背景及概述
赤藓红B是一种阴离子型的染料,实验发现盐酸甲氯芬酯能与赤藓红 B 在pH2.6 的 Clark-Lubs 缓冲溶液发生相互作用形成离子缔合物而发生显色反应,据此建立了赤藓红B分光光度法测定盐酸甲氯芬酯的新方法,并成功地应用于盐酸甲氯芬酯制剂分析[1]。
图1 赤藓红B性状图
实验操作
准确吸取适量含盐酸甲氯芬酯的溶液置于10 mL比色管中,依次分别准确加入3.00 mL0.5 mmol/L赤藓红B溶液和2.0mLpH2.6的Clark-Lubs缓冲溶液,加蒸馏水定容,摇匀。同时配制试剂空白溶液,并以试剂空白溶液为参比,在 554 nm 测定溶液的吸光度A。
赤藓红B的吸收波长为 520nm,而赤藓红B与盐酸甲氯芬酯形成的离子缔合物的吸收波长在554 nm 处。选择 554m 作为测定波长。
考察了pH 值对体系的影响,结果发现,当pH 在2.2~3.0时体系在554nm处吸光度且稳定而当pH大于3.0或小于2.2时吸光度均下降。故以后的测试中选用 pH26 Clark-Lubs 缓冲溶液,经实验确定其用最为2.0mL。对于50ug盐酸甲氯芬酯来说,赤藓红B溶液用量在2.50-4.00mL范围内体系的吸光度:用量太少不足以反应完全,用量太大不利于反应进行而使吸光度减弱。故选用0.5 mmol/L赤藓红B溶波3.0 mL。该体系在20~30°C室温条件下吸光度保持稳定。
实验条件下对于50ug盐酸甲氯芬酯,共存组分的允许加入量(以mg计,相对偏差小于5%)分别是葡萄糖(4),D果域、麦芽糖(5)、蔗糖(7),乳糖(10),淀粉(20)。这说明甲氯芬酯制剂中可能存在的这些成分对于甲氯芬酯的测定无影响。取市售苏瑞索(注射剂用盐酸甲氯芬酯) 10瓶或取10粒市售健脑素(盐酸甲氯芬酯)胶囊,顷尽内容物。混匀,准确称重后,准确称取总质量的十分之一,加少量水溶解,用水定溶至IL(浓度为100 mg/L),得样品处理溶液。检测结果与中国药典方法所得结果一致。
参考文献
[1] 贺凌云,夏宏鹏,吴建平 分析试验室,2007,26(9):74-76