pCAG-D1R病毒基因质粒使用说明

2019/12/31 10:14:46

pCAG-D1R病毒基因质粒

基本信息

启动子: CAG

原核抗性: Amp

真核抗性: Puro

克隆菌株: Stbl3

培养条件: 37℃

质粒属性

质粒宿主: 哺乳细胞

质粒用途: 蛋白表达

片段类型: 基因CDS

片段物种: 病毒

原核抗性: 氨苄青霉素

真核抗性: 嘌呤霉素

质粒图谱

pCAG-D1R病毒基因质粒使用说明

1、收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20μl无菌水溶解质粒,室温放置1min;

2、从-80℃冰箱中取出相应的感受态,置于冰盒上解冻,并做好标记;

3、取2μl质粒加至100μl感受态中,冰浴30min;

4、42℃热激90s,再冰浴2min;

5、加入900μl无抗的LB液体培养基,180rpm震荡培养45min;

6、6000rpm离心5min,仅留100ul上清混匀菌体沉淀;

7、混匀后的菌液加至对应抗性的LB平板上,倒入适量玻璃珠,涂匀液体;

8、将平板正向培养1h,再倒置培养12h~16h;

9、挑取单克隆菌落至对应抗性的LB液体培养基中,震荡培养12h~16h,根据实验需要提取质粒。

pCAG-D1R病毒基因质粒注意事项

1、如果您收到的是甘油菌种,请先四区划线,挑取单克隆培养。

2、如果第二天转化平板长的过多,请将质粒按比例稀释后再转化。

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