产 品 说 明
中文名称：钙黄绿素-AM
英文名称：Calcein-AM
产品货号：C-4041
产品规格：1 mg
应用范围：细胞荧光染料
产品参数
外观：可溶于DMSO的无色固体
λEx/λEm (calcein) = 494/517 nm (pH 8)
贮存条件：-20℃ 避光保存
保质期：12个月
分子式：C46H46N2O23
分子量：995
分子结构图：
产品介绍
Calcein-AM是一种对活细胞进行荧光标记的
细胞染色试剂，它可以穿透细胞膜进入细胞，被细
胞内的酯酶剪切形成Calcein，从而被滞留在细胞内，
发出强绿色荧光。与其它同类试剂（如BCECF, AM
和CFDA）相比，Calcein-AM的细胞毒性很低。
Calcein的激发和发射波长分别为490 nm和515 nm。
产品介绍
Calcein-AM仅对活细胞染色。作为核染色染料的PI
不能穿过活细胞的细胞膜，因此PI仅对死细胞染色。PI穿
过死细胞膜的无序区域而到达细胞核，并嵌入细胞的DNA
双螺旋从而产生红色荧光（激发：535 nm，发射：617
nm）。由于Calcein和PI-DNA都可被490 nm激发，因此
可用荧光显微镜同时观察活细胞和死细胞。用545 nm激发，
仅可观察到死细胞。根据以上特点，Calcein-AM和PI经常
被结合用来作为活细胞和死细胞的双重染色。由于不同细胞
系的染色条件不同，我们建议根据实际情况分别确定
Calcein-AM和PI的合适浓度。
使用方法
1、用DMSO制备1 mM 的Calcein-AM溶液，并用PBS将
其稀释制成1～50 μM的Calcein-AM溶液。
2、染色HeLa细胞等贴壁细胞时，先用Trypsin-EDTA等
消化细胞，制备成细胞悬液。
3、将细胞悬液离心3分钟 (1000 rpm)。
4、去除上清液，加入PBS缓冲液，细胞数量调整至105-
106/ml，再用移液器充分混匀。
注：由于培养基中的血清等含有酯酶，会分解
Calcein-AM，导致空白背景数值上升，所以需要离心数
次，用PBS洗涤数次直到完全洗净。
5、将200 μL细胞悬液移至小试管中，加入100 μL染色
溶液，在37℃下孵育15分钟。
6、 在盖玻片上滴加适量的染色的细胞溶液。用490 nm
激发波长，515 nm发射波长滤光片的荧光显微镜观察细胞。
1）如果Calcein-AM很难进入细胞，可以使用表面活性剂，
如Pluronic F127。
2） 可以用1/10浓度的Calcein-AM溶液代替培养基。
注意事项
1、Calcein-AM的酯键遇到湿气会分解，使用后请在
-20℃下密闭冷冻保存，防止水分进入。
2、Calcein-AM储备液用缓冲液或培养基等稀释时尽
量现配现用。
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温馨提示：不可用于临床治疗。