背景及概述[1][2]
植物甾醇具有降低血浆总胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇的效果。由于植物甾醇的水溶性和油溶性均不理想,而酯化后能明显提高在食用油和脂肪中的溶解度,甾醇酯能够在人体内转化成甾醇和脂肪酸,植物甾烷醇酯在肠道中的水解率达到90%,所以其具有植物甾醇和脂肪酸两部分的生理功能。植物甾烷醇酯主要有β-谷甾醇酯,植物甾醇酯,菜油甾醇酯三类,目前,植物甾醇酯主要应用于涂抹食品和色拉调料中。植物甾醇酯制品已经获得FDA“一般认为安全(GRAS)”的认可,成为功能性食品的一种发展方向。
含量检测[1]
步骤如下:
(1)取含植物甾醇酯的待测样品1mL,加入到约40mL溶剂乙酸乙酯中,超声波(100W)处理5min后,用乙酸乙酯定容至50mL,植物甾醇酯完全溶解于乙酸乙酯中,得到植物甾醇酯待测液(相当于3.75mg/mL的植物甾醇酯);
(2)将200μL植物甾醇酯待测液和100μL质量浓度为0.0015%的磷硫铁显色剂混合摇匀后,室温下显色25min,得到显色液;
(3)取200μL的显色液至于酶标仪中进行检测,测得待测样品的吸光光度值;
(4)取100mg植物甾醇酯标准样品置于烧杯中,加入80mL乙酸乙酯,超声处理至溶解完全,转移至100mL容量瓶中用乙酸乙酯定容,得到植物甾醇酯标准品待测液,超声5min可完全溶解;
使用时,吸取上述植物甾醇酯标准品待测液10mL,用乙酸乙酯定容至100mL,得到植物甾醇酯使用液A,其浓度为100μg/mL。吸取上述待测液20mL,用乙酸乙酯定容至100mL,得到植物甾醇酯使用液B,其浓度为200μg/mL。
按表1分别添加植物甾醇酯使用液A或B,并振荡。然后,在室温下显色25min,在492nm下用酶标仪测定其吸光度(A),以植物甾醇酯浓度为横坐标,吸光度(A)为纵坐标,绘制标准曲线。
表1植物甾醇酯标准曲线制作的试剂添加情况
所得标准曲线如图1所示,植物甾醇酯浓度与吸光度值的关系为:y=0.0051x+0.0667,R2=0.9974,浓度范围为25~125μg/mL。
(5)将步骤(3)中待测样品的吸光光度值代入步骤(4)的线性回归方程中,得到待测样品中植物甾醇酯的含量,结果测得甾醇酯含量为(76.4±0.7)μg/mL。
制剂[2]
植物甾醇酯微胶囊的制备方法如下:
1.水相壁材溶液的配制:
称取阿拉伯胶溶解在温度60℃500mL去离子水中,加入麦芽糊精溶解,在温度60℃条件下水浴静置30min,再加入蔗糖酯混合均匀,制成水相壁材溶液。水相壁材溶液中阿拉伯胶的质量为32.33g(其质量分数为4.31%),麦芽糊精的质量为48.53g(其质量分数为6.47%),蔗糖酯的质量为6.00g(其质量分数为0.8%);
各组分的质量分数=[各组分质量/(总固形物质量+溶剂质量)]×100%;
2、油相芯材溶液的配制:
在植物甾醇酯中加入单甘酯,混合均匀,制成油相芯材溶液。油相芯材溶液中植物甾醇酯的质量为161.70g(其质量分数为21.56%),单甘脂的质量为1.50g(其质量分数为0.2%);
3、超声波辅助混合:
将水相壁材溶液和油相芯材溶液在温度60℃的水浴条件下混匀,超声波辅助搅拌5min,得混合溶液。混合溶液中油相芯材溶液和水相壁材溶液的质量比为1:0.5;
4、高剪切乳化:
用高剪切乳化机将所制得的混合溶液进行乳化,剪切转速为10000r/min,时间为5min,得乳化液;
5、高压均质:
将乳化液用高压均质机在压力为35MPa条件下,均质2次;
6、喷雾干燥:
将高压均质后的乳化液在175℃进风温度、60℃进料温度、5 ml/min进料泵速、350 L/h空气流量的条件下喷雾干燥;
7、筛分:
将喷雾干燥制得的粉末过100目筛,即可得植物甾醇酯微胶囊产品。
合成[3]
一种植物甾醇酯的高效合成及分离方法,步骤如下:
(1)将植物甾醇、脂肪酸与催化剂混合,经酯化反应后得到植物甾醇酯粗品;
所述的催化剂以Cu(NO3)2为活性组分,纳米羟基磷灰石为载体;
(2)将步骤(1)得到的植物甾醇酯粗品过滤后,与结晶溶剂按摩尔比为1~1:10混合,经吸附脱色,然后在-18~10℃下冷却结晶18~30h,得到所述的植物甾醇酯;
主要参考资料
[1] [中国发明] CN201910085592.4 一种利用酶标仪准确检测植物甾醇酯含量的方法
[2] [中国发明] CN201310332851.1 一种植物甾醇酯微胶囊的制备方法
[3] [中国发明,中国发明授权] CN201410387486.9 一种植物甾醇酯的高效合成及分离方法