小鼠白三烯B4(LTB4)ELISA试剂盒的应用

2024/5/24 9:08:54 作者:云霄

背景[1-3]

小鼠白三烯B4(LTB4)ELISA试剂盒是一种用于定量检测小鼠样本中白三烯B4(LTB4)含量的实验工具。白三烯B4是一种与炎症反应有关的白三烯类物质,由响应炎症介质的白细胞产生,参与多种生理和病理过程。

ELISA试剂盒基于酶联免疫吸附法(ELISA)的原理,通过特定的抗体与样本中的白三烯B4结合,再利用酶标记的二抗进行识别和定量。这种试剂盒通常包括预包被的抗体、酶标记的二抗、标准品、洗涤液、底物溶液等,用户只需按照说明书进行操作,即可在较短时间内获得准确的定量结果。

小鼠白三烯B4(LTB4)ELISA试剂盒在科研实验中具有广泛的应用,可以用于研究小鼠在炎症、感染、过敏等病理过程中的生理机制,以及评估相关药物或治疗方法的效果。此外,该试剂盒还可以用于检测小鼠组织、细胞或体液中的白三烯B4含量,为相关疾病的诊断和治疗提供重要的参考依据。

小鼠白三烯B4(LTB4)ELISA试剂盒.png

小鼠白三烯B4(LTB4)ELISA试剂盒

小鼠白三烯B4(LTB4)ELISA试剂盒操作步骤:

实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。

1.加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。

2.弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜,37℃反应60分钟。

3.温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。

4.每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液)100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。

5.温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。

6.依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。

7.依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。

8.用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。在加终止液后立即进行检测。

在使用小鼠白三烯B4(LTB4)ELISA试剂盒时,需要注意以下事项:

严格按照试剂盒的说明书进行操作,确保实验的准确性和可靠性。

样本的收集和保存应遵循适当的方法,避免溶血、高血脂等因素对实验结果的影响。

试剂的保存和使用应遵守相应的规定,避免试剂的污染和失效。

实验过程中应注意安全,避免直接接触有毒或有害的试剂。

应用[4][5]

小鼠白三烯B4(LTB4)ELISA试剂盒可以用于DC固有胆碱能系统和LTB4-BLT2表达及其在JIA炎症反应中的作用研究

DC LTB4-BLT信号通路表达目的:探讨DC白三烯B4(leukotriene B4,LTB4)—白三烯B4受体(leukotriene B4 receptor,BLT)信号通路(LTB4-BLT包括LTB4-BLT1和LTB4-BLT2)存在状态。

方法:1.小鼠白三烯B4(LTB4)ELISA试剂盒检测幼稚、成熟DC培养上清中LTB4含量。2.免疫细胞化学方法和免疫荧光抗体方法检测成熟DC BLT2蛋白定位表3.RT-PCR方法检测幼稚和成熟DC BLT mRNA表达。

小鼠白三烯B4(LTB4)ELISA试剂盒结果:1.于2、4和6d(幼稚状态)和8d(LPS刺激后成熟状态),DC培养上清中LTB4含量分别为10.667±2.394pg/ml、7.089±1.810pg/ml、3.222±0.995pg/ml和14.217±3.396pg/ml,随DC分化进行,其培养上清中LTB4含量呈递减趋势。成熟DC较幼稚DC分泌LTB4含量明显增高(p<0.05)2.成熟DC胞膜和胞浆均表达BLT2,以胞桨特别是细胞器表达最强。3.RT—PCR显示成熟状态和稚状态DC均表达BLT1和BLT2 mRNA,且成熟DC表达水平较幼稚状态DC明显增强(p<0.05)。

参考文献

[1]Recruitment of dendritic cells to pathological niches in inflamed liver[J].Hiroyuki Yoneyama;Takafumi Ichida.Medical Molecular Morphology,2005(3)

[2]Expression of the cholinergic gene locus in the rat placenta[J].Uwe Pfeil;;Reinhard Vollerthun;;Wolfgang Kummer;;Katrin Susanne Lips.Histochemistry and Cell Biology,2004(2)

[3]Enzymes and receptors in the leukotriene cascade[J].J.Z.Haeggstr?m;A.Wetterholm.Cellular and Molecular Life Sciences,2002(5)

[4]Cytokine Levels in Serum of Patients with Juvenile Rheumatoid Arthritis[J].M.Y?lmaz;;S.G.Kendirli;;D.Alt?ntas;;G.Bing&0uml;;l;;B.Antmen.Clinical Rheumatology,2001(1)

[5]杨杨.DC固有胆碱能系统和LTB4-BLT2表达及其在JIA炎症反应中的作用研究[D].华中科技大学,2007.

免责申明 ChemicalBook平台所发布的新闻资讯只作为知识提供,仅供各位业内人士参考和交流,不对其精确性及完整性做出保证。您不应 以此取代自己的独立判断,因此任何信息所生之风险应自行承担,与ChemicalBook无关。如有侵权,请联系我们删除!
阅读量:49 0

欢迎您浏览更多关于小鼠白三烯B4(LTB4)ELISA试剂盒的相关新闻资讯信息