背景[1-3]
NOD1抗体是一种针对NOD1（Nucleotide-Binding Oligomerization Domain Containing 1）蛋白的特异性抗体。NOD1蛋白是核苷酸结合寡聚结构域（NOD）样受体（NLR）家族的一员，是一种经典的抗细菌相关的胞内模式识别受体。它主要位于细胞质中，能够识别并结合细菌肽聚糖等病原相关分子模式（PAMPs），从而引发炎症反应，在天然免疫中发挥重要作用。
NOD1抗体可以检测内源水平的NOD1蛋白，其产生通常是通过免疫动物，利用合成对应的NOD1 C-末端周围的肽段来获得多克隆抗体。这些抗体经过纯化，如通过protein A和多肽亲和层析纯化，以确保其特异性和纯度。
除了抗细菌作用外，NOD1还被发现可以作为某些病毒的受体，如SVCV（ssRNA病毒）。NOD1能够识别并结合这些病毒，并通过增强MDA5（Melanoma Differentiation-Associated protein 5）与dsRNA（双链RNA）的结合，正调控MDA5-MAVS（Mitochondrial Antiviral-Signaling Protein）复合体的形成，从而诱导干扰素和干扰素刺激基因（ISGs）的产生，发挥抗病毒作用。
NOD1抗体
此外，NOD1蛋白的结构特征包括N端的CARD（Caspase Recruitment Domain）结构域、一个位于中心位置的NBD（Nucleotide Binding Domain）结构域，以及C端10个串联的富含亮氨酸重复序列（LRRS）。这些结构域分别参与凋亡信号、核苷酸结合和蛋白质-蛋白质相互作用等功能。
NOD1蛋白的突变与人类多种疾病有关，如哮喘、炎症性肠病、白塞病和结节病等。因此，NOD1抗体在研究这些疾病的发病机制、诊断和治疗方面具有重要的应用价值。同时，由于NOD1在天然免疫中的重要作用，NOD1抗体也被广泛应用于免疫学研究领域。
NOD1抗体的检测通常用于研究NOD1在免疫应答、炎症反应以及某些疾病中的作用。例如，NOD1基因突变与多种自身免疫性疾病（如类风湿关节炎、炎症性肠病等）的发生有关。通过检测患者组织或细胞中NOD1蛋白的表达水平，可以帮助研究人员了解NOD1在这些疾病中的作用机制。
NOD1抗体的检测方法主要有免疫组化（IHC）、免疫荧光（IF）和Western Blot等。这些方法可以用于检测组织样本或细胞样本中NOD1蛋白的表达水平。
应用[4][5]
NOD1抗体可以用于吸烟影响口腔黏膜上皮细胞防御功能及其机制的研究
吸烟对口腔黏膜上皮细胞防御功能的影响；吸烟可削弱呼吸道和胃肠道黏膜的防御功能,导致致病微生物的感染。然而,有关吸烟影响口腔黏膜防御功能的研究较少。本研究旨在观察吸烟对口腔黏膜上皮细胞防御功能的影响。
[方法]通过NOD1抗体免疫组化染色结合图像分析比较吸烟者与非吸烟者的正常口腔黏膜、口腔白斑上皮组织中核苷酸结合寡聚化结构域1(nucleotide-binding oligomerization domain 1,NODI)、人β防御素(human beta defensins,hBDs)和半胱氨酸-天冬氨酸特异性蛋白酶(cysteinyl aspartate-specific proteases,Caspase)-12表达水平的差异。联合应用HE染色、真菌嗜银染色和抗白色念珠菌抗体免疫组化染色,检测正常口腔黏膜和口腔白斑组织的白色念珠菌,比较非吸烟组和吸烟组之间阳性率的差异。
NOD1抗体[结果]吸烟组正常口腔黏膜和口腔白斑上皮组织中NOD1、hBD-1和hBD-3的表达水平均明显低于相应的非吸烟组,而吸烟组正常口腔黏膜和口腔白斑上皮组织中hBD-2和Caspase-12的表达水平均明显高于相应的非吸烟组。吸烟组正常口腔黏膜和口腔白斑白色念珠菌阳性率均明显高于相应的非吸烟组。
Caspase-12在香烟烟雾提取物影响口腔黏膜上皮细胞NOD1表达水平中的调控作用[目的]NOD1是重要的胞内模式识别受体,在口腔黏膜防御功能和细胞稳态维持中起重要作用。以往研究表明,CSE通过调控NOD1通路影响其下游hBDs的表达和分泌。本研究旨在观察CSE对口腔黏膜上皮细胞NOD1表达的影响,探讨Caspase-12在CSE影响口腔黏膜上皮细胞NOD1表达水平中的调控作用。
[方法]免疫印记法检测CSE处理对NOD1表达水平的影响。观察Caspase-12表达沉默对NOD1表达水平的影响。采用NOD1抗体免疫共沉淀和免疫荧光双染法研究Caspase-12与NOD1的相互作用关系。在CSE处理细胞后,采用免疫印记法检测NOD1的表达水平,比较Caspase-12 siRNA组和对照siRNA组之间的差异。[结果]CSE明显抑制了NOD1的蛋白表达。Caspase-12表达沉默明显上调了NOD1的蛋白表达水平。Caspase-12与NOD共定位表达,存在蛋白相互作用。Caspase-12表达沉默部分逆转了CSE对NOD1蛋白表达的抑制作用。
参考文献
[1]Caspases as the Key Effectors of Inflammatory Responses Against Bacterial Infection[J].Ryosuke Uchiyama;;Hiroko Tsutsui.Archivum Immunologiae et Therapiae Experimentalis,2015(1)
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[3]Cigarette smoke alters IL-33 expression and release in airway epithelial cells[J].Elisabetta Pace;;Caterina Di Sano;;Serafina Sciarrino;;Valeria Scafidi;;Maria Ferraro;;Giuseppina Chiappara;;Liboria Siena;;Sebastiano Gangemi;;Patrizio Vitulo;;Antonino Giarratano;;Mark Gjomarkaj.BBA-Molecular Basis of Disease,2014
[4]Gingival crevicular fluid levels of human beta‐defensin‐2 and cathelicidin in smoker and non‐smoker patients:a cross‐sectional study[J].A.S.Ertugrul;;H.Sahin;;A.Dikilitas;;N.Z.Alpaslan;;A.Bozo?lan;;Y.Tekin.J Periodont Res,2014(3)
[5]王翔.吸烟影响口腔黏膜上皮细胞防御功能及其机制的研究[D].南京大学,2016.