背景[1-3]
HGC-27细胞专用培养基适用于HGC-27细胞各个时期的无菌培养。HGC-27细胞专用培养基包含HGC-27细胞生长所需的各种物质，不需要额外添加血清和其他成分可直接用于HGC-27细胞的体外培养。HGC-27细胞系源自未分化胃癌病人的淋巴结，能分泌黏液素。
临床上判断肿瘤的恶性程度是依据分化来讲的。高分化肿瘤，恶性程度低，预后较好；低分化肿瘤，恶性度高，预后较差；未分化肿瘤，恶性程度极高，预后最差。那么，癌症的高分化、中分化与低分化是怎么回事？所谓分化，简单地说就是瘤组织的成熟程度，恶性肿瘤或多或少都有向正常细胞分化的特点，瘤细胞分化越接近正常细胞，则越成熟，通常称为高分化，也称为Ⅰ级，如果瘤细胞分化太差，极不成熟，但仍保留某些来源组织的痕迹，则称为低分化，或称为Ⅲ级。界于两者之间的称为中分化，或称为Ⅱ级。但是，有时候肿瘤细胞分化太差，根本找不到来源组织的征象，则称为未分化。
液体培养基保存：
液体培养基应于4℃冰箱避光保存，实验前放入37℃预热。未加血清液体培养基有效期为12个月。液体培养基中的L-谷氨酰胺会随着储存时间的延长而慢慢分解。如果细胞生长不良，可以再添加适量L-谷氨酰胺。
应用[4][5]
用于LY294002对胃癌细胞HGC-27增殖和MMP-2、MMP-9表达的影响研究
通过PI3K特异性抑制剂LY294002作用于胃癌细胞HGC-27,抑制PI3K-Akt信号通路活化,探讨PI3K-Akt信号通路对胃癌细胞增殖和MMP-2、MMP-9表达的影响
方法:应用细胞培养技术培养HGC-27细胞,用不同浓度(0、10、20、40μM)的LY294002对细胞进行干预至不同的时间(20、40、60小时);CCK-8法检测细胞增殖;免疫细胞化学法检测p-Akt表达水平的改变;流式细胞仪(PI染色)检测细胞周期;半定量RT-PCR法检测MMP-2、MMP-9 mRNA的表达情况。
结果:LY294002作用于HGC-27细胞后:1.细胞增殖被抑制(P<0.05),并且在实验浓度和时间范围内,随着LY294002干预浓度(P<0.05)和干预时间(P<0.05)的延长,增殖抑制作用逐渐增强;2.p-Akt表达水平下降;3.细胞周期分析示S期细胞比率明显减少(P=0.008);4.MMP-9mRNA表达水平明显下降(P=0.000),而MMP-2mRNA表达水平未发生明显改变(P=0.118)。
结论:1.LY294002作用于HGC-27细胞后,能够抑制PI3K-Akt通路活化;2.LY294002能够抑制HGC-27细胞增殖和细胞周期的进展;3.PI3K-Akt信号通路参与调控HGC-27细胞中MMP-9的表达,通过抑制该信号通路的活化,能够抑制MMP-9的表达。
参考文献
[1]Neoplastic hepatocyte growth associated with cyclin D1 redistribution from the cytoplasm to the nucleus in mouse hepatocarcinogenesis[J].MasahiroYamamoto,SusumuTamakawa,MasumiYoshie,YujiYaginuma,KatsuhiroOgawa.Mol.Carcinog..2006(12)
[2]Activation of PI3K/Akt signaling and hormone resistance in breast cancer[J].Eriko Tokunaga,Yasue Kimura,Kojiro Mashino,Eiji Oki,Akemi Kataoka,Shinji Ohno,Masaru Morita,Yoshihiro Kakeji,Hideo Baba,Yoshihiko Maehara.Breast Cancer.2006(2)
[3]Erk Associates with and Primes GSK-3βfor Its Inactivation Resulting in Upregulation ofβ-Catenin[J].Qingqing Ding,Weiya Xia,Jaw-Ching Liu,Jer-Yen Yang,Dung-Fang Lee,Jiahong Xia,Geoffrey Bartholomeusz,Yan Li,Yong Pan,Zheng Li,Ralf C.Bargou,Jun Qin,Chien-Chen Lai,Fuu-Jen Tsai,Chang-Hai Tsai,Mien-Chie Hung.Molecular Cell.2005(2)
[4]Oncogenic K-ras Stimulates Wnt Signaling in Colon Cancer Through Inhibition of GSK-3β[J].Jingnan Li,Yusuke Mizukami,Xiaobo Zhang,Won-Seok Jo,Daniel C.Chung.Gastroenterology.2005(7)
[5]熊杰.LY294002对胃癌细胞HGC-27增殖和MMP-2、MMP-9表达的影响[D].福建医科大学,2008.