3T3-J2 小鼠胚胎成纤维细胞系

"3T3-J2 小鼠胚胎成纤维细胞系
细胞背景资料：胚胎；成纤维细胞 
细胞形态：成纤维细胞样 
常见培养细胞预防污染的有效措施：体外培养的细胞受到严重污染时，有时即使想尽各种办法也难以挽回。因此，防止污染，预防是关键。只有将预防措施贯穿于整个细胞培养的始终，才能将发生污染的可能性降到最小程度。一般预防可从以下几方面着手：１)添加抗生素：各种抗生素性质不同，对各种微生物的作用也不同，联合应用比单用效果好，预防性应用比污染后使用好(但迄今尚无对抗支原体特效抗生素)。但反复使用抗生素会使微生物产生耐药性，且对细胞本身也有一定影响，因此为避免诱导抗药细菌，应定期更换培养系统中的抗生素，或尽可能不用抗生素处理；２)从物品、用品消毒灭菌着手：细胞培养所用物品清洗、消毒要彻底，各种溶液灭菌除菌要仔细，并在取样检菌一周后确认无菌才能使用。同时，在无菌过滤操作中，随着滤过体积的增大，滤膜破损的可能性增加，故应选择最后过滤的液体进行检测。定期对二氧化碳培养箱进行消毒。具体操作：７５%的酒精搽拭培养箱后，使用可移动的紫外灯至少消毒３０min，加入高压灭菌过的超纯水于培养箱水槽中保持湿度。也可配制３００ml的饱和酸铜加３L灭菌超纯水混合成酸铜溶液加入水槽中。 
细胞生长：贴壁 
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源 
3T3-J2 小鼠胚胎成纤维细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支) 
可以这样说，对于需要消化传代的细胞，每一次的消化都是对这个细胞存活与否，状态好与不好至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题，自己养的细胞开始的几代长的还挺好的，可是穿过几代之后就发现自己的细胞不行了，状态越来越差劲了。对于这个问题，可以非常肯定地说，你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以，越长越差。在消化的过程中，你加入胰酶后，所有细胞都在被胰酶消化着，但是我们忽视了一个问题就是，细胞的生长状态是不一样的，每一个细胞的贴壁情况也是不一样的，有的贴壁牢固，有的贴壁没有那么牢固的，所以，让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的，他们受到了差别待遇当然会有脾气的，大家争取做到因材施教，比如试试下面的“四步消化法”。（以难消化细胞为例），具体操作：1)首先不加胰酶，倒掉旧培养基加入少量新培养基洗1-2遍（目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉）。2)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍，这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍，两次所得悬液混合传入新瓶。（你可以将这些传入新瓶培养，以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更好一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了）3)吸干净瓶内剩余液体，加入0.3ml左右的胰酶润洗一遍，吸掉弃之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察，待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶，加入新培养基开始吹打，吹打2-3遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用2ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。(也可以传入新瓶培养，以与后面及前面的做对比)4)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶，如果你们那比较富裕的话，继续镜下观察，待剩余细胞间隙明显，细胞独立开来的时候，吸掉胰酶，加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养（根据实际情况把握）。 
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。 
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 
细胞生长特性：贴壁 
3T3-J2 小鼠胚胎成纤维细胞系
