如何选育能高产L-色氨酸的菌株?

2024/6/24 15:34:31 作者:云霄

L-色氨酸是人和动物体内的一种必需氨基酸,是构成蛋白的重要组成部分,但人和动物自身不能合成L-色氨酸,必须从外界摄取。目前L-色氨酸的生产方法以微生物发酵法为主,相比传统的化学合成法和蛋白质水解法,微生物发酵法具有更低的生产成本、更加绿色环保、更易于大规模生产等显著的优越性。

富含L-色氨酸的食物

优秀菌株的影响

微生物发酵法生产L-色氨酸的过程中,微生物菌种的优劣决定着发酵生产过程中的生产工艺、生产成本甚至产品质量,因此,选育高产色氨酸优良菌株具有重要意义。常压室温等离子体(atmospheric and room temperature plas-ma,ARTP)诱变技术最近几年在科研及工业领域逐步得到应用,尤其在微生物突变育种中取得了良好的效果。与其他诱变育种技术相比,ARTP 诱变育种技术能够更有效造成 DNA 的突变,并且设备操作简单快捷,对环境条件要求较低,操作过程中安全性较高,在高效进化育种领域具有较大的应用潜力。

菌株的选育

为了提升发酵法产L-色氨酸的生产效率,使用常压室温等离子诱变育种技术,并结合结构类似物抗性定向筛选的方法,选育高产色氨酸菌株。将出发菌 Escherichia coli AC-1042 经过ARTP诱变处理后,在抗性培养基平板上筛选具有5-甲基色氨酸、对氟苯丙氨酸抗性的突变菌株,选取产酸高、遗传稳定的菌株重复进行ARTP诱变处理和抗性筛选,不断提高菌株对结构类似物的抗性水平。经过多次ARTP诱变处理和抗性筛选,获得1株色氨酸高产菌株ACTRP104,经过30L发酵罐培养44h后L-色氨酸质量浓度可以达到61.65g/L,葡萄糖转化率达到20.64%,比出发菌分别提高了20.69%和17.81%。结果表明,ARTP诱变和结构类似物抗性筛选相结合,可以有效地获得色氨酸高产突变菌株,大大提高色氨酸的发酵生产技术水平,获得的色氨酸高产菌株ACTRP104具有较好的工业化应用前景。


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