背景[1-6]
Epothilone B(Microtubule Assosiated抑制剂)是一种紫杉醇样microtubule稳定剂,类似紫杉醇的抗癌常规化合物,诱导微管蛋白聚合EC0.01为1.8μM。Epothilone B通过干扰微管蛋白来阻止癌细胞的分裂,但在早期试验中,埃博霉素比紫杉烷具有更好的疗效和更轻微的副作用。
Epothilone B比Epothilone A活性高。Epothilone B的EC0.01为1.8nM。Epothilone B作用于HCT116细胞,有效抑制细胞增殖,IC50为0.8nM。Epothilone B作用于KB3-1、KBV-1、Hela和Hs578T细胞,诱导细胞周期停顿,且具有细胞毒性,IC50为3nM到92nM。Epothilone B与紫杉醇竞争性与微管结合,IC50为3.3μM。3.5nM Epothilone B作用于过量表达GFP-α-微管蛋白的MCF-7细胞,充分抑制微管动力学。
同时,Epothilone B诱导有丝分裂停滞,IC50为3.5nM。Epothilone B作用于多发性骨髓瘤(MM)细胞,包括RPMI 8226、U266、MM.1S、LR5和MR20,直接抑制细胞增殖,IC50为1nM到10nM。10nM Epothilone B也诱导细胞周期停滞和细胞凋亡。最新研究显示,5nM-100nM Epothilone B作用于卵巢癌Hey细胞,增强表面上皮细胞粘附抗原(EpCAM)。
Epothilone B按2.5mg/kg-4mg/kg剂量作用于携带RPMI 8226细胞移植瘤的小鼠,延长小鼠寿命且抑制肿瘤生长。Epothilone B作用于携带前列腺癌细胞,包括DU145和PC3的移植瘤小鼠,也抑制肿瘤生长。Epothilone类的主要机制是抑制微管功能。微管对细胞分裂至关重要,因此Epothilone可阻止细胞正常分裂。EpothiloneB在体外具有与紫杉醇相同的生物学效应在培养的细胞中。这是因为它们共享相同的结合位点,以及与微管的结合亲和力。
与紫杉醇一样,EpothiloneB与αβ-微管蛋白异二聚体亚基结合。一旦结合,αβ-微管蛋白解离的速率降低,从而稳定微管。此外,埃博霉素B还显示在不存在GTP的情况下诱导微管蛋白聚合成微管。这是由于整个细胞质中微管束的形成引起的。最后,EpothiloneB还导致细胞周期停滞在G2-M过渡期,从而导致细胞毒性并最终导致细胞凋亡。
Epothilone抑制纺锤体功能的能力通常归因于其抑制微管动力学;但最近的研究表明,动态抑制发生在低于阻断有丝分裂所需浓度的浓度。在较高的抗有丝分裂浓度下,紫杉醇似乎通过抑制微管从中心体分离而发挥作用,这一过程通常在有丝分裂期间被激活。Epothilone很可能也可以通过类似的机制起作用。
应用[7][8]
Epothilone B(Microtubule Assosiated抑制剂)可作为乳腺癌的化疗药物的研究:
基于抗微管类药物(埃博霉素B和紫杉类)为主的化疗方案,分别从耐药蛋白及miRNA两个方面入手,进行耐药相关因素的分析。目前认为,埃博霉素B的耐药与MRP7蛋白可能相关,所以我们选择单纯应用埃博霉素B的患者,进行体内MRP7的检测,以期发现MRP7与埃博霉素B药代及药效的相关性。二、含紫杉类化疗方案是多数乳腺癌需要采用的方案,而luminal A型乳腺癌中只有部分患者会对该化疗方案敏感,另一部分患者对该方案并不敏感。本研究希望能够通过血清miRNA检测,筛查出对含紫杉类化疗方案耐药的标记miRNAs,从而更好地指导luminal A型乳腺癌的临床化疗。
方法:埃博霉素B的Ⅰ期临床试验,采集患者不同时间点的血样,进行药代动力学检测。采用免疫组化及流式细胞仪检测MRP7蛋白在组织及外周血的表达,研究MRP7的表达与埃博霉素B药代动力学及疗效的关系。采用Winnonlin药代动力学统计软件拟合血药浓度-时间数据,求得注射用埃博霉素B在人体内的上述药代动力学参数,其中AUC采用梯形面积法估算。
运用置信区间法评价药动学参数与给药剂量的相关性。回归分析得到标准曲线回归方程。组间比较采用双变量spearman相关分析法。所有检验取双侧检验,检验水准为α=0.05,P<0.05表示有统计学意义。
参考文献
[1]Prognostic significance of MRP5 immunohistochemical expression in glioblastoma[J].George Alexiou,Anna Goussia,Spyridon Voulgaris,Andreas Fotopoulos,George Fotakopoulos,Antigoni Ntoulia,Anastasia Zikou,Perikles Tsekeris,Maria Argyropoulou,Athanasios Kyritsis.Cancer Chemotherapy and Pharmacology.2012(5)
[2]Association of ABCC10 polymorphisms with nevirapine plasma concentrations in the German Competence Network for HIV/AIDS[J].Pharmacogenetics and Genomics.2012(1)
[3]MicroRNA 92a-2*:A Biomarker Predictive for Chemoresistance and Prognostic for Survival in Patients with Small Cell Lung Cancer[J].Aarati R.Ranade,David Cherba,Shravan Sridhar,Patrick Richardson,Craig Webb,Anoor Paripati,Brad Bowles,Glen J.Weiss.Journal of Thoracic Oncology.2010(8)
[4]Implication of microRNAs in drug resistance for designing novel cancer therapy[J].Fazlul H.Sarkar,Yiwei Li,Zhiwei Wang,Dejuan Kong,Shadan Ali.Drug Resistance Updates.2010(3)
[5]miRNAs modulate the drug response of tumor cells[J].XueMei Wu,HuaSheng Xiao.Science in China Series C:Life Sciences.2009(9)
[6]Mechanisms of Chemotherapeutic Drug Resistance in Cancer Therapy—A Quick Review[J].Fu-Shing Liu.Taiwanese Journal of Obstetrics&Gynecology.2009(3)
[7]Involvement of miR-326 in chemotherapy resistance of breast cancer through modulating expression of multidrug resistance-associated protein 1[J].Zhongxing Liang,Hui Wu,James Xia,Yuhua Li,Yawei Zhang,Ke Huang,Nicholas Wagar,Younghyoun Yoon,Heidi T.Cho,Stefania Scala,Hyunsuk Shim.Biochemical Pharmacology.2009(6)
[8]李倩.乳腺癌化疗敏感性及预后因素研究[D].北京协和医学院,2013.