中文名:钙黄绿素-AM
英文名:Calcein-AM
中文别名:钙黄绿素乙酰氧基甲酯
英文别名:Calcein AM|Calcein-AM|148504-34-1|Glycine, N,N'-[[3',6'-bis(acetyloxy)-3-oxospiro[isobenzofuran-1(3H),9'-[9H]xanthene]-2',7'-diyl]bis(methylene)]bis[N-[2-[(acetyloxy)methoxy]-2-oxoethyl]-, 1,1'-bis[(acetyloxy)methyl] ester|acetyloxymethyl 2-[[2-(acetyloxy
纯度:≥90% (HPLC)
货号:C273362
包装:1mg、5mg
Cas号:148504-34-1
存储温度:-20°C储存,充氩
产品介绍:
产品描述
Calcein, AM是一种可对活细胞进行荧光标记的细胞染色试剂,它穿透细胞膜进入细胞后被细胞内的酯酶剪切形成Calcein,从而被滞留在细胞内,发出强绿色荧光。与其它同类试剂(如BCECF, AM和CFDA)相比,Calcein, AM的细胞毒性很低。Calcein的激发和发射波长分别为490 nm和515 nm。
Calcein, AM仅对活细胞染色。作为核染色染料的PI不能穿过活细胞的细胞膜,它穿过死细胞膜的无序区域而到达细胞核,并嵌入细胞的DNA双螺旋从而产生红色荧光(激发:535 nm,发射:617 nm),因此PI仅对死细胞染色。由于Calcein和PI-DNA都可被490 nm激发,因此可用荧光显微镜同时观察活细胞和死细胞。用545 nm激发,仅可观察到死细胞。根据以上特点,Calcein, AM和PI经常被结合用来作为活细胞和死细胞的双重染色。
由于不同细胞系的最佳染色条件不同,我们建议个别确定Calcein, AM和PI的合适浓度。
使用方法
(1)用DMSO制备1 mM 的Calcein, AM溶液,并用PBS将其稀释制成1~50 μM的Calcein, AM溶液。
(2)将1/10细胞培养基体积的Calcein, AM溶液加入到细胞培养基中。
(3)在37℃培养细胞15~30分钟。
(4)用PBS或适当的缓冲液洗涤细胞两次。
(5)用490 nm激发波长,515 nm发射波长的滤光片的荧光显微镜观察细胞。
a) 如果Calcein, AM很难进入细胞,可以使用表面活性剂,如Pluronic F127。
b) 也可以用1/10浓度的Calcein, AM溶液代替培养基。
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