细胞的冻存：目前，细胞冻存最常用的技术是液氮冷冻保存法，主要采用加适量保护剂的缓慢冷冻法冻存细胞。主要操作步骤为：(１)选择处于对数生长期的细胞，在冻存前一天换液。将多个培养瓶中的细胞培养液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶，加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞，使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(１０００r/min，１０分钟)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培养基，于４℃预冷１５分钟后，逐滴加入已无菌的DMSO或甘油，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，细胞浓度为３×１０(６)～１×１０(７)/mL之间。(３)将上述细胞分装于安瓿或专用冷冻塑料管中，安瓿装１～１.５mL在火焰喷灯上封口，封口处要完全封闭，圆滑无勾。冷冻管要将盖子盖紧，并标记好细胞名称和冻存日期，同时作好登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)。(４)将装好细胞的安瓿或冻存管装入沙布袋内;置于液氮容器颈口处存放过夜，次日转入液氮中。采用控制降温速度的方法也可采用下列步骤：先将安瓿置入４℃冰箱中２～３小时，再移至冰箱冷冻室内３～４小时，再吊入液氮容器颈气态部分存放２小时，最后沉入液氮中。细胞冻存在液氮中可以长期保存，但为妥善起见，冻存半年后，取出一只安瓿细胞复苏培养，观察生长情况，然后再继续冻存。 
细胞形态特性：详见细胞说明书 
MHCC 97-H细胞系相关产品：NIT-1细胞、SW-626细胞、16HBEo-细胞 
ROS1728细胞系相关产品：T_T_细胞、SW962细胞、SW 954细胞 
HConEpic细胞系相关产品：Vero 76 clone E-6细胞、KP-N-RT细胞、NCIH929细胞 
MDA-MB-435 S细胞系相关产品：MDA231-LM2细胞、DHL6细胞、INS1E细胞 
MDAMB175VII细胞系相关产品：HCV-29细胞、CT-26细胞、WM451细胞 
HCC 38细胞系相关产品：NCTC1469细胞、Ku812细胞、NCI-H2171细胞 
NCIH1915细胞系相关产品：SW260细胞、293细胞、MDA 435细胞 
CF-PAC1细胞系相关产品：NCIH2452细胞、P30/Ohkubo细胞、NCC-IT细胞 
HCEC-B4G12细胞系相关产品：AX-Mel细胞、MNNG细胞、H-1975细胞 
X63Ag8.653细胞系相关产品：HT144mel细胞、Leydig细胞、SW-962细胞 
Scott and White No. 13细胞系相关产品：NCI-H735细胞、MCF-7ADR细胞、NCIH740细胞 
MUM2B细胞系相关产品：EL4细胞、H-187细胞、KP-N-RT-BM-1细胞 
HC11 Mammary Epithelium细胞系相关产品：F98细胞、H-1734细胞、4T1.2细胞 
OVCA420细胞系相关产品：H 9细胞、MGH-U1细胞、CEM-CCRF细胞 
Leydig细胞系相关产品：CTSC-3细胞、BPH-1细胞、MC3T3-L1细胞 
LICR-HN-6细胞系相关产品：MB468细胞、38C-13细胞、Roswell Park Memorial Institute 6666细胞 
LICR-HN-6细胞系相关产品：MB468细胞、38C-13细胞、Roswell Park Memorial Institute 6666细胞 
WEHI3B细胞系相关产品：OS-732细胞、HepG2/C3A细胞、Madison细胞 
COLO 320 DM细胞系相关产品：HT 1197.T细胞、WPMY1细胞、SK-MEL-2-LUC细胞 
Ku812F细胞系相关产品：159PT细胞、GC-2细胞、CD-18细胞 
3T3-J2 小鼠胚胎成纤维细胞系
Epstein-Barr-2细胞系相关产品：HK2细胞、MLTC-1细胞、SKMES细胞 
Intestinal Porcine Epithelial Cell line-1细胞系相关产品：OVCAR-5细胞、A-101D细胞、FCCH1018细胞 
HTR-8/SV-neo细胞系相关产品：T24细胞、Doubling time: ~50 hours (ATCC).细胞、H1666_DA细胞 
NCI H508细胞系相关产品：NB9细胞、NK-92.05细胞、J45.01细胞 
8402细胞系相关产品：VMCUB1细胞、BMDC细胞、WM 2664细胞 
Walker-Ca.256细胞系相关产品：Tu 177细胞、WSU-DLCL(2)细胞、KNS42细胞 
CT26.WT细胞系相关产品：NCIH1341细胞、SCC-25细胞、SN-12C细胞 
HN6细胞系相关产品：HPB-ALL细胞、NOZ细胞、MOPC细胞 
STO细胞系相关产品：NCIH1092细胞、WEHI3B细胞、H-146细胞 
A-2058细胞系相关产品：U-2-OS细胞、MC-3T3细胞、PK15细胞 
