癸酸钠抗性菌株的筛选助力产达托霉素的发酵

2024/1/23 8:41:36

背景技术

癸酸钠又名十烷酸钠盐,CAS号:1002-62-6,分子式:C10H19NaO2,分子量:194.25,熔点:240°C (dec.),储存条件:2-8°C,蒸汽压:0.00355mmHg at 25°C,溶解度:在水中的溶解度0.1g/mL,澄清,无色,是白色至浅黄色至浅橙色结晶粉末。

癸酸钠

为提高达托霉素产生菌玫瑰孢链霉菌的发酵能力,通过筛选癸酸钠抗性菌株,优化其发酵瓶补加正癸酸的方法,提高达托霉素的摇瓶效价值。达托霉素是一种环状脂肽类抗生素,用于治疗革兰氏阳性感染,达托霉素由玫瑰孢链霉菌发酵产生,发酵代谢产物中活性最强的为A21978C,是一组包含不同长度脂酰侧链的环脂肽复合物,为达托霉素的母核,是由13个氨基酸组成的环十肽结构。A21978C含有许多组分,结构虽然相似,但抑菌活性和细胞毒性存在很大差异,其中达托霉素(A21978C)的治疗指数最高,在发酵过程中加入外源性前体癸酸,直接参与达托霉素的合成,可提高达托霉素在A21978C复合物中的比重。

方法与结果

癸酸钠抗性菌株筛选

当癸酸钠浓度小于0.4g/L时,菌体生长良好,随着癸酸钠浓度的增加,菌体生长情况变差,当癸酸钠浓度为1.2g/L时,对应的抗性平板内没有菌落生长,癸酸钠的最小抑制浓度为1.2g/L。同时观察到抗性平板上的菌落外观随着癸酸钠浓度的增加,由玫红色渐变为白色,生长速度随之变慢,菌落变小,菌落数随着浓度的增加变少。

选取癸酸钠浓度为0.2g/L及以上浓度的单菌落共568个进行摇瓶初筛验证,结果显示有32个单菌落效价值普遍高于对照组,对32个单菌落进行复筛摇瓶验证,摇瓶效价值最高为43.4mg/L,对应菌落号为TR21-29,作为补加正癸酸试验用菌株。

参考文献

[1]顾晶,石彦鹏,牛春,等. 癸酸钠抗性菌株产达托霉素的发酵补料策略[J]. 黑龙江农业科学,2022(4):81-84. DOI:10.11942/j.issn1002-2767.2022.04.0081.

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