背景及概述[1]
8-羟基松脂醇为水曲柳提取物之一。水曲柳(FraxinusmandschuricaRupr)为木犀科(Oleaceae)梣属(Fraxinus)植物的一种,分布于朝鲜、日本、俄罗斯以及中国大陆等。在中国,水曲柳主要分布于中国东北黑龙江的大兴安岭东部和小兴安岭、吉林的长白山等地。生长于海拔700米至2100米的地区,一般生长在山坡疏林中或河谷平缓山地。水曲柳一直作为优质木材,有广泛的用途,比如制作家具、运动器材、及农具手柄等生活用途。其树皮具有抗炎镇痛之功效,常作秦皮的替代品使用。《新华本草纲要》记载了它的皮味苦,性寒有,具有清热燥湿,清肝明目的功能,用于肠炎、痢疾、月经不调、白带、慢性支气管炎、急性结膜炎、疟疾的治疗。
制备[1]
8-羟基松脂醇提取分离方法,包括以下步骤:
S1,将水曲柳种子30kg制成粉末,用相当于3倍粉末重量的体积浓度为90%的乙醇溶液渗漏提取三次,每次浸泡48h后再开始渗漏,合并三次提取液,45℃、-0.1MPa条件下减压浓缩,得浸膏1.441kg;
S2,将S1中浸膏用适量水分散溶解,依次分别用二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇萃取,对各萃取剂层在45℃、-0.1MPa条件下减压浓缩,得二氯甲烷萃取混合物(0.388kg)、乙酸乙酯萃取混合物(0.089kg)、正丁醇萃取混合物(0.433kg)还有水层部分(0.485kg)。
S3,将二氯甲烷萃取混合物经100~200目硅胶柱层析分离,石油醚-乙酸乙酯溶液(40:1~1:1)梯度洗脱,得7个馏分:Fr1(石油醚-乙酸乙酯(40:1~35:1))、Fr2(石油醚-乙酸乙酯(35:1~25:1))、Fr3(石油醚-乙酸乙酯(25:1~20:1))、Fr4(石油醚-乙酸乙酯(20:1~15:1))、Fr5(石油醚-乙酸乙酯(15:1~10:1))、Fr6(石油醚-乙酸乙酯(10:1~2:1))、Fr7(石油醚-乙酸乙酯(2:1~1:1)),各馏分分别用300~400目硅胶柱层析分离,用石油醚-乙酸乙酯溶液(30:1~1:1)梯度洗脱,在Fr4中分离得到了式m-1(20mg,洗脱液体积比16:1)化合物,在Fr5中分离得到式m-3(8mg,洗脱液体积比10:1),Fr6中分离得到了式M-6-3(18mg,洗脱液体积比12:1)、M-6-89(10mg,洗脱液体积比9:1)、M-6-2-1(13mg,洗脱液体积比8:1)、m-m-6-2(16mg,洗脱液体积比15:1),Fr7中分离得到了式m-2(3g,洗脱液体积比14:1)、M-6-2-2(20mg,洗脱液体积比6:1),共8种化合物;其中m-2为8-羟基松脂醇。
(m-2):H-NMR(400MHz,DMSO-d):δ7.05(1H,d,J=2.1Hz,2-H),6.78(1H,d,J=2.8Hz,5-H),6.85(1H,dd,J=2.1,2.1Hz,6-H),4.67(1H,s,7-H),4.03(1H,d,J=9.3Hz,9-H),3.85(1H,d,J=5.9Hz,9-H),3.86(3H,s,3-Ome,3′-OMe),7.05(1H,d,J=2.7Hz,2′-H),6.79(1H,d,J=2.7Hz,5′-H),6.87(1H,dd,J=2.0,2.0Hz,6′-H),4.84(1H,s,7′-H),3.04(1H,s,8′-H),4.46(1H,dd,J=8.6,8.7Hz,9′-H),3.76(1H,dd,J=6.2,8.7Hz,9′-H)。
C-NMR(400MHz,DMSO-d6):129.1(C-1),112.7(C-2),149.1(C-3),147.4(C-4),116.1(C-5),121.6(C-6),89.3(C-7),92.8(C-8),76.1(C-9),56.4(C-3-OMe),133.6(C-1′),111.3(C-2′),148.7(C-3′),147.5(C-4′),115.7(C-5′),120.5(C-6′),87.8(C-7′),62.4(C-8′),72.0(C-9′),56.4(C-3′-OMe)。
主要参考资料
[1] CN201810994041.5 一种水曲柳种子提取物、提取分离方法及其应用