背景及概述[1][2]
芹菜中含量较高的黄酮类化合物芹菜甙,是以芹菜素为苷元的黄酮苷,溶于热水及热乙醇,几乎不溶于乙醚。芹菜是一种两年生的伞形科草本植物,原产于地中海沿岸,在我国有着悠久的栽培历史。芹菜中黄酮类化合物是优良的活性氧清除剂和脂质抗氧化剂,具有多种生物活性, 如抗氧化、抗菌、抗病毒、抗癌、抗衰老等作用。
制备[1]
现已有相关分离纯化芹菜甙的专利及文献报道如:方法一,钱少华(专利申请号: 99116604.3)通过重结晶方式从石崖茶中提取一种芹菜素和芹菜甙混合物;方法二,王克勤 [芹菜黄酮类物质的分离纯化与药理功能研究,长沙:湖南农业大学,2009]将芹菜醇提物先 用XDA-1树脂进行分离,再用聚酰胺树脂进行分离,然后用Sephadex LH-20柱色谱以及 HSCCC(高速逆流色谱分离)进行分离,最终得到3种成分,其中一种黄酮类物质为芹菜甙。上述方法主要是对芹菜甙分离纯化,方法一中利用重结晶方法,产量高,成本低,但是很难得到高纯度芹菜甙,方法二中结合大孔树脂和聚酰胺树脂,以及多种分离手段。分离过程步骤较为繁琐,而且生产周期较长,一次很难大量生产,并且生产所需成本较高。芹菜苷具有多种生物活性,在抗氧化、抗菌、抗病毒、抗癌、抗衰老、降低心血管疾病等方面发挥重要作用,但是高纯度的芹菜甙价格高,所以需要找到一种快速、高效的提取方法。
CN201610363939.3提供一种从芹菜中提取芹菜甙的高效、简便的方法。包括以下步骤:
(1)乙醇浸提
取新鲜芹菜,洗净除杂,干燥后粉碎,用一定体积浓度乙醇溶液放于反应釜中浸 提,所述芹菜粉末与乙醇溶液的料液比为1:10~20(g/mL),提取液经过滤,减压浓缩至棕黑 色浸膏,备用;
(2)聚酰胺树脂柱层析初步分离
将棕黑色浸膏用纯水溶解,样品上聚酰胺树脂并充分吸附,先用纯水以1.0BV/h~2.0BV/h流速水洗,水洗4BV~6BV;再用一定体积浓度的乙醇溶液以1.0BV/h~2.0BV/h等度 洗脱,醇洗4BV~6BV,收集该部分洗脱液,减压浓缩得黄棕色浸膏。
(3)制备型高效液相精制
将黄棕色浸膏溶于一定体积浓度的甲醇溶液中,用制备型高效液相色谱仪进一步 分离纯化,色谱柱为C18,流动相为甲醇和0.1%甲酸水,控制一定流速进行洗脱,检测波长 为267nm和333nm,收集目标组分馏分,将得到的馏分减压浓缩、冷冻干燥、研磨过筛,得淡黄色粉末,即得到所要分离的单体化合物。
本发明提供一种分离芹菜中芹菜甙的方法,首先采用聚酰胺初步分离,再用制备型高效液相色谱进行精制,所得目标化合物纯度高。除此之外,还具有以下优势:
(1)提取液经过聚酰胺树脂初步分离,可以去除提取液中大部分杂质,简化混合物组成,降低分离难度;并且还能减少制备次数,保护制备型高效液相色谱柱不被污染,从某种意义上延长了色谱柱寿命。只选择一种树脂分离,使得工艺简单,操作方便。
(2)采用制备型高效液相色谱法分离纯化得到芹菜甙,具有样品纯度高,操作简 单,分离效率高,工艺周期短等优点。
(3)提取,纯化过程中没有使用对环境和人体危害大的有机溶剂,操作中所用醇类 物质可以回收使用并且聚酰胺树脂再生后可以重复使用多次,降低对环境污染,节约成本,绿色环保。
(4)优化了柱层析的条件(洗脱液的组成,洗脱流速,洗脱体积),提高纯化目标物 质的效率。
(5)优化了制备型高效液相色谱的条件(洗脱流速,洗脱液的组成),提高纯化芹菜甙的效率,节约成本,适合实验室及工业化规模生产。
图1是本发明方法流程图。
应用[2]
CN201410542486.1公开了一种果香味电子烟油。由下列成分组成:烟草提取液、橘皮苷、苹果醋、芹菜甙、单硬脂酸甘油酯、余量丙二醇或聚乙二醇。
所述的一种果香味电子烟油各成分重量份数如下:烟草提取液7-15%、橘皮苷4-10%、苹果醋1-4%、芹菜甙4-10%、单硬脂酸甘油酯1-20%、余量丙二醇或聚乙二醇。制备方法如下:先取烟叶将其切碎,用水为溶剂加热提取,经热过滤和冷藏沉降过滤得到 烟草提取液,依次加入橘皮苷、苹果醋、芹菜甙,搅拌均匀后加入单硬脂酸甘 油酯、余量丙二醇或聚乙二醇即得电子烟油产品。本发明的有益效果:本发明使橘皮、苹果、芹菜这些香气成分进入电子烟油,赋予电子烟油烟草特征香气,更好的掩盖了雾化剂带来的刺激性,更能接近消费者对真烟的抽吸感受。
主要参考资料
[1] CN201610363939.3 一种从芹菜中分离纯化芹菜甙的方法
[2] CN201410542486.1 一种果香味电子烟油