​潮霉素B的使用方法

2022/4/12 10:36:07

潮霉素B(Hygromycin B) 是一种由吸水链霉菌(Streptomyces hygroscopicus)产生的抗生素,是氨基糖苷类抗生素之一,为微黄褐色粉末。潮霉素B可通过抑制细菌、真菌和一些高等真核生物细胞内的蛋白质生物合成来杀死这些生物。潮霉素B可溶于甲醇、乙醇和水,但在乙醚、氯仿或苯中都几乎不溶。

Hygromycin B.jpg

作用机理

潮霉素B与大多数氨基糖苷类抗生素一样,通过抑制蛋白质的合成来阻止微生物生长。它可以稳定核糖体大亚基上的tRNA结合位点,导致空载tRNA不能脱离核糖体,抑制了翻译的继续进行,潮霉素的抑制作用对于原核细胞与真核细胞的核糖体都是有效的。

在研究中的用途

实验室中使用的瓶装潮霉素B

在实验室中,潮霉素B被用于选择和保持拥有潮霉素抗性基因的原核和真核细胞。潮霉素抗性基因编码一个激酶(潮霉素激酶),它通过磷酸化潮霉素B使其失活。自从潮霉素的抗性基因被发现以来,潮霉素B就被用来作为转基因实验中的标准筛选方法。目前植物组织培养中常用潮霉素B进行筛选。

使用方法 

1. 储存液(100µg/µl) 吉玛基因提供经0.22μm 滤器过滤的潮霉素B 储存液。 2. 常用筛选浓度 潮霉素B 用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型,培养基,生长条件和细胞代谢率而变 化,推荐使用浓度为50-1000μg/ml。对于次使用的实验体系建议通过预实验筛选出最小致死浓度。

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