细菌发酵是疫苗生产的关键工艺,而培养基是影响细菌生产浓度和产糖和产蛋白的关键因素。常见的细菌性疫苗有肺炎疫苗,流脑疫苗,百白破疫苗。对应的细菌是肺炎球菌,脑膜炎球菌,白喉杆菌,破伤风杆菌。由于这类生长对营养物质要求较高,除了基础的长链蛋白胨之外,还经常辅以多氨基酸组分的水解物。而通过完全水解的蛋白胨,酸水解酪蛋白对于这些所有细菌培养都是有帮助和生长的。可以说是妥妥的全能战士。
什么是酸水解?
蛋白胨,也称为蛋白质水解产物,是源自植物、酵母或动物蛋白质部分水解的水溶性产物。可以使用强酸、强碱或蛋白水解酶来完成蛋白质水解过程,这些强酸、强碱或蛋白水解酶会产生复杂的、营养丰富的最终产品,易于细胞使用。酸水解一般通过Muller和Miller的方法,在浓盐酸下,105-110℃,20小时后形成完全水解的小分子氨基酸。
酸水解蛋白胨的生产流程
尽管大多数蛋白胨具有相似的组分基团,但水解过程和起始蛋白质材料会产生独特的产物组成,这是由相同原料制成的多种产物存在的基础。通常在高温下进行的酸或碱水解过程会攻击所有肽键,并破坏某些氨基酸,同时将其他氨基酸转化为酸性形式。不管水解方法如何,大多数蛋白胨都是使用类似于图所示的流程生产的。蛋白质和去离子水结合在大容量水解容器中形成蛋白质材料的浓悬浮液,在整个水解过程中不断搅拌。酸水解时,调节温度并将消化材料添加到容器中。所需的水解程度取决于酶的量、消化时间以及 ph 值和温度的控制。一旦达到预定的蛋白质消解程度,就必须停止活性。将悬浮液加热以灭活酶或中和以灭活酸或碱。然后将蛋白质浆液离心和/或过滤以除去不溶性物质并澄清和浓缩产物。真空蒸发可用于快速浓缩。然后可以对该蛋白胨糖浆进行进一步处理以调节pH,进行巴氏灭菌和过滤。
蛋白胨生产的基本步骤
潜在应用
酸水解蛋白胨拟是一种营养补充物,用于不受高盐含量影响的维生素化验、灵敏度测试以及其他实验室培养基和微生物发酵过程。Bacto酸水解酪蛋白由于酪蛋白几乎完全水解,其氯化钠和铁含量很低,因此成为许多培养基配方的补充物。推荐将其作为纯氨基酸的替代物,用于成分明确的乳酸杆菌的生长培养基,从而简化配制过程。此外,它已与 Bacto 胰蛋白胨一起成功用于营养研究,以确定细菌对多肽或氨基酸的生长需求。它作为实验室培养基的一个组分也起到很好的作用。它已在 TYI-S-33 培养基(用于寄生虫组织内阿米巴)和 LCM 培养基(用于线虫-细菌复合体的生长)等多种应用中使用。