大鼠皮下脂肪组织提取物的应用

2019/12/24 13:27:00

背景[1-6]

大鼠皮下脂肪组织提取物来自新鲜或冷冻大鼠皮下脂肪组织中可以直接用于基因克隆,表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。脂肪组织是体内贮存能量的仓库,主要提供热能;保护内脏,维持体温;协助脂溶性维生素的吸收;参与机体各方面的代谢活动等等。皮下脂肪是贮存于皮下的脂肪组织,在真皮层以下,深层筋膜层以上被浅筋膜包裹的储能细胞。

皮下脂肪主要分为两种脂肪细胞,白色脂肪细胞(单泡脂肪细胞)和褐色脂肪细胞(多泡脂肪细胞)。典型的白色脂肪细胞中含有一滴大大的,由膜包裹的油滴,细胞质含量非常少,细胞核挤在一边,呈扁平型。褐色脂肪细胞含有许多小的油滴分散在细胞质内,细胞核呈圆形,因含有大量线粒体而呈现棕色。棕色脂肪细胞主要功能是大量产热,在婴儿期大量存在,保证婴儿的供暖(所以婴儿其实并不怎么怕冷,同样条件下儿童比成人抗冻的多),成年过程中慢慢退化,变成类似白色脂肪细胞的组织。(成年冬眠动物中含量很大)。

新近研究显示成年人也有褐色脂肪细胞,主要存在于颈部等裸露在外的地方。寒冷处理使其更加可见。 两种细胞的来源不同,研究显示棕色脂肪细胞和骨骼肌细胞由同一干细胞发育而来,其成熟细胞上也带有相同的标记分子(Myf5),而白色脂肪细胞不带有。在转录因子PRDM16存在的情况下,骨骼肌细胞可以转为褐色脂肪细胞,缺少转录因子PRDM16的情况下褐色脂肪细胞可转为骨骼肌细胞。说明褐色脂肪细胞更加类似于骨骼肌细胞。或许只有白色脂肪细胞才是人体真正用来贮存脂肪的细胞,而褐色脂肪细胞更加类似于利用能量的功能性细胞,肌肉细胞利用糖和脂肪产生能量运动,棕色脂肪细胞利用脂肪产生能量放热。

应用[7][8]

用于脂肪组织提取物对组织工程室内构建物早期血管形成及成脂化影响的研究

近年来脂肪组织工程技术为解决软组织缺损的修复提出了全新的思路。在脂肪组织工程中细胞、支架和微环境是三个主要因素,但不管是通过优化种子细胞或者改性生物活性材料支架或者改善局部微环境,最终构建的工程化脂肪组织,其体积都无法超过1ml,并且在组织构成和组织稳定上都难以达到满意的结果。

把带血管蒂的腹壁脂肪瓣放入中空的小室内植入老鼠的腹股沟皮下,发现脂肪组织显著增长,组织形态学分析显示增加的组织是正常的血管化成熟脂肪组织,形成了“脂肪组织工程室”。2011年将这种方法应用到大动物,体积达56.5ml,然而所产生的脂肪组织的体积未达到置入工程室的容积,生长受到限制,并且组织形态学研究发现其组织成分为;纤维结缔组织、脂肪组织、血管、PLGA,并且纤维结缔组织的量和脂肪组织的量是相同的。我们手术治疗软组织缺损的目的不仅仅是为了填充凹陷,更重要的是要形成具有自然外观和美学功能,并且与身体周围组织结合并长期维持稳定的自然组织。显而易见,脂肪组织工程内所构建的脂肪组织并不完全适合应用于临床实践中。

随着深入的研究,目前认为工程化脂肪组织的体积主要取决于:一、早期的快速血管化,这是限制组织工程技术最终构建物体积以及组织结构成熟的关键因素;二、可控降解、组织相容性良好的生物材料;三、利于符合构建物发构建物发展的微环境;四、稳定的物理屏障以保障构建物体积和组织形态的长期稳定。脂肪组织本身具有很独特的生理结构,脂肪组织中除了丰富的血管网络之外,90%的空间由高耗氧、高耗能的脂肪细胞构成,同时作为机体重要的内分泌器官,脂肪组织能分泌多种脂肪因子,并且拥有丰富的生长因子和细胞因子,同时参与了血管化和脂肪化的过程Jertta-RiinaSarkanen等从成熟的脂肪组织中提取的脂肪组织提取物(ATE)包含各种成熟脂肪组织的生长因子和细胞因子,在体外能够诱导血管生成和脂肪生成。

参考文献

[1]Mechanotransduction in adipocytes[J].Naama Shoham,Amit Gefen.Journal of Biomechanics.2011(1)

[2]Progenitor‐Enriched Adipose Tissue Transplantation as Rescue for Breast Implant Complications[J].KotaroYoshimura,YukoAsano,NoriyukiAoi,MasakazuKurita,YoshioOshima,KatsujiroSato,KeitaInoue,HirotakaSuga,HitomiEto,HarunosukeKato,KiyonoriHarii.The Breast Journal.2010(2)

[3]Characterization of Structure and Cellular Components of Aspirated and Excised Adipose Tissue[J].Hitomi Eto,Hirotaka Suga,Daisuke Matsumoto,Keita Inoue,Noriyuki Aoi,Harunosuke Kato,Jun Araki,Kotaro Yoshimura.Plastic and Reconstructive Surgery.2009(4)

[4]Control of Stem Cell Fate by Physical Interactions with the Extracellular Matrix[J].Farshid Guilak,Daniel M.Cohen,Bradley T.Estes,Jeffrey M.Gimble,Wolfgang Liedtke,Christopher S.Chen.Cell Stem Cell.2009(1)

[5]Compressive force inhibits adipogenesis through COX-2-mediated down-regulation of PPARγ2 and C/EBPα[J].Md.Golam Hossain,Takeo Iwata,Noriko Mizusawa,Shahidan Wan Nazatul Shima,Toru Okutsu,Kyoko Ishimoto,Katsuhiko Yoshimoto.Journal of Bioscience and Bioengineering.2009(3)

[6]The development and endocrine functions of adipose tissue[J].Sylvia P.Poulos,Dorothy B.Hausman,Gary J.Hausman.Molecular and Cellular Endocrinology.2009(1)

[7]Angiogenesis and development of adipose tissue[J].V.Christiaens,H.R.Lijnen.Molecular and Cellular Endocrinology.2009(1)

[8]卢子敬.脂肪组织提取物对组织工程室内构建物早期血管形成及成脂化影响的研究[D].南方医科大学,2015.

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