CL11细胞系相关产品：HuH6细胞、P3-X63.Ag8.653细胞、HL7702细胞 
SF763细胞系相关产品：H510A细胞、MONO-MAC 6细胞、PBMC细胞 
Renal Carcinoma细胞系相关产品：LNCaP subline C4-2细胞、H9c2细胞、Hs 888.T细胞 
EST81细胞系相关产品：HCC-1954细胞、WB-F344细胞、OVCAR.3细胞 
SW954细胞系相关产品：KNS81细胞、MIA-Pa-Ca-2细胞、HCC15细胞 
CCC-HIE-2细胞系相关产品：HEK293EBNA细胞、293 H细胞、Gejiu Lung Carcinoma-82细胞 
SV40-MES13细胞系相关产品：KRC Y细胞、G519细胞、149 PT细胞 
C3H/10T1/2 CL8细胞系相关产品：MT4细胞、NUGC3细胞、MCF.10A细胞 
SCC-7细胞系相关产品：NCIH2052细胞、COLO 320 DM细胞、SNG-M细胞 
MDCK.2细胞系相关产品：Michigan Cancer Foundation-10A细胞、Shadyside Hospital Pittsburgh-77细胞、Hep G2-Luc细胞 
SNT-8细胞系相关产品：Vero E-6细胞、HPAEC细胞、HET-1A细胞 
EC-9706细胞系相关产品：LTEP-s细胞、BaF3细胞、G292细胞 
SNU-423细胞系相关产品：CNE-2细胞、SRA01/04 (HLE)细胞、CTLA4 Ig-24细胞 
ST486细胞系相关产品：GalK1细胞、BNCL-2细胞、CHP100细胞 
HEC-1-B细胞系相关产品：QBC939细胞、BrCL15细胞、KP-4细胞 
NCI H548细胞系相关产品：HCC 38细胞、MDAMB175VII细胞、AQ-Mel细胞 
OCI-Ly 3细胞系相关产品：32Dc3细胞、LA 4细胞、SR-786细胞 
VCaP细胞系相关产品：Hs274T细胞、LNCaP-C4-2细胞、SKOV-3细胞 
LAC细胞系相关产品：SGC 7901细胞、CFSC-8B细胞、Panc 5.04细胞 
H7721细胞系相关产品：OCI-Ly 18细胞、NCIH2073细胞、PY8119细胞 
HOS TE 85细胞系相关产品：293AD细胞、LI7细胞、MOVAS-1细胞 
JAR细胞系相关产品：SkChA-1细胞、BL1339细胞、HEL-92.1.7细胞 
HCC0070细胞系相关产品：NCIH1395细胞、TO 175.T细胞、DHL-16细胞 
P3-X63-Ag8.653细胞系相关产品：IMR 32细胞、SMMC 7721细胞、HCC-15细胞 
ACCM细胞系相关产品：Rat Skin 1细胞、143B细胞、SW626细胞 
CLONE M3细胞系相关产品：P3-X63-Ag 8.653细胞、A3细胞、HPAF-II细胞 
NCIH358细胞系相关产品：NOMO-1细胞、Giant Cell Tumor细胞、COS-1细胞 
FM-88细胞系相关产品：KM H-2细胞、MC26细胞、N1E115细胞 
T2 (174 x CEM.T2)细胞系相关产品：Bowes melanoma cells细胞、NCIH2347细胞、GP2d细胞 
RL-952细胞系相关产品：B16细胞、BEND细胞、TE3A细胞 
HuNS1细胞系相关产品：HHFK细胞、MPASMC细胞、ACHN细胞 
3T3-J2 小鼠胚胎成纤维细胞系
OVCAR-4细胞系相关产品：WML2细胞、MBT2细胞、H-2591细胞 
OCI-LY-10细胞系相关产品：Tb1Lu细胞、OAW 42细胞、Tn-5细胞 
AU-Mel细胞系相关产品：RKO-AS45-1细胞、B 95-8细胞、NCI-157细胞 
NTERA2-D1细胞系相关产品：TGBC11TKB细胞、H378细胞、BT-549细胞 
SCC-9细胞系相关产品：Ls-174-T细胞、TU 686细胞、A2780/CP70细胞 
3T6 Swiss Albino细胞系相关产品：D283-MED细胞、NCI H23细胞、TI-73细胞 
T2(174 x CEM.T2)细胞系相关产品：PANC.1细胞、H295R细胞、CNE2Z细胞 
EBC-1/original细胞系相关产品：Caki-2细胞、ACC-3细胞、AN-3细胞 
HCC-366细胞系相关产品：NCIH2591细胞、A 549细胞、LC-1细胞 
GM2131细胞系相关产品：RT-112细胞、RINm5F细胞、H-719细胞 
BEL7402细胞系相关产品：Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS细胞、NF639细胞、CCK-81细胞 
HCoEpiC细胞系相关产品：P36细胞、HSF细胞、PZ-HPV-7细胞 
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