健那绿 B的染色原理与化学应用

2024/5/7 9:09:43 作者:流风

健那绿 B,英文名为Janus green B,常温常压下为绿色固体粉末,看可溶于水但是微溶于醇类有机溶剂。健那绿 B是一种专一性活体染色剂,它可用于线粒体活体染色,真菌和原虫染色,胚胎切片染色,以及用作氧化还原指示剂和铜的电镀添加剂,在生物化学,荧光染料等基础研究领域中有较好的应用。

健那绿 B的性状图

图1 健那绿 B的性状图

合成工艺

以4-氨基-N, N-二乙基苯胺或对苯二胺(含N, N-二乙基苯胺)为起始原料,在氧化剂存在的条件下,与苯胺环合得到亚甲基紫 3RAX。随后,上一步的反应产物经过重氮化和偶合反应可制备得到健那绿B。

染色原理

线粒体中细胞色素氧化酶使染料健那绿 B保持氧化状态(即有色状态)呈蓝绿色,而在周围的细胞质中染料健那绿 B被还原成为无色状态。根据这个染色原理,该物质可以鉴别有线粒体的细胞的死活,但是无法鉴别不含线粒体的细胞的死活。

配制方法

配制质量分数为1%健那绿 B染液:将0.5g健那绿 B溶解于50mL生理盐水中,加温到30-40摄氏使其充分溶解。

化学应用

健那绿 B是专一性线粒体的活细胞染料,可使线粒体呈现蓝绿色,而细胞质接近无色,以在高倍显微镜下观察线粒体分布和形态。这种染色方法使得研究者能够清晰地观察到线粒体在细胞中的分布和形态,有助于研究线粒体的结构和功能,以及与细胞生理学和疾病相关的问题。在高倍显微镜下观察健那绿 B染色的样本,可以提供关于线粒体数量、形态和结构的详细信息从而为细胞研究提供重要的研究指导。除了作为线粒体活细胞染料之外,它还被广泛用作结构的有效探针和生物大分子的功能探针。[1]

参考文献

[1] 吴艳. 健那绿B和铁苏木精对线粒体染色比较[J]. 中学生物学, 2015(1):2.

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健那绿B的制备 2020/04/24