背景[1-3]
吉姆萨染液用于组织细胞学染色从而鉴别骨髓和其他造血组织（淋巴结）中的白细胞，还可用于鉴定某些微生物。吉姆萨染液为天青色素、伊红、次甲蓝的混合物，吉姆萨染色液(Giemsa stain，又称姬姆萨染色液)对胞浆着色力较强，能较好的显示胞浆的嗜碱性程度，特别是对血液和骨髓细胞中的嗜天青、嗜酸性、嗜碱性颗粒，着色清晰，但是对胞核着色偏深,核结构显色不佳，故吉姆萨染色常与瑞氏染色联合使用。
嗜酸性颗粒为碱性蛋白质，与酸性染料伊红结合，染粉红色，称为嗜酸性物质；细胞核蛋白和淋巴细胞胞浆为酸性，与碱性染料美蓝或天青结合，染紫蓝色，称为嗜碱性物质；中性颗粒呈等电状态与伊红和美蓝均可结合，染淡紫色，称为中性物质。
血细胞染色：吉姆萨染料中含有美蓝和伊红两种染料，前者为碱性，后者为酸性，它们与细胞内的各种物质具有不同的亲和力，从而使其呈现出不同的色调，以便于辨认。染色体染色：也称G显带，染色体上富舍A-T碱基对的DNA和组蛋白结合紧密，胰酶处理时不易高度抽提，和染料亲和力较强，呈深带；而富含G-C碱基对的区段结合的蛋白质被胰酶抽提，和染料亲和力降低，呈浅带。
配置:
以1g的姬姆色素染料加入66ml甘油，混匀，60度保温溶解两小时，再加入66ml甲醇混匀，即配成姬姆色素原液，此原液用前用PBS（6.8）稀释十倍左右就可以使用（此为姬姆萨工作液）。工作液可保存一个月左右。
染色步骤:
根据需要量，配好工作液，此工作液常温可保存两周。按常规方法制备血涂片，待血膜干后,用甲醇固定2～3分钟；将血涂片或骨髓涂片放置染色架上，滴加稀释好的染色液，使覆盖全部血膜，室温染色15～30分钟。用自来水缓慢从玻片一端冲洗(注意勿先倒去染液或直接对血膜冲洗)，凉干后镜检。
应用[4][5]
用于虾肝肠胞虫病理学检测技术的建立
虾肝肠胞虫(Enterocytozoon hepatopenaei,EHP)是一种可感染多种真核生物的专性细胞内寄生虫。该病原最早于2004年作为一种未知微孢子虫在泰国生长缓慢的斑节对虾肝胰腺小管上皮细胞内被发现,2009年Tourtip等也从斑节对虾肝胰腺发现了这种微孢子虫,在宿主细胞的细胞质中能观察到处于不同时期的虫体,SSU rRNA序列同源性比对表明,该微孢子虫与比氏肠胞虫的同源性为84%。
综合其独特的超微结构,寄生细胞质位置及SSU rRNA序列同源性分析,将之命名为虾肝肠胞虫(Enterocytozoon hepatopenaei),并认定其为肠上皮细胞微孢子虫属的一个新种。
虾肝肠胞虫病理学检测技术,建立了虾肝肠胞虫的孢子染色方法与荧光镜检法、组织内虾肝肠胞虫的特殊染色方法与荧光染色方法、原位杂交显色方法共两种孢子检测技术和三种组织中孢子染色检测技术,为EHP和白便综合征的快速临床诊断和进一步研究提供了技术支持和指导。
利用分离纯化到较纯的EHP孢子,选用24种常用染色液对EHP孢子进行染色,比较染色效果筛选染色液。24种染色液分别为吉姆萨染色液、考马斯亮蓝R250和G250、藏红T、结晶紫、维多亚蓝B、龙胆紫、亚甲基蓝、灿烂绿、甲基绿、孔雀石绿、胭脂红B、曙红Y水溶、台盼蓝、苯胺蓝、吡罗红G、中性红、甲基蓝、刚果红、固绿、苏丹III、甲基红、碱性品红、曙红Y醇溶。
实验结果表明,效果较好可用于孢子染色的染色液有吉姆萨染液、考马斯亮蓝G250、结晶紫、龙胆紫、亚甲基蓝、孔雀石绿、碱性品红、曙红Y醇溶8种染色液。
参考文献
[1]Decay of the glycolytic pathway and adaptation to intranuclear parasitism within Enterocytozoonidae microsporidia[J].Dominic Wiredu Boakye,Pattana Jaroenlak,Anuphap Prachumwat,Tom A.Williams,Kelly S.Bateman,Ornchuma Itsathitphaisarn,Kallaya Sritunyalucksana,Konrad H.Paszkiewicz,Karen A.Moore,Grant D.Stentiford,Bryony A.P.Williams.Environmental Microbiology.2017(5)
[2]Biochemical changes and tissue distribution of Enterocytozoon hepatopenaei(EHP)in naturally and experimentally EHP‐infected whiteleg shrimp,Litopenaeus vannamei(Boone,1931),in India[J].S Santhoshkumar,S Sivakumar,S Vimal,S Abdul Majeed,G Taju,P Haribabu,A Uma,A S Sahul Hameed.Journal of Fish Diseases.2017(4)
[3]Laboratory cohabitation challenge model for shrimp hepatopancreatic microsporidiosis(HPM)caused by Enterocytozoon hepatopenaei(EHP)[J].Paul Vinu Salachan,Pattana Jaroenlak,Siripong Thitamadee,Ornchuma Itsathitphaisarn,Kallaya Sritunyalucksana.BMC Veterinary Research.2016(1)
[4]Dense populations of the microsporidian Enterocytozoon hepatopenaei(EHP)in feces of Penaeus vannamei exhibiting white feces syndrome and pathways of their transmission to healthy shrimp[J].Kathy F.J.Tang,Jee Eun Han,Luis Fernando Aranguren,Brenda White-Noble,Margeaux M.Schmidt,Patharapol Piamsomboon,Eris Risdiana,Bambang Hanggono.Journal of Invertebrate Pathology.2016
[5]常晓晴.虾肝肠胞虫病理学检测技术的建立[D].上海海洋大学,2018.