背景[1-3]
HINT1抗体是一种重组兔单克隆抗体，主要用于研究表观遗传学和核信号传导领域。该抗体针对的蛋白是HINT1（Histidine triad nucleotide-binding protein 1），这种蛋白有多种别名，包括HINT、PKCI1等。HINT1抗体的预测和实际带大小均为14kDa，这表明其相对分子质量约为14,000道尔顿。此抗体是通过亲和纯化方法制备的，未经任何偶联或修饰处理。
HINT1抗体是由兔产生的单克隆抗体，这意味着它是通过单一B细胞克隆产生的，能够特异性地识别并结合到HINT1蛋白上。该抗体的反应物种是人类，表明它被设计用来识别和结合人类HINT1蛋白。在实验室应用中，HINT1抗体可以用于西方印迹（WB）、免疫细胞化学/免疫荧光（ICC/IF）以及免疫沉淀（IP）等技术。
此外，HINT1抗体通常以液体形式提供，包含在50mM Tris-Glycine（pH 7.4）、0.15M NaCl、40%甘油、0.01%叠氮化钠和0.05%BSA的缓冲液中。这些成分有助于保持抗体的稳定性和活性。为了保持最佳性能，HINT1抗体应储存在-20°C的条件下，并避免反复冻融循环。运输时通常需要冷链条件，即使用蓝冰进行运输。
HINT1抗体
HINT1抗体是一种针对人类HINT1蛋白的重组兔单克隆抗体，具有特定的分子量、高纯度、未经修饰的特点。它在实验研究中有广泛的应用，尤其是在涉及表观遗传学和核信号传导的领域。了解HINT1抗体的这些基本特性对于正确选择和使用这种抗体至关重要。
应用[4][5]
HINT1抗体可以用于中等强度游泳运动对CUMS诱发抑郁中小鼠脑内HINT1表达的实验研究
利用慢性不可预知温和应激(chronic unpredictable mild stress,CUMS)方法诱发小鼠抑郁样行为产生,通过研究,希进一步明确HINT1在脑内的变化是否为运动减轻抑郁症状的一种可能机制,并对HINT1自身的作用进行一定的探索,从而为今后的临床治疗,药品研发提供相关的科研依据,以及为后续的相关实验打下基础。
研究方法:1.采用5周龄C57BL/6雄性小鼠31只,使用随机法分成正常组7只,游泳+CUMS组12只,CUMS组12只。对游泳+CUMS组和CUMS组小鼠进行7周CUMS刺激,其中游泳+CUMS组在刺激开始的第4周起,增加60min/d,每周5天,共4周的中等强度游泳运动干预。2.CUMS刺激结束后对各组小鼠开展行为学检测,通过糖水摄取率,强迫游泳静止时间,悬尾实验静止时间,旷场实验直立次数和周边区域运动时间等指标评定造模效果。3.对实验小鼠大脑自前向后连续冰冻切片,切片厚度40μm,采用HINT1抗体免疫组化二氨基联苯胺(diaminobenzidine,DAB)染色,光镜下观察小鼠大脑皮质、海马、纹状体区域内HINT1阳性细胞表达情况。4.对实验小鼠分离出海马,纹状体,皮质区域,提取蛋白组织,利用HINT1抗体蛋白免疫印迹(Western Blot)实验技术检测这些脑区中HINT1表达情况。
HINT1抗体研究结果:1.糖水摄取率中,正常组高于游泳+CUMS组(p<0.05),游泳+CUMS组高于CUMS组(p<0.01);强迫游泳静止时间中,正常组与游泳+CUMS组无显著差异(p>0.05),游泳+CUMS组高于CUMS组(p<0.01);悬尾静止时间中,正常组与游泳+CUMS组无显著差异(p>0.05),游泳+CUMS组高于CUMS组(p<0.05);旷场直立次数中,正常组与游泳+CUMS组无显著差异(p>0.05),游泳+CUMS组高于CUMS组(p<0.05);旷场周边区域活动时间中,正常组与游泳+CUMS组无显著差异(p>0.05),游泳+CUMS组高于CUMS组(p<0.01)。2.在小鼠大脑皮质中,通过HINT1抗体免疫组化方法发现,各组间HINT1阳性细胞表达存在显著性差异,正常组高于游泳+CUMS组和CUMS组(p<0.01),而游泳+CUMS组高于CUMS组(p<0.01)。
HINT1抗体免疫印迹结果同样发现类似变化,小鼠脑皮质中HINT1相对表达量正常组均高于游泳+CUMS组和CUMS组(p<0.01),而游泳+CUMS组高于CUMS组(p<0.01)。3.在小鼠大脑海马中,通过免疫组化方法发现各组间HINT1阳性细胞表达存在显著性差异,正常组高于游泳+CUMS组和CUMS组(p<0.01),而游泳+CUMS组高于CUMS组(p<0.01)。免疫印迹结果同样发现类似变化,小鼠大脑海马中的HINT1相对表达量正常组均高于游泳+CUMS组和CUMS组(p<0.05),而游泳+CUMS组高于CUMS组(p<0.05)。4.在小鼠纹状体中,通过HINT1抗体免疫组化方法发现,游泳+CUMS组与CUMS组的阳性细胞表达无统计学差异(p>0.05)。免疫印迹结果显示,各组纹状体中HINT1的相对表达量无统计学差异(p>0.05)。
参考文献
[1]Various exercise intensities differentially regulate GAP-43 and CAP-1 expression in the rat hippocampus[J].Masoud Rahmati;;Abdolreza Kazemi.Gene,2019
[2]Serotonin receptors in depression and anxiety:Insights from animal studies[J].ElżbietaŻmudzka;;Kinga Sałaciak;;Jacek Sapa;;Karolina Pytka.Life Sciences,2018
[3]rTMS ameliorated depressive-like behaviors by restoring HPA axis balance and prohibiting hippocampal neuron apoptosis in a rat model of depression[J].Lin Zhao;;Huicong Ren;;Shina Gu;;Xiaodan Li;;Cuihong Jiang;;Juan Li;;Mengmeng Zhang;;Junlin Mu;;Wenqiang Li;;Wensheng Wang;;Zhaohui Zhang;;Jinggui Song.Psychiatry Research,2018
[4]Effect of running exercise on the number of the neurons in the hippocampus of young transgenic APP/PS1 mice[J].Lin Jiang;;Jing Ma;;Yi Zhang;;Chun-ni Zhou;;Lei Zhang;;Feng-lei Chao;;Lin-mu Chen;;Rong Jiang;;Hong Wu;;Yong Tang.Brain Research,2018
[5]张焕敏.中等强度游泳运动对CUMS诱发抑郁中小鼠脑内HINT1表达的实验研究[D].西安体育学院,2019.