背景[1-3]
XRCC1抗体是针对XRCC1（X-Ray Repair Cross-Complementing 1）蛋白的一种特异性抗体。XRCC1蛋白是一种DNA修复蛋白，它在DNA单链断裂的修复过程中起着关键作用，尤其是在暴露于电离辐射和烷基化剂后。XRCC1（X射线修复交叉互补蛋白1）是一种重要的DNA修复蛋白，参与修复离子辐射和化学药物引起的DNA损伤。在临床研究中，XRCC1的异常表达与多种疾病有关，包括某些类型的癌症、心血管疾病和神经退行性疾病等。因此，XRCC1抗体在疾病的诊断、预后评估以及潜在的治疗靶点研究中具有重要意义。
XRCC1抗体
一、XRCC1抗体的基本信息
中文名称：XRCC1抗体
英文名称：Anti-XRCC1 Antibody
抗体类型：通常为IgG型，具体可以是单克隆抗体或多克隆抗体
宿主：常见的是兔（Rabbit）
免疫原：来源于人类XRCC1蛋白的合成肽段
纯度：高纯度，一般通过抗原亲和色谱法纯化
二、XRCC1抗体的应用范围
XRCC1抗体适用于多种实验技术，主要包括：
Western Blotting（WB）：用于检测细胞或组织裂解物中XRCC1蛋白的表达水平。
免疫组织化学（IHC）：用于在组织切片上定位XRCC1蛋白的分布。
免疫细胞化学/免疫荧光（ICC/IF）：用于在培养的细胞或组织切片上观察XRCC1蛋白的亚细胞定位。
三、XRCC1抗体的产品特性
特异性：高度特异性地结合XRCC1蛋白，不与其他蛋白质发生交叉反应。
稳定性：在适当的保存条件下，如-20℃或更低温度，可以长期保持活性。
敏感性：能够检测到较低浓度的XRCC1蛋白。
四、XRCC1抗体的使用注意事项
保存条件：按照产品说明书上的建议进行保存，避免反复冻融。
稀释比例：根据实验需要选择合适的稀释比例，一般在Western Blotting中为1:500至1:2000，在IHC和ICC/IF中为1:20至1:100。
实验前准备：确保实验所需的所有试剂和器材都已准备齐全，并按照实验步骤进行操作。
应用实例[4][5]
XRCC1抗体可以用于XRCC1和PARP1在贲门腺癌中的表达及其与放疗敏感性的关系
探讨X射线交叉互补修复基因-1(XRCC1)和聚(腺苷二磷酸核糖)聚合酶-1(PARP1)在贲门腺癌中的表达情况,并分析这两种蛋白的表达与近期放疗疗效关系;抑制人贲门腺癌AGS细胞中XRCC1的表达,通过电离辐射观察对细胞功能的影响,为XRCC1对贲门癌放疗敏感性的影响提供体外实验证据。
方法:1.收集2014年1月～2019年12月在新疆医科大学第一附属医院接受放疗的46例贲门腺癌患者的临床资料,根据疗效分为放疗敏感组(20例)和放疗抵抗组(26例),XRCC1抗体免疫组化法检测XRCC1、PARP1蛋白表达,按照评分值分为阳性表达和阴性表达。分析XRCC1、PARP1表达情况与贲门腺癌患者近期放疗疗效的关系,并采用Logistic回归模型分析影响患者放疗敏感性的独立危险因素。2.使用慢病毒感染的方式构建XRCC1基因敲低的AGS细胞系模型,通过q RT-PCR、Western Blot法验证慢病毒感染的效力。医用直线加速器提供6MV X线模拟贲门癌放射治疗环境。将AGS细胞株分为阴性对照组、单纯照射组、XRCC1敲低组、XRCC1敲低联合照射组,通过克隆形成实验计数细胞集落数,计算克隆形成率。通过CCK-8实验检测不同分组细胞的增殖情况,通过流式细胞术测定不同分组细胞的凋亡率。
XRCC1抗体结果:1.放疗抵抗组XRCC1、PARP1阳性表达率显著高于放疗敏感组(P<0.05),差异有统计学意义。2.XRCC1阳性表达组患者更易出现远处转移,差异有统计学意义(P<0.05)。3.XRCC1与PARP1在贲门腺癌中的表达呈正相关(r=0.329,P=0.025)。4.XRCC1抗体XRCC1及PARP1高表达是放疗抵抗的独立预测因素(P<0.05)。5.平板克隆实验显示,未经放疗时(0Gy)时sh XRCC1组与sh NC组细胞之间的克隆形成率差异无统计学意义(t=3.591,P=0.069);经过放疗(2Gy、4Gy)后两组细胞之间的克隆形成率差异具有显著性差异(P<0.05)。6.CCK8实验显示,在未经放疗的情况下,在0h、24h、48h、72h时sh XRCC1组与sh NC组间的OD值差异有统计学差异(P<0.05);经过放疗(6Gy)后在0h、24h时两组间差异有统计学意义(P<0.05),在48h、72h时两组之间无统计学差异。7.细胞凋亡结果显示,4组细胞凋亡率比较,经过放疗后,sh XRCC1组与sh NC组之间的凋亡率差异更显著(P<0.05)。结论:贲门腺癌患者的放疗敏感性与XRCC1、PARP1表达呈负相关,XRCC1、PARP1高表达是放疗抵抗的独立预测因素。沉默XRCC1表达能够显著促进人贲门腺癌AGS细胞放疗后细胞增殖、凋亡,提高放疗敏感性。
参考文献
[1]X-ray repair cross-complementing protein 1(XRCC1)loss promotesβ-lapachone–induced apoptosis in pancreatic cancer cells[J].Zheng Yansong;Zhang Hengce;Guo Yueting;Chen Yuan;Chen Hanglong;Liu Yingchun.BMC Cancer,2021
[2]High Poly(ADP-Ribose)Polymerase Expression Does Relate to Poor Survival in Solid Cancers:A Systematic Review and Meta-Analysis[J].Thakur Nishant;Yim Kwangil;AbdulGhafar Jamshid;Seo Kyung Jin;Chong Yosep.Cancers,2021
[3]The scaffold protein XRCC1 stabilizes the formation of polβ/gap DNA and ligase IIIα/nick DNA complexes in base excision repair.[J].Tang Qun;Çağlayan Melike.The Journal of biological chemistry,2021
[4]XRCC1 prevents toxic PARP1 trapping during DNA base excision repair.[J].Demin Annie A;Hirota Kouji;Tsuda Masataka;Adamowicz Marek;Hailstone Richard;Brazina Jan;Gittens William;Kalasova Ilona;Shao Zhengping;Zha Shan;Sasanuma Hiroyuki;Hanzlikova Hana;Takeda Shunichi;Caldecott Keith W.Molecular cell,2021
[5]夏敏.XRCC1和PARP1在贲门腺癌中的表达及其与放疗敏感性的关系[D].新疆医科大学,2023.