38细胞、C4-1细胞 
IMR 32细胞系相关产品：RenCa细胞、MDA-MB-134 VI细胞、H1048细胞 
NCI-BL1339细胞系相关产品：Neuro-2a细胞、Tb 1-Lu细胞、NCTC1469细胞 
TKB-1 人肺癌细胞系
FAK+/+细胞系相关产品：NCI-H1869细胞、Melanoma 14细胞、RD-ES细胞 
BEL 7402细胞系相关产品：HTR-8/SVneo细胞、SW403细胞、NT-2细胞 
MCA-205细胞系相关产品：HEK-293 c18细胞、NCI-SNU-1040细胞、Nb2a细胞 
NCI-H526细胞系相关产品：P3-X63-Ag8.653细胞、HS-940-T细胞、MCMEC细胞 
COV504细胞系相关产品：H341细胞、Rh30细胞、Hs 27细胞 
H2342细胞系相关产品：HGE细胞、3AA细胞、MC 3T3-E1细胞 
HR8348细胞系相关产品：DHL10细胞、LS174T细胞、DMS153细胞 
HuH6细胞系相关产品：Mel526细胞、LC1细胞、Wistar Institute, Susan Hayflick细胞 
KTC-1细胞系相关产品：RPMI 8226细胞、UMC11细胞、A 375细胞 
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16细胞系相关产品：EFM19细胞、DHL-2细胞、U937细胞 
HS-294细胞系相关产品：KPL-4细胞、RIN-m5F细胞、Huh 7.5细胞 
JROECL19细胞系相关产品：LC1/Sq细胞、U118细胞、BT483细胞 
Molm 14细胞系相关产品：M-O7e细胞、HCO细胞、38C-13细胞 
RH-35细胞系相关产品：H-2452细胞、Psi2-DAP细胞、H498细胞 
MHCC 97-H细胞系相关产品：NIT-1细胞、SW-626细胞、16HBEo-细胞 
H1793细胞系相关产品：TGW-nu-1细胞、SVEC 4-10细胞、SK Mel 1细胞 
A2780/CP细胞系相关产品：HGC-27细胞、Hs-746T细胞、SNU-601细胞 
293T细胞系相关产品：CMT-64细胞、HL-60 clone15细胞、SMA560细胞 
EJ1细胞系相关产品：SUDHL2细胞、OVCA 433细胞、SW-1463细胞 
SW 1573细胞系相关产品：Sp 2817细胞、CBRH7919细胞、MDA231细胞 
ETCC007细胞系相关产品：VP303细胞、Panc 08.13细胞、RCS细胞 
OKAC1细胞系相关产品：P3JHR1细胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10细胞、MC57细胞 
HeLa S-3细胞系相关产品：HeLa 229细胞、RFL 6细胞、Factor Dependent Cell-Paterson 1细胞 
MDCK细胞系相关产品：SK-BR-3细胞、PNEC30细胞、293/EBNA-1细胞 
NCI-H929细胞系相关产品：S3-HeLa细胞、Glioma 261细胞、NCI-H865细胞 
3LL细胞系相关产品：HT-22细胞、PA-TU S细胞、SH-SY5Y Parental细胞 
HUVEC-C[HUVEC]细胞系相关产品：N1S1细胞、M-07e细胞、Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D细胞 
Ej138细胞系相关产品：Hi5细胞、MB-49细胞、G422细胞 
IGR-OV1细胞系相关产品：H1734细胞、EMT6细胞、MFD-1细胞 
MEF (CF-1)细胞系相关产品：HPDE6c7细胞、RMG-I细胞、1301细胞 
RL95-2细胞系相关产品：Clone 166细胞、GM03570细胞、Molm 13细胞 
RBL-2H3细胞系相关产品：EFM192B细胞、KB细胞、C4-2 Bone metastatic细胞 
Dysplastic Oral Keratinocyte细胞系相关产品：ACC2细胞、SK-RC-42细胞、SKMEL1细胞 
Walker/LLC-WRC256细胞系相关产品：INS1-E细胞、CL1-0细胞、Vero 76 clone E-6细胞 
HT 115细胞系相关产品：SBC5细胞、H2171细胞、KYSE520细胞 
WM 115细胞系相关产品：FU-OV-1细胞、N-2a细胞、BT325细胞 
Pro-5WgaRI3C细胞系相关产品：NCI-SNU-423细胞、NCIH69细胞、Hs 934.T细胞 
B4G12细胞系相关产品：MUM2B细胞、PCI:SG231细胞、Hs-578Bst细胞 
KB细胞系相关产品：T-ALL1细胞、H-2171细胞、SUM-159PT细胞 
MM1细胞系相关产品：MV 4;11细胞、Tregs细胞、NIH-3T3细胞 
HBZY 1细胞系相关产品：HOS-MNNG细胞、HEK-293F细胞、REC1细胞 
TKB-1 人肺癌细胞系
AN3 CA细胞系相关产品：BV-2细胞、Ishikawa细胞、COLO 679细胞 
H-1373细胞系相关产品：HCO细胞、CHP 212细胞、MCFs细胞 
DMS 273细胞系相关产品：AN-3细胞、OCI-Ly7细胞、Hs940-T细胞 
NTERA-2/D1细胞系相关产品：RM-1细胞、H-520细胞、MAVER-1细胞 
Molm14细胞系相关产品：CAL78细胞、HCE-2 [50.B1]细胞、HS 445T细胞 
ATDC-5细胞系相关产品：KMST-6细胞、OVCAR-3细胞、MBMEC细胞 
McCoy细胞系相关产品：NCIH1373细胞、HAVSMC细胞、CA-46细胞 
Hmy.2 CIR细胞系相关产品：Balb/c3T3细胞、NE1细胞、KYSE 450细胞 
MM1S细胞系相关产品：L-1210细胞、FAT细胞、B5537SKIN细胞 
A2780S细胞系相关产品：OE-33细胞、FCCH1018细胞、MAC1细胞 
SW-837细胞系相关产品：P3HR-1细胞、HuT-78细胞、NCI-H460细胞 
L细胞系相关产品：PMVEC细胞、MESSADX5细胞、Hs895.T细胞 